Пцр кала на хеликобактер пилори – Хеликобактер пилори, определение ДНК в биоптате слизистой желудка и/или двенадцатиперстной кишки (Helicobacter pylori, DNA, Bioptates of Gastric Mucosa and/or Duodenum, PCR)

Содержание

Анализ кала на хеликобактер пилори — как сдать стул тест, его достоверность

Как сдавать анализ кала на хеликобактер пилори

Современные диагностические методы позволяют узнать многое о состоянии здоровья человека по его биологическим жидкостям: крови, моче, фекалиям.

Исследуя кал, можно узнать, поселилась ли в организме бактерия Н.руlori, способная вызывать гастриты, язвы желудка и провоцировать онкопатологию.

Кал на наличие или отсутствие данного микроба можно изучать тремя способами: культуральным, иммунологическим, и наиболее достоверным и распространённым – методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

Определение хеликобактер культуральным методом

Сама бактерия крайне редко встречается в фекалиях в своей привычной S-образной форме целиком. Толстый кишечник и каловые массы не являются благоприятной средой для микроорганизма, поэтому, попадая в них, она может принимать круглую кокковую форму, изредка встречаясь в испражнениях именно в таком виде.

Культуральный метод подразумевает под собой посев части исследуемого материала на питательную среду, в которой бактерия будет хорошо себя чувствовать и начнёт размножаться.

Таким образом:

Происходит рост колоний, которые анализируются, окрашиваются специальными реактивами и исследуются под микроскопом. Данным способом в прямом смысле выращивают патогенные микробы с целью их дальнейшего изучения.

Кроме обнаружения самой бактерии, метод позволяет установить чувствительность патогена к тому или иному антибиотику. Если при добавлении лекарственного препарата рост колонии сохраняется – Н.руlori устойчива к антибактериальному средству, а если микроорганизмы погибают – имеет смысл назначить данный препарат пациенту с целью лечения и эрадикации, бактерии чувствительны к нему.

Культуральный способ весьма достоверен, но только в том случае, если во взятом биологическом материале обнаружена S-форма микроба. Метод имеет свои недостатки, и по этой причине не слишком распространён:

  • Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
  • Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
  • Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
  • Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)

Определение антигена хеликобактер пилори в кале иммунологическим методом

лабораторное исследование на бактерию

Фекалии пациента могут быть подвергнуты иммунологическому исследованию, которое позволяет выявить уже не сам микроорганизм, а его части – антигены.

Для этого:

Используются специальные антитела, направленные на обнаружение чужеродного антигена – частей бактерии, продуктов её жизнедеятельности, генетического материала.

Взаимодействуя с чужеродным агентом, антитела образуют специфический комплекс, который и определяется иммуно-ферментным анализом.

Данный способ изучения кала редко применяется в России, не многие лаборатории оснащены необходимыми реактивами и необходимыми тестами.

Но в перспективе возможно включение данного способа обнаружения хеликобактер в качестве скрининг-тестов: исследования широких групп населения на заражённость бактерией.

Анализ кала ПЦР на хеликобактер пилори

Это наиболее распространённый метод исследования фекалий на данную бактерию, обладающий высокой точностью.

Суть способа в следующем:

Из биологического материала пациента выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно искусственно дублируется на специальном аппарате, так происходит восстановление гететического кода Н.руlori

Когда геномный фрагмент микроба достигает достаточных размеров, его сравнивают с эталонным и делают вывод об исследуемом микроорганизме: хеликобактер ли это или другой патоген.

Положительный ПЦР анализ означает наличие в организме человека хеликобактерной инфекции: бактерия присутствует в желудке, ее фрагменты ДНК обнаружены в кале и совпали с эталонными.

анализ кала

Достоинства ПЦР-метода:

  • Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
  • Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
  • Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
  • Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.

У ПЦР-диагностики значительно больше плюсов, чем минусов. К недостаткам можно отнести:

  • Относительно высокую стоимость анализа.
  • Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
  • Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори инвитро

Все диагностические исследования, проводимые с фекалиями пациента, относятся к манипуляциям ин витро – «в пробирке», «в стекле», вне организма человека.

Они обладают достаточно высокой точностью и информативностью, если преследуют цель обнаружения микроба.

Но не все процессы, происходящие «ин виво» — внутри человеческого организма, можно с той же достоверностью воссоздать «ин витро». К примеру, определение чувствительности к антибиотикам, анализируемую культуральным методом.

При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.

диагностика бактерии

Результаты исследований чувствительности бактерии к антибиотикам «в пробирке» не всегда точны.

Как сдать анализ кала на хеликобактер пилори

Информативность диагностического теста зависит не только от выбранного исследования, качества оборудования и квалификации персонала, а еще и от того, как пациент подготовился к анализу.

Кал для исследования необходимо правильно собрать:

  • После дефекации часть фекальных масс необходимо поместить в стерильный контейнер для сбора биологического материала, который нужно заранее приобрести в аптеке или в лаборатории.
  • Исключить попадание в биологический материал крови, мочи, слюны, гноя и других посторонних примесей, которые с большой вероятностью исказят результаты анализа.
  • Контейнер с содержимым необходимо плотно закрыть и доставить в лабораторию не позднее 4-5 часов до исследования.

Кроме соблюдения технических моментов сбора материала для анализа, на протяжении нескольких дней до сдачи кала, нужно соблюдать следующие рекомендации:

  • За неделю до сдачи перестать принимать антибиотики.
  • За три дня не употреблять алкоголь, пищу, с большим содержанием клетчатки, а также способную приводить к окраске каловых масс: свеклу, напитки с красителями.
  • Не применять ректально свечи либо мази, не пользоваться слабительными препаратами.

Соблюдение вышеописанных правил позволить врачу лабораторной диагностики максимально точно оценить состояние здоровья пациента и сделать правильные выводы при анализе.

Достоверность анализа кала на хеликобактер

лаборатория для сдачи анализов

ПЦР — диагностика фекалий наиболее достоверна из всех трех вышеописанных способов, она в какой-то степени уступает лишь биопсийному эндоскопическому исследованию.

ПЦР-анализ кала редко дает ложноположительные результаты, обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать ДНК-материал часто встречаемых кокковых форм хеликобактерий в испражнениях.

Достоверность культурального и иммунологического метода ниже, чем ПЦР. Эти методы «грешат» появлением ложноположительных результатов, но в совокупности с другими способами выявления Helicobacter pylori, они являются прекрасным подспорьем для постановки диагноза.

Антиген H.pylori в фекалиях

В случае, если в кале обнаружен антиген хеликобактер пилори либо ДНК-фрагмент исследуемого микроорганизма, это означает, что:

  • Человек инфицирован Н.руlori.
  • Эрадикационная терапия недостаточно эффективна и микроб не исчез из слизистой оболочки ЖКТ.
  • Прошло меньше месяца после терапии и в кале сохраняются антигены умертвлённых патогенов.

Чтобы исключить ложноположительный результат после прохождения схемы антихеликобактерной терапии (когда анализ положительный, а организм человека не содержит Н.рylori), следует не торопиться узнавать эффективность лечения, а выждать не менее одного месяца после его окончания.

Если лечение бактерии проведено успешно, спустя 1 месяц после эрадикации в кале не выявляются антигены и ДНК микроба. Результат обследования – отрицательный.

В случае выявления антигенов при первичном анализе, врач порекомендует пациенту пройти курс специальной терапии, направленной на уничтожение Н.руlori.

Хеликобактер пилори, определение ДНК в кале с помощью ПЦР (Helicobacter pylori, DNA, feces)

Метод определения Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Исследуемый материал Кал

Определение ДНК хеликобактер пилори в кале методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori, H. pylori) – спиралевидная бактерия, которая обитает на слизистой оболочке желудка, прикрепляясь к ворсинкам эпителия. По оценкам эпидемиологов, присутствие этой бактерии в желудке можно обнаружить примерно у половины населения планеты, а в некоторых регионах у 80-100%. Нередко у инфицированных симптомы заболевания отсутствуют. При этом выявлена корреляция между наличием H. pylori в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) и подтвержденными патологиями желудка и двенадцатиперстной кишки, такими как диспепсия, хронический и атрофический гастрит, язвенная болезнь. Длительное воспаление стенки желудка и изменения его клеток из-за воздействия H. pylori могут привести к развитию рака желудка. Вероятность возникновения тяжелых, угрожающих жизни пациента состояний зависит от штамма и его вирулентности, индивидуальных особенностей организма и условий жизни. 

Заражение H. pylori возможно уже в возрасте 3-8 лет, с момента начала посещения ребенком детских учреждений. Для этого микроорганизма характерен фекально-оральный, орально-оральный и бытовой пути передачи. 

Методы диагностики инфекции H. pylori разделяют на инвазивные, требующие проведения фиброгастродуоденоскопии (ФГДС), и неинвазивные, не требующие проведения ФГДС. 

Из неинвазивных методов диагностики инфекции H. pylori в последнее время интенсивно применяется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). По данным многих исследователей, он является высокоспецифичным (это обеспечивается подбором праймеров, комплементарных уникальной нуклеотидной последовательности исследуемого микроорганизма), высокочувствительным (позволяет диагностировать не только острую, но и латентную форму инфекции, дает возможность выявлять малое количество бактерий). 

С помощью ПЦР можно быстро получить результаты, используя доступные биологические образцы (кал), особенно в случае наличия малого количества, и/или плохо культивируемых, и/или медленно растущих H. pylori. Методика ПЦР позволяет проводить мониторинг течения инфекции и оценивать эффективность лечения. Метод также может быть полезен для изучения распространенности инфекции H. pylori в бессимптомной популяции. 

Инфекцию H. pylori успешно лечат (эрадикация H. pylori), но это не исключает вероятности повторного инфицирования. Вопрос о необходимости эрадикации H. pylori решают индивидуально. Тактика врача во многом зависит от клинических проявлений инфекции, результатов лабораторных исследований (№ 1303HEL 13С-УДТ, № 484 Антиген в кале) и, что особенно важно, наличия патологических изменений слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки (№ 524 Гастрит, ассоциированный с Helicobacter pylori). 

Аналитические показатели: чувствительность определения ДНК H. pylori – 100 копий в образце, специфичность – 100%.

Литература

  1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. — М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
  2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
  3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
  4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
  5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
  6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
  7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
  8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
  9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
  10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262

Исследование кала на антиген helicobacter pylori. Как проводится ПЦР анализ на Хеликобактер Пилори

Главная→Диагностика→Исследование кала на антиген helicobacter pylori. Как проводится ПЦР анализ на Хеликобактер Пилори

Cодержание статьи:

Некоторые признаки заболеваний желудка, проявляющиеся у человека, могут быть причиной появления подозрений о наличии в организме Хеликобактер пилори. Эта бактерия способствует развитию болезней пищеварительной системы. Чтобы определить ее наличие, необходимо сдать анализы кала или пройти обследование.

Что это за бактерия?

Эта болезнетворная бактерия была открыта в 1983 году. Ее обнаружили именно у людей, которые страдают болезнями ЖКТ. Жгутики, имеющиеся у данного микроорганизма, позволяют ему быстро перемещаться и углубляться в стенки желудка. Чаще всего обнаруживается инфекция в случае, когда происходит анализ на антиген в кале или ПЦР.

Из-за того, что бактерия обладает защитной оболочкой, разъедающие вещества, находящиеся в пищеварительной системе, не оказывает на нее никакого влияния. В процессе жизнедеятельности микроорганизм выделяет в окружающую среду много токсинов, которые способствуют разрушению слизистой желудка. При влиянии других неблагоприятных условий из-за этого возникают:

  • воспалительные заболевания;
  • язва желудка;
  • злокачественные опухоли.

Хеликобактер пилори проникает в организм несколькими путями:

  1. Фекально-оральный. Бактерия проникает при употреблении инфицированной пищи и воды.
  2. Орально-оральный. Данный путь заражения бактерией связан с попаданием в полость рта зараженной слюны. Это происходит во время поцелуев или пользования общими столовыми приборами с человеком, который инфицирован.
  3. Ятрогенный путь подразумевает распространение бактерии через медицинское оборудование во время обследования ЖКТ.

Причины возникновения инфекционного заболевания

Риск заражения бактерией Хеликобактер пилори повышается с возрастом. При этом если у одного из членов семьи имеется данный микроорганизм, то, скорее всего, им инфицированы и другие родственники, проживающие с ним вместе. Определение может происходить при помощи анализа ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Бактерия живет именно в желудке из-за того, что это связано с особенностями ее выживания в окружающей среде. Для ее жизнедеятельности необходимо постоянное питание и определенная температура. В противном случае бактерия погибает в течение двух недель. Человек является основным носителем, но Хеликобактер пилори может находиться и в организме собак, свиней и кошек.

Происходит обнаружение бактерии, чаще всего, когда проводится анализ на антиген или ПЦР в кале.

Она может длительное время находиться в организме и не доставлять никаких неудобств. Но есть несколько благоприятных условий для появления болезни из-за этой бактерии. К ним относят:

  • слабый иммунитет;
  • несоблюдение режима питания;
  • употребление в пищу вредных продуктов;
  • частое воздействие на желудок алкоголя.

Симптомы

При обнаружении симптомов наличия бактерии Хеликобактер пилори стоит помнить, что они не являются основанием для постановки диагноза. Это объясняется тем, что они могут проявляться при многих заболеваниях. Чтобы подтвердить наличие хеликобактера, потребуется сдать анализ на антиген или ПЦР в кале.

Практически во всех случаях, когда у человека имеется бактерия, присутствуют и следующие патологии:

  • холецистит,
  • гепатит,
  • панкреатит.

Симптомы хеликобактериоза:

  • головные боли, которые появляются без определенной причины;
  • изжога;
  • отрыжка;
  • неприятный запах изо рта;
  • расстройства пищеварения;

Способы диагностики

Чтобы определить наличие бактерии, используются разные методы исследования. Одним из них становится выявление антигенов в кале. Такой способ является одним из основных и позволяет определить наличие микроорганизма без необходимости проводить эндоскопию. Также может происходить анализ крови, выявляющий наличие в ней антител. Эндоскопическое исследование позволяет рассмотреть стенки желудка, а также взять образцы ткани.

Может проводиться и дыхательный тест. Для его проведения человек принимает внутрь специальное вещество и при выдыхании в случае наличия Хеликобактер пилори это определяется по изменению цвета реагента. Все это фиксируется специальным устройством. Но чаще всего используется анализ на антиген или ПЦР в кале.

Исследование каловых масс

Антиген Хеликобактер пилори является одним из показателей инфицирования и назначается при жалобах, говорящих о язвенной болезни или других патологиях ЖКТ. Исследование назначается в следующих случаях:

  1. При появлении симптомов, которые говорят язвенной болезни. К ним относится боль в эпистрагальной области, чувство тяжести, тошнота и рвота.
  2. Во время определения эффективности лечения заболевания, вызываемого Хеликобактер пилори, чтобы предвидеть очередной рецидив.
  3. Когда необходимо подтверждение того, что инфекции больше нет.

Результаты

При результате, говорящем об инфицировании Хеликобактер пилори, можно говорить об имеющемся высоком риске развития язвенной болезни, гастрита и раковой опухоли. При отрицательном результате бактерии в организме нет. Но если во втором случае у человека все равно проявляются признаки заболеваний ЖКТ, то пройти обследование стоит еще раз через 2 недели. Если лечение заболевания уже происходило, то в этом случае при положительном результате через неделю после прохождения всего курса можно говорить о неэффективности. Если же через месяц после этого имеется Хеликобактер пилори не находят, то это свидетельствует о полном уничтожении возбудителя заболевания.

Исследование кала для того, чтобы определить есть ли антиген, может назначать гастроэнтеролог, терапевт, а также педиатр, хирург и инфекционист.

Исследование генетического материала в каловых массах

Суть метода заключается в определении наличия генетического материала Хеликобактер пилори в кале. Анализ применяется врачами для того, чтобы определить причины язвенной болезни, гастрита, а также эффективность лечебных мер.

ПЦР-диагностика характеризуется высокой чувствительностью и точностью результата. Анализ на антиген является одним из наиболее эффективных способов определения наличия в организме бактерии. Кроме этого способа и ПЦР врачи часто используют эндоскопию.

Рубрики:

Антиген лямблий в кале, что это такое, как сдавать анализ, зачем он нужен? Вопросы интересуют людей, которых просят сдать кал на исследование в оч

Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательная подвижная бактерия, устойчивая к воздействию соляной кислоты и способная колонизировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Как правило, первичное инфицирование происходит в детстве и протекает бессимптомно, но у некоторых людей с течением времени приводит к развитию серьезных заболеваний. H. pylori обнаруживается в подавляющем большинстве случаев гастрита и язвенной болезни и, кроме того, многократно увеличивает риск развития аденокарциномы и В-клеточной лимфомы желудка. Современная диагностика этих заболеваний невозможна без точной и быстрой идентификации H. pylori.

H. pylori может быть выявлена с помощью нескольких методов. В настоящее время доступны неинвазивные методы диагностики, обладающие преимуществом простоты и безопасности взятия образца для исследования (исследование кала), что имеет особое значение при обследовании пожилых людей, детей, а также в условиях амбулатории.

Helicobacter очень чувствительна к воздействию желчных кислот и пониженного содержания кислорода, поэтому при пассаже химуса через двенадцатиперстную и толстую кишку количество бактерий значительно снижается. Кроме того, активные спиралевидные формы бактерии претерпевают морфологические изменения, обеспечивающие большую устойчивость в неблагоприятных условиях. Результатом этого становится низкая концентрация микроорганизмов и преобладание кокковых форм в кале, что следует учитывать при выборе лабораторного метода исследования этого биоматериала. Среди многих неинвазивных методов особое место занимает исследование с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в кале) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. РТ-ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93-95  %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе – результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

На слизистой оболочке желудка могут также присутствовать другие представители рода Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Несмотря на то что их значение в развитии заболеваний ЖКТ еще до конца не установлено, они играют определенную роль при идентификации H. pylori. Так, например, лабораторные исследования, основанные на выявлении общего для всех видов Helicobacter антигена, будут характеризоваться большим числом ложноположительных результатов исследования на H. pylori за счет выявления других видов (как в случае с ELISA). Это практически исключено в исследовании с помощью РТ-ПЦР, так как реакция основана на выявлении специфического для H. pylori фрагмента ДНК.

Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Высокое содержание неорганических солей (фосфатов, кальция), ферментов ЖКТ, полисахаридов, желчных кислот и солей, растительных волокон, слизи и других компонентов кала может ингибировать РТ-ПЦР, поэтому подготовка к тесту требует должного внимания со стороны пациента и врача. Интерпретация результата анализа проводится с учетом дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori:

  • атрофического или антрального гастрита;
  • язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на гастрит или язвенную болезнь у детей и пожилых людей.
  • При невозможности использования инвазивных методов идентификации H. pylori у пациентов любого возраста.

Хеликобактер пилори, определение ДНК в кале с помощью ПЦР (Helicobacter pylori, DNA, feces)

Метод определения Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Исследуемый материал Кал

Определение ДНК хеликобактер пилори в кале методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori, H. pylori) – спиралевидная бактерия, которая обитает на слизистой оболочке желудка, прикрепляясь к ворсинкам эпителия. По оценкам эпидемиологов, присутствие этой бактерии в желудке можно обнаружить примерно у половины населения планеты, а в некоторых регионах у 80-100%. Нередко у инфицированных симптомы заболевания отсутствуют. При этом выявлена корреляция между наличием H. pylori в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) и подтвержденными патологиями желудка и двенадцатиперстной кишки, такими как диспепсия, хронический и атрофический гастрит, язвенная болезнь. Длительное воспаление стенки желудка и изменения его клеток из-за воздействия H. pylori могут привести к развитию рака желудка. Вероятность возникновения тяжелых, угрожающих жизни пациента состояний зависит от штамма и его вирулентности, индивидуальных особенностей организма и условий жизни. 

Заражение H. pylori возможно уже в возрасте 3-8 лет, с момента начала посещения ребенком детских учреждений. Для этого микроорганизма характерен фекально-оральный, орально-оральный и бытовой пути передачи. 

Методы диагностики инфекции H. pylori разделяют на инвазивные, требующие проведения фиброгастродуоденоскопии (ФГДС), и неинвазивные, не требующие проведения ФГДС. 

Из неинвазивных методов диагностики инфекции H. pylori в последнее время интенсивно применяется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). По данным многих исследователей, он является высокоспецифичным (это обеспечивается подбором праймеров, комплементарных уникальной нуклеотидной последовательности исследуемого микроорганизма), высокочувствительным (позволяет диагностировать не только острую, но и латентную форму инфекции, дает возможность выявлять малое количество бактерий). 

С помощью ПЦР можно быстро получить результаты, используя доступные биологические образцы (кал), особенно в случае наличия малого количества, и/или плохо культивируемых, и/или медленно растущих H. pylori. Методика ПЦР позволяет проводить мониторинг течения инфекции и оценивать эффективность лечения. Метод также может быть полезен для изучения распространенности инфекции H. pylori в бессимптомной популяции. 

Инфекцию H. pylori успешно лечат (эрадикация H. pylori), но это не исключает вероятности повторного инфицирования. Вопрос о необходимости эрадикации H. pylori решают индивидуально. Тактика врача во многом зависит от клинических проявлений инфекции, результатов лабораторных исследований (№ 1303HEL 13С-УДТ, № 484 Антиген в кале) и, что особенно важно, наличия патологических изменений слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки (№ 524 Гастрит, ассоциированный с Helicobacter pylori). 

Аналитические показатели: чувствительность определения ДНК H. pylori – 100 копий в образце, специфичность – 100%.

Литература

  1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. — М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
  2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
  3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
  4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
  5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
  6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
  7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
  8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
  9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
  10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262

Хеликобактер пилори, определение ДНК в биоптате слизистой желудка и/или двенадцатиперстной кишки (Helicobacter pylori, DNA, Bioptates of Gastric Mucosa and/or Duodenum, PCR)

Метод определения полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Исследуемый материал биоптат/биоптаты слизистой оболочки желудка и/или двенадцатиперстной кишки.

Доступен выезд на дом

Определение ДНК Хеликобактер пилори в биоптате слизистой желудка и/или двенадцатиперстной кишки методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.

Helicobacter pylori (H. pylori) – спиралевидная бактерия, которая обитает на слизистой оболочке желудка, прикрепляясь к ворсинкам эпителия. Инфицирование человека H. pylori широко распространено. По оценкам эпидемиологов, присутствие этой бактерии в желудке можно обнаружить примерно у половины населения планеты, а в некоторых регионах у 80-100% популяции. У инфицированных носителей Helicobacter pylori могут не обнаруживаться симптомы заболевания. При этом существует корреляция между наличием бактерии и подтвержденными функциональными состояниями, гастроинтестинальными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки, такими как диспепсия, хронический и атрофический гастрит, язвенная болезнь, рак желудка. Вероятность развития таких угрожающих состояний зависит от штамма H. pylori и факторов его вирулентности, индивидуальных особенностей организма и характера реакций на присутствие H. pylori, влияния условий жизни, в частности, диеты. Данную инфекцию успешно элиминируют (эрадикация H. pylori), но это не исключает вероятности повторного инфицирования в будущем. Вопрос о необходимости эрадикации H. pylori решается индивидуально. Тактика врача во многом зависит от клинических проявлений инфекции и, что особенно важно, наличия патологических изменений слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.

Аналитические показатели: чувствительность определения ДНК H. pylori – 100 копий в образце. Специфичность – 100%.

Литература

  • Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. — М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1
  • Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.
  • Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012.
  • Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486.
  • Helicobacter pylori and gastric or duodenal ulcer. Prescrire International. 2016;25(167):18-23.
  • Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353.
  • Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262.

Хеликобактер пилори, определение ДНК в кале с помощью ПЦР (Helicobacter pylori, DNA, feces)

Метод определения Полимеразная цепная реакция с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Исследуемый материал Кал

Определение ДНК хеликобактер пилори в кале методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ).

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori, H. pylori) – спиралевидная бактерия, которая обитает на слизистой оболочке желудка, прикрепляясь к ворсинкам эпителия. По оценкам эпидемиологов, присутствие этой бактерии в желудке можно обнаружить примерно у половины населения планеты, а в некоторых регионах у 80-100%. Нередко у инфицированных симптомы заболевания отсутствуют. При этом выявлена корреляция между наличием H. pylori в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) и подтвержденными патологиями желудка и двенадцатиперстной кишки, такими как диспепсия, хронический и атрофический гастрит, язвенная болезнь. Длительное воспаление стенки желудка и изменения его клеток из-за воздействия H. pylori могут привести к развитию рака желудка. Вероятность возникновения тяжелых, угрожающих жизни пациента состояний зависит от штамма и его вирулентности, индивидуальных особенностей организма и условий жизни. 

Заражение H. pylori возможно уже в возрасте 3-8 лет, с момента начала посещения ребенком детских учреждений. Для этого микроорганизма характерен фекально-оральный, орально-оральный и бытовой пути передачи. 

Методы диагностики инфекции H. pylori разделяют на инвазивные, требующие проведения фиброгастродуоденоскопии (ФГДС), и неинвазивные, не требующие проведения ФГДС. 

Из неинвазивных методов диагностики инфекции H. pylori в последнее время интенсивно применяется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). По данным многих исследователей, он является высокоспецифичным (это обеспечивается подбором праймеров, комплементарных уникальной нуклеотидной последовательности исследуемого микроорганизма), высокочувствительным (позволяет диагностировать не только острую, но и латентную форму инфекции, дает возможность выявлять малое количество бактерий). 

С помощью ПЦР можно быстро получить результаты, используя доступные биологические образцы (кал), особенно в случае наличия малого количества, и/или плохо культивируемых, и/или медленно растущих H. pylori. Методика ПЦР позволяет проводить мониторинг течения инфекции и оценивать эффективность лечения. Метод также может быть полезен для изучения распространенности инфекции H. pylori в бессимптомной популяции. 

Инфекцию H. pylori успешно лечат (эрадикация H. pylori), но это не исключает вероятности повторного инфицирования. Вопрос о необходимости эрадикации H. pylori решают индивидуально. Тактика врача во многом зависит от клинических проявлений инфекции, результатов лабораторных исследований (№ 1303HEL 13С-УДТ, № 484 Антиген в кале) и, что особенно важно, наличия патологических изменений слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки (№ 524 Гастрит, ассоциированный с Helicobacter pylori). 

Аналитические показатели: чувствительность определения ДНК H. pylori – 100 копий в образце, специфичность – 100%.

Литература

  1. Баранская Е.К., Ивашкин В.Т., Шептулин А.А. Париет в лечении язвенной болезни, симптоматических гастродуоденальных язв и функциональной диспепсии. Гл. 4., с. 75. В кн. Профилактика и лечение хронических заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Под. ред. акад. РАМН В.Т. Ивашкина. 2-е издание. — М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2013:152. ISBN 978-5-98322-905-1 
  2. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori. РЖГГК. 2018;28(1):55-70. 
  3. Исаков В.А. Диагностика и лечение инфекции, вызванной Helicobacter pylori: IV Маастрихтское соглашение. Новые рекомендации по диагностике и лечению инфекции H. pylori – Маастрихт IV (Флоренция). Best Clinical Practice. Русское издание. 2012;2:4-23.  
  4. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению язвенной болезни. Под ред. Ивашкина В.Т., Шептулина А.А., Маева И.В. и соавт. РЖГГК. 2016;26(6):40-54.  
  5. Chung W.C., Jeon E.J., Oh J.H., Park J.M., Kim T.H., Cheung D.Y., Kim B.W., Kim S.S., Kim J.I. Dual-priming oligonucleotide-based multiplex PCR using tissue samples from the rapid urease test kit for the detection of Helicobacter pylori in bleeding peptic ulcers. Digestive and Liver Disease. 2016;4. pii: S1590-8658(16)30394-2. doi: 10.1016/j.dld.2016.04.012 
  6. Du L.J., Chen B.R., Kim J.J., Kim S., Shen J.H., Dai N. Helicobacter pylori eradication therapy for functional dyspepsia: Systematic review and meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2016;22(12):3486-3495. doi: 10.3748/wjg.v22.i12.3486 
  7. Graham D.Y. History of Helicobacter pylori, duodenal ulcer, gastric ulcer and gastric cancer. World journal of gastroenterology. 2014;20(18):5191-5204. doi: 10.3748/wjg.v20.i18.5191 
  8. Malfertheiner P., Mégraud F., O’Morain C. et al. European Helicobacter and Microbiota Study Group and Consensus panel. Management of Helicobacter pylori infection — the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut. 2017;66(1):6-30. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312288 
  9. Schulz C., Schütte K., Malfertheiner P. Helicobacter pylori and Other Gastric Microbiota in Gastroduodenal Pathologies. Digestive Diseases. 2016;34(3):210-216. doi: 10.1159/000443353 
  10. Seo J.H., Hong S.J., Kim J.H., Kim B.W., Jee S.R., Chung W.C., Shim K.N., Baik G.H., Kim S.S., Kim S.G., Kim J.I. Long-Term Recurrence Rates of Peptic Ulcers without Helicobacter pylori. Gut Liver. 2016;4. doi: 10.5009/gnl15262

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *