Что такое флуоресцентная нерадиоактивная гибридизация? FISH тест

Флуоресцентная нерадиоактивная гибридизация in situ (в физиологических условиях), или FISH тест, представляет собой метод, основанный на использовании не радиоактивных зондов (например, биотинилированной ДНК), идентифицируемых затем с помощью флуоресцентных меток.

FISH тест является новым, разработанным в последнее время процессом, который позволяет составить карту генетического материала в клетках человека, включая специфические гены и части генов.

Поскольку FISH тест способен выявить генетические нарушения, ассоциируемые с раком, он может использоваться для диагностирования некоторых типов этого заболевания. В тех случаях, когда тип рака был ранее диагностирован, FISH тест может также предоставить дополнительную информацию, которая поможет прогнозировать исход заболевания и реакцию пациента на лечение химиотерапевтическими препаратами.

Например, у пациентов с раком груди FISH тест образцов раковых тканей, извлеченных с помощью биопсии, может показать, имеются ли в раковых клетках дополнительные копии гена HER2 (рецептор эпидермального фактора роста). Клетки с дополнительными копиями этого гена имеют больше рецепторов, которые принимают сигналы, стимулирующие рост раковых клеток груди.

Наличие дополнительных копий этого гена позволяет врачу сделать вывод о целесообразности назначения пациенту лечения с помощью препарата Herceptin (trastuzumab), который блокирует сигналы роста клеток, получаемые рецепторами гена HER2.

Поскольку FISH тест довольно дорог и не во всех медицинских учреждениях доступен, он пока еще применяется реже, чем другой тест на рак груди — иммуногистохимическое исследование (IHC).

КАК РАБОТАЕТ FISH ТЕСТ

FISI тест проводится на образце ткани пациента. Специальные контрастные вещества присоединяются к специфическим частям определенных хромосом, чтобы можно было впоследствии их визуализировать и подсчитать количество под флуоресцентным микроскопом. Полученпые данные позволяют выявить такие способствующие развитию рака аномалии, как:

Транслокация. Часть одной хромосомы отрывается и перемещается в другую хромосому.

Инверсия. Часть хромосомы расположена в обратном (реверсивном) порядке, хотя все еще прикреплена к той же самой хромосоме. Делеция. Часть хромосомы отсутствует.

Дупликация. Часть хромосомы скопировалась, и клетка содержит слишком много копий.

Транслокация даст врачу основание для диагностирования некоторых типов лейкемии (злокачественное заболевание клеток крови), лимфомы (злокачественная опухоль лимфатической системы) и саркомы (злокачественная опухоль соединительной ткани). Выявление дупликации в раковых клетках груди может помочь выбрать оптимальный курс лечения.

Одно из преимуществ FISH теста но сравнению со стандартными цитогенетическими (на клеточные гены) тестами заключается в том, что этот тест позволяет идентифицировать генетические изменения, которые слишком малы, чтобы их можно было увидеть в обычный микроскоп. Другое преимущество состоит в том, что FISH тест не обязательно проводить на клетках, которые находятся в стадии активного деления, в то время как другие типы тестов нельзя проводить до тех пор, пока раковые клетки не будут выращиваться в лабораторных условиях в течение двух недель. Вся процедура тестирования занимает до трех недель, тогда как результаты FISH теста могут быть получены уже через несколько дней.

ПРИМЕРЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ FISH ТЕСТА

FISH тест чаще всего испольэуется для выявления генетических нарушений при раке груди, однако он может также предоставить полезную информацию для диагностирования многих других типов рака.

При диагностировании, например, рака мочевого пузыря, FISH тест клеток мочевыводящих путей дает более достоверные результаты, чем стандартный тест на раковые клетки. Кроме того, FISH тест может выявить повторное проявление рака мочевого пузыря на 3—6 месяцев раньше, чем стандартный тест.

FISH тест также может помочь идентифицировать хромосомные аномалии при различных типах лейкемии, в том числе при хронических лимфоцитарных лейкозах, некоторые разновидности которых считаются наиболее агрессивными формами заболевания. Пациенты с агрессивными формами хронического лимфоцитарного лейкоза нуждаются в неотложном лечении, тогда как пациенты, страдающие менее агрессивной формой, могут находиться только под наблюдением врача.

💊 Понимание HER2 FISH Тестирование

Что такое HER2?

Человеческий эпидермальный рост фактор-рецептор 2 (HER2) отвечает за продуцирование белков HER2. Белки HER2 представляют собой рецепторы, которые присутствуют на некоторых раковых клетках рака молочной железы. Когда они активируются, эти рецепторы сигнализируют клетки рака молочной железы разделить и размножаться. Обычно рецепторы HER2 регулируют и контролируют рост клеток молочной железы, сохраняя их на здоровом уровне.

Однако ген HER2 сверхэкспрессируется примерно в каждом из пяти случаев рака молочной железы. Это означает, что вместо этого имея одну копию гена от каждого родителя, у вас есть несколько генов HER2. Когда это происходит, это известно как усиление гена HER2.

Эти дополнительные гены затем делают слишком много рецепторов HER2. n как гиперэкспрессия белкового рецептора HER2. Слишком много генов и слишком много рецепторов заставляют клетки молочной железы расти и делить неконтролируемым образом. Это может привести к агрессивному росту опухоли.

Как это может помочь в тестировании HER2?

Дополнительные рецепторы HER2 способствуют росту рака молочной железы. HER2-положительные раковые заболевания молочной железы часто более агрессивны, чем HER2-негативные раковые опухоли молочной железы. HER2-положительный рак молочной железы также с большей вероятностью повторится.

Существуют методы, специально предназначенные для нацеливания на рецептор HER2, которые очень эффективны при лечении HER2-положительного рака молочной железы. Этот тип рака молочной железы вряд ли будет реагировать на гормональную терапию.

Если у вас рак молочной железы, вам нужно знать, является ли ваш рак HER2-положительным или HER2-отрицательным. Результат имеет большое значение, когда приходит время обсудить варианты лечения и перспективы.

Типы тестовТипы тестов

Чтобы определить, является ли ваш рак молочной железы положительным HER2, ваш врач закажет тестирование. Два типа тестов, одобренных для диагностики HER2, — это иммуногистохимия (IHC) и гибридизация in situ (ISH).

Тесты на иммуногистохимию (IHC)

Тесты на иммуногистохимию (IHC) проводятся, чтобы убедиться, что у клеток рака молочной железы слишком много рецепторов белка HER2. Результаты означают следующее:

• Результат 0 отрицателен.
• Результат 1+ также отрицательный.
• Результат 2+ считается пограничным.
• Результат 3+ положительный.

Во время теста IHC патологи анализируют ткань груди под микроскопом. Они используют специальные пятна, чтобы увидеть, сколько рецепторов присутствует на клетках рака молочной железы. Дальнейшее тестирование не требуется для результата 0 или 1+. Результат 2+ считается двусмысленным или неопределенным. Дальнейшее тестирование потребуется.

Тесты гибридизации in situ (ISH)

Если указано дальнейшее тестирование, следующим шагом будет тестирование ISH. Важно, чтобы тестирование HER2 проводилось опытными патологоанатомами в центральной лаборатории с использованием одобренных FDA наборов для тестирования, чтобы избежать неточных результатов теста.

Двумя основн

Определение HER2 статуса опухоли методом иммунофлуоресцентной гибридизации in situ (FISH) (Determination of HER2 Status of Tumor, Fluorescence In Situ Hybridization)

Метод определения флуоресцентная гибридизация in situ.

Исследуемый материал Смотрите в описании

Доступен выезд на дом

Исследование применяется для подбора индивидуальной адъювантной химиотерапии при раке молочной железы или при раке желудка. 

Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место среди онкологических заболеваний у женщин. Клетки опухолей молочной железы могут содержать различные типы рецепторов, которые чувствительны к определенным веществам (гормонам или другим биологически активным молекулам). В зависимости от наличия в опухолевых клетках рецепторов гормонов (эстрогенов и прогестерона) или рецептора эпидермального фактора роста человека тип 2 (Human Epidermal Growth Factor Receptor 2, HER2), выделяют гормон-рецептор-положительный, HER2-положительный и тройной негативный РМЖ. Это важно учитывать при индивидуальном подборе терапии и для прогноза успеха лечения. 

HER2 – это рецептор, который присутствует в тканях и в норме, участвуя в регуляции деления и дифференцировки клеток. Его избыток на поверхности опухолевых клеток (гиперэкспрессия) предопределяет быстрый неконтролируемый рост новообразования, высокий риск метастазирования и низкую эффективность некоторых видов лечения. Гиперэкспрессия HER2 при некоторых подтипах РМЖ ведет к усилению пролиферации и ангиогенеза, а также к нарушению регуляции апоптоза (генетически запрограммированного самоуничтожения клеток). В настоящее время имеются препараты, мишенью которых является рецептор HER2. Это, в частности, герцептин (трастузумаб), представляющий собой моноклональные антитела против HER2/neu рецепторов. 

Амплификация и гиперэкспрессия онкогена HER2 (ЕrbB-2) являются относительно специфическими событиями для карциномы молочной железы и практически не встречаются в опухолях других локализаций. Рак желудка (РЖ) – одно из немногих исключений: активация HER2 отмечается примерно в 10-15% случаев злокачественных новообразований этого органа и коррелирует с агрессивным течением заболевания. При HER2-положительном раке молочной железы на поверхности опухолевых клеток может присутствовать избыток HER2-рецепторов (что обозначается как положительный HER2-статус, или положительный герцепт-статус). Это явление наблюдается у 15-20% женщин, страдающих РМЖ. Оценка HER2-статуса важна для определения тактики лечения. 

Основные стандартизованные методы выявления гиперэкспрессии HER2/neu и/или амплификации гена HER2/neu – иммуногистохимический (ИГХ) метод и флуоресцентная гибридизация in situ (FISH). Оба исследования проводятся на гистологических препаратах (срезах материала опухоли, залитого в парафин) с использованием поликлональных антител (ИГХ), флуоресцентных зондов (FISH) и разных систем визуализации. 

При оценке результатов ИГХ-реакции учитывается экспрессия только в инвазивном компоненте опухоли. Оценка результатов реакции проводится с помощью балльной шкалы: 0, 1+, 2+, 3+, разработанной производителем теста и получившей одобрение экспертов. Герцепт-статус, оцененный как 0 и 1+, следует считать негативным – гиперэкспрессия белка отсутствует, что соотносится с отсутствием амплификации его гена. Герцепт-статус, оцененный как 3+, является позитивным, т. е. гиперэкспрессия белка присутствует, что соотносится с наличием амплификации гена. Герцепт-статус 2+ считается неопределенным, т. е. по экспрессии белка, определенной на основании иммуногистохимической реакции, нельзя уверенно судить об амплификации гена, поэтому требуется исследование, прямо выявляющее наличие или отсутствие амплификации. FISH-метод применяют на срезах с того же образца (блока), на котором проводилось иммуногистохимическое исследование. При FISH-гибридизации оценку наличия амплификации гена HER2 проводят путем подсчета соотношения красных флуоресцентных (соответствующих помеченным генам HER2) и зеленых флуоресцентных сигналов, которыми помечен центромерный участок 17-й хромосомы. Соотношение больше 2 свидетельствует о наличии амплификации HER2. Метод FISH является более чувствительным, чем ИГХ, так как позволяет напрямую оценивать наличие или отсутствие амплификации.

Материал для исследования: парафиновый блок с биоптатом опухоли. 

Внимание! ОБЯЗАТЕЛЬНО:

• предметное стекло с ИГХ-окрашиванием с антителами к HER2/neu
• направление от врача или выписка с результатами гистологического и ИГХ-исследования с антителами к Her-2/neu

Литература

• Завалишина Л.Э., Франк Г.А. Морфологическое исследование HER2 статуса. Методика и атлас. — М.: Изд. «Media Medica». 2006:98.
• Злокачественные заболевания в России в 2011 году (заболеваемость и смертность). Под ред. В.И. Чиссова, В.В. Старинского, Г.В. Петровой. — М.: ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздрава России. 2013:289. 
• Онкология. Клинические рекомендации. Ассоциация онкологов России. Под ред. В.И. Чиссова, С.Л. Дарьяловой. — М.: Изд. «ГЭОТАР-Медиа». 2008:702.
• Bang Y.J., Van Cutsem E., Feyereislova A., Chung H.C., Shen L., Sawaki A. et al. Trastuzumab in combination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER2-positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer (ToGA): a phase 3, open-label, randomised controlled trial. Lancet. 2010;376:687-697. 
• Dabbs D.J. Diagnostic Immunohistochemistry: Theranostic and Genomic Applications. Elsevier, 4-th Edition. 2013:960.
• Ferlay J., Shin H.R., Bray F., Forman D., Mathers C., Parkin D.M. GLOBOCAN 2008, Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC Cancer Base № 10. Lyon, France: International Agency for Research on Cancer; 2010. Available from: http://globocan.iarc.fr.
• Goldhirsch A., Glick J.H., Gelber R.D., Coates A.S., Thurlimann В., Senn H.J. Meeting Highlights: International Expert Consensus on the Primary Therapy of Early Breast Cancer 2005. Annals of Oncology. 2005;16(10):1569-1583.
• Kurman R.J., Carcangiu M.L., Herrington C.S., Young R.H. WHO Classification of Tumours of the Female Reproductive Organs. WHO Press, 4-th Edition. 2014;4:316. 
• NordiQC. http://www.nordiqc.org.
• Park D.I., Yun J.W., Park J.H. et al. Her2/neu amplification is an independent prognostic factor in gastric cancer. Digestive Diseases and Sciences. 2006;51(8):1371-1379.
• Slamon D. et al. Adjuvant Trastuzumab in HER2-Positive Breast Cancer. The New England Journal of Medicine. 2011;365:1273-1283.

test fish — с английского на все языки

̈ɪfɪʃ I
1. сущ.
1) а) мн. часто неизм. рыба б) другие хладнокровные обитатели моря ≈ напр., крабы, устрицы и т.д. to catch (a) fish ≈ ловить рыбу baked fish ≈ печеная рыба fresh fish ≈ свежая рыба frozen fish ≈ мороженая рыба Fish bite at bait. ≈ Рыба клюет на приманку. broiled fish ≈ жареная рыба dried fish ≈ сушеная рыба filleted fish ≈ рыбное филе freshwater fish ≈ пресноводная рыба fried fish ≈ жареная рыба saltwater fish ≈ морская рыба smoked fish ≈ копченая рыба tropical fish ≈ тропическая рыба school of fish ≈ стая рыб shoal of fish ≈ стая рыб fish corral ≈ садок для рыбы
2) а) разг. лицо, разыскиваемое полицией б) пренебр. тип, парень queer fish, odd fish ≈ странный тип, чудак Syn: fellow, person в) разг. молокосос, простак Syn: sucker
3) то, что по форме напоминает рыбу а) (the Fish или Fishes) Рыбы (созвездие и знак зодиака) Syn: pisces б) торпеда;
петарда Syn: torpedo, squib
4) амер.;
разг. доллар ∙ to drink like a fish ≈ пить не просыхая all’s fish that comes to his net посл. ≈ доброму вору все впору;
он ничем не брезгует to have other fish to fry ≈ иметь другие дела to make fish of one and flesh of another ≈ относиться к людям неровно, пристрастно a pretty kettle of fish! разг. ≈ веселенькая история!;
хорошенькое дело! neither fish, flesh nor fowl ≈ ни рыба ни мясо;
ни то ни се neither fish nor flesh, neither fish nor good red herring ≈ ни рыба ни мясо;
ни то ни се fish story ≈ ‘охотничий рассказ’;
преувеличение, небылицы feed the fishes
2. гл.
1) ловить рыбу, удить рыбу to go fishing ≈ рыбачить
2) искать что-л. под водой, вылавливать что-л. в воде (напр., жемчуг, кораллы) ∙ fish for fish out fish up to fish or cut bait амер. ≈ сделать выбор, не откладывая в долгий ящик;
принять то или иное решение
3. прил. рыбный а) относящийся к рыбной ловле fish-line ≈ рыболовная леска б) приготовленный из рыбы ≈ о пище fish-soup ≈ уха, рыбный суп в) похожий на рыбу, имеющий во внешности что-то рыбье fish eyes ≈ выпученные глаза( ‘рыбьи глаза’) II
1. сущ., тех.
1) мор. фиш( в якорном устройстве) ;
шкало (у мачты)
2) = fish-plate
2. гл.;
тех.
1) брать на фиш (якорь)
2) соединять накладкой;
скреплять стыком III сущ. фишка (раньше очень часто выполнялась в форме рыбки, отсюда и английское название, совпадающее со словом «рыба» — «fish») Syn: counter, chip рыба — fresh-water * пресноводная /речная/ рыба — salt-water * морская рыба — young * мальки, молодь — dried * вяленая /сушеная/ рыба — to catch ten *es поймать десять рыб рыба, рыбные блюда — * soup рыбный суп, уха — to eat * on Fridays по пятницам есть рыбу — * and chips рыба с жареной картошкой (разговорное) крабы, устрицы и т. п.( разговорное) рыбная ловля — * stakes сети на кольях, рыбный закол( Fishes) Рыбы (созвездие и знак зодиака) (разговорное) тип, персона — big * «кит», большая шишка — poor * жалкая личность — cold * неприветливый, необщительный человек;
бука — cool * нахал, наглец — dull * скучный /нудный/ человек — odd /queer, strange/ * чудак, странный тип — shy * робкий /застенчивый/ человек (американизм) (сленг) доллар — 500 * пятьсот долларов «рыбка», прыжок танцовщицы с подхватом ее партнером > to feel like a * out of water чувствовать себя как рыба, вынутая из воды > to cry stinking * хулить свой товар;
выносить сор из избы > to feed the *es утонуть, «кормить рыб»;
страдать морской болезнью > the great * eat the small сильные пожирают слабых > to have other * to fry иметь другие /более важные/ дела > to hook /to land/ one’s * добиться своего, поймать ( кого-л.) на удочку > to make * of one and flesh /fowl/ of another относиться к людям пристрастно > neither * nor flesh /nor good red herring/, neither *, flesh nor fowl ни рыба ни мясо;
ни то ни се > never fry a * till it’s caught не радуйся раньше времени;
не дели шкуру неубитого медведя > never offer to teach * to swim смешно учить рыбу плавать;
не учи ученого > to venture a small * to catch a great one рискнуть малым ради большого > as dumb as a * нем как рыба > as drunk as a * пьян в стельку > a * story «охотничий» рассказ;
преувеличение > * begins to stink at the head рыба гниет с головы > all is * that comes to his net (пословица) он ничем не брезгует;
доброму вору все впору > the best * swim near the bottom( пословица) лучшая рыба по дну ходит;
хорошее нелегко дается > he who would catch * must not mind getting wet (пословица) без труда не вынешь и рыбку из пруда > it is a silly * that is caught twice with the same bait (пословица) глуп тот, кто дважды попадается на ту же удочку ловить, удить рыбу — to * and hunt быть рыболовом и охотником использовать для рыбной ловли — to * a stream ловить рыбу в ручье — the men who * the waters люди, занимающиеся рыболовством в этих водах быть пригодным для рыбной ловли — the pond *es well в этом пруду хорошо ловится рыба (for) искать (в воде) ;
(разговорное) стараться получить — to * for pearls искать жемчуг — to * for information добывать сведения /информацию/ — to * for compliments напрашиваться на комплименты( разговорное) вытаскивать, извлекать (тж. * out) — to * a coin from one’s pocket вытащить монету из кармана — several derelict cars are *ed out of the river every year из реки каждый год извлекают несколько брошенных автомобилей — why are you *ing around in your pockets? что вы ищете у себя в карманах? (американизм) (сельскохозяйственное) удобрять (землю) рыбными отходами > to * in troubled waters ловить рыбку в мутной воде > to * or cut bait (американизм) принять то или иное решение (морское) фиш (в якорном устройстве) ;
шкало (у мачты) (авиация) (жаргон) торпеда (морское) брать на фиш (якорь) ;
накладывать шкало (у мачты) (авиация) (жаргон) торпедировать фишка (техническое) накладка( техническое) соединять накладкой ~ attr. рыбный;
fish corral садок для рыбы;
all’s fish that comes to his net посл. = доброму вору все впору;
он ничем не брезгует ~ пренебр. тип;
cool fish нахал, наглец;
odd (или queer) fish чудак;
poor fish никудышный человек edible ~ съедобная рыба to feed the fishes разг. страдать морской болезнью;
to have other fish to fry иметь другие дела to feed the fishes разг. утонуть fish = fishplate ~ амер. разг. доллар ~ ловить или удить рыбу ~ (pl часто без измен.) рыба;
распр. тж. крабы, устрицы;
fish and chips рыба с жареной картошкой ~ (the F. или Fishes) Рыбы (созвездие и знак зодиака) ~ тех. соединять накладкой;
скреплять стыком ~ пренебр. тип;
cool fish нахал, наглец;
odd (или queer) fish чудак;
poor fish никудышный человек ~ мор. фиш (в якорном устройстве) ;
шкало (у мачты) ~ фишка ~ attr. рыбный;
fish corral садок для рыбы;
all’s fish that comes to his net посл. = доброму вору все впору;
он ничем не брезгует ~ attr. рыбный;
fish corral садок для рыбы;
all’s fish that comes to his net посл. = доброму вору все впору;
он ничем не брезгует ~ for разг. выуживать( секреты) ~ for искать в воде (жемчуг и т. п.) ~ for разг. напрашиваться, набиваться;
to fish for compliments( for an invitation) напрашиваться на комплименты (на приглашение) ~ for разг. напрашиваться, набиваться;
to fish for compliments (for an invitation) напрашиваться на комплименты (на приглашение) ~ up вытаскивать (из воды) ;
to fish or cut bait амер. сделать выбор, не откладывая в долгий ящик ~ out разг. выуживать, выпытывать( секреты) ~ out разг. доставать;
вытаскивать (из кармана) a pretty kettle of ~! разг. = веселенькая история!;
хорошенькое дело!;
fish story = «охотничий рассказ»;
преувеличение, небылицы to ~ the anchor мор. поднимать якорь ~ up вытаскивать (из воды) ;
to fish or cut bait амер. сделать выбор, не откладывая в долгий ящик fish = fishplate fishplate: fishplate ж.-д., тех. стыковая накладка neither ~, flesh nor fowl (или good red herring) ни рыба ни мясо;
ни то ни се to feed the fishes разг. страдать морской болезнью;
to have other fish to fry иметь другие дела to make ~ of one and flesh of another относиться к людям неровно, пристрастно neither ~, flesh nor fowl (или good red herring) ни рыба ни мясо;
ни то ни се ~ пренебр. тип;
cool fish нахал, наглец;
odd (или queer) fish чудак;
poor fish никудышный человек Peter’s ~ зоол. пикша ~ пренебр. тип;
cool fish нахал, наглец;
odd (или queer) fish чудак;
poor fish никудышный человек a pretty kettle of ~! разг. = веселенькая история!;
хорошенькое дело!;
fish story = «охотничий рассказ»;
преувеличение, небылицы tin ~ мор. sl. торпеда