Сдать осмотическая стойкость эритроцитов (анемии) узнать цену и сдать в Ижевске
Биоматериал: Кровь ЭДТА
Срок выполнения (в лаборатории): 8 р.д.
* На сайте указан максимально возможный срок выполнения исследования. Он отражает время выполнения исследования в лаборатории и не включает время на доставку биоматериала до лаборатории. Приведенная информация носит справочный характер и не является публичной офертой. Для получения актуальной информации обратитесь в медицинский центр Исполнителя или call-центр.
Описание
Под осмотической резистентностью эритроцитов понимается их устойчивость по отношению к гипотоническим растворам натрия хлорида. Минимальная резистентность эритроцитов определяется максимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хлорида (в серии растворов с постепенно уменьшающейся концентрацией), при которой начинается гемолиз наименее устойчивых эритроцитов, находящихся в растворе в течение 3 ч; максимальная — минимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хлорида, вызывающего в течение 3 ч гемолиз всех эритроцитов крови, помещенных в этот раствор.
Под минимальной осмотической резистентностью эритроцитов понимают максимальную концентрацию гипотонического раствора натрия хлорида, при которой начинается гемолиз наименее устойчивых эритроцитов, которые находятся в растворе 3 часа. Под максимальной осмотической резистентостью эритроцитов понимают минимальную концентрацию гипотонического раствора хлорида натрия, вызывающего в течение 3 часов гемолиз всех эритроцитов, помещенных в раствор. Максимальная осмотическая резистентность ниже 0,32 % возможна после больших кровопотерь и спленэктомии, при гемоглобинозе С, застойных желтухах, а также в некоторых случаях полицитемии. Повышение осмотической резистентности эритроцитов ниже 0,32 % характерно для талассемии и гемоглобинопатии. Минимальная осмотическая резистентность выше 0,48 % наблюдается при семейной гемолитической анемии, гемолитической анемии новорожденных и отравлении свинцом. Можно обнаружить небольшие изменения и при токсикозах, бронхопневмониях, туберкулезе, малярии, лейкемии, миелосклерозах, лимфогранулематозе, циррозе печени.
Случаи расширения границ осмотической резистентности (одновременное понижение минимальной и повышение максимальной Сниженная осмотическая стойкость эритроцитов в гипотонических растворах свидетельствует об структурных дефектах мембраны эритроцита, обусловленных генами мембранных белков. В отличии от сфероцитоза при гемоглобинопатиях (талласемии и S-гемоглобинопатии) возникает относительный избыток мембраны, что ведет к увеличению осмотической стойкости клеток для гипотонического лизиса, поэтому тест позволяет проводить дифф.диагноз между наиболее частыми причинами наследственных гемолитических анемий.
Показания к назначению
Поводом для обследования будет соответствующая клиническая картина. Специфических симптомов, которые будут характерны только отклонению от нормы резистентности нет. Может присутствовать симптоматика такого характера: бледность кожных покровов; снижение веса без видимой причины;повышенная утомляемость и нарастающая слабость, что будет больше похоже на синдром хронической усталости; плохой аппетит; сонливость; обострение хронических заболеваний.
При наличии клинической картины нужно обращаться к врачу. Первоначально это врач общей практики, то есть терапевт. Далее обследованием занимаются гематолог и смежные специалисты. Если диагностически будет установлено, что показатели ниже или выше допустимых, в обязательном порядке нужно проходить лечение, так как большая часть этиологических факторов представляет опасность не только для здоровья, но и для жизни пациента.
Интерпретация результатов/Информация для специалистов
Единицы измерения — %. Референсные значения: Осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,5 г/дл 3-53%, осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,6 г/дл (после инкубации при +37 ºC) 14-74% , осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,65 г/дл (после инкубации при +37 ºC) 4-40% , осмотический лизис эритроцитов при концентрации NaCl 0,75 г/дл (после инкубации при +37 ºC) 1-11%. Причины максимальной осмотической резистентности эритроцитов ниже 0,32%: массивные кровопотери; спленэктомия; гемоглобиноз С; застойная желтуха; некоторые случаи полицитемии; талассемия; гемоглобинопатия.
Причины минимальной осмотической резистентности эритроцитов выше 0,48%: семейная гемолитическая анемия; гемолитическая анемия новорожденных; отравление свинцом. Расширение границ осмотической резистентности эритроцитов наблюдается в начале острого гемолитического криза, в остром периоде пернициозной анемии.
Определение осмотической резистентности эритроцитов методом проточной цитометрии у пациентов с наследственным сфероцитозом | Мицура
1. Максимов А.Г., Тыренко В.В., Голота А.С., Живописцева А.М., Малахова С.Н., Петрова Т.Н., Зайцева Т.С. Современные представления о наследственном микросфероцитозе. Вестн. гематологии. 2009; 5 (3): 36–44. @@ Maximov A.G., Tyrenko V.V., Golota A.S., Zhivopistseva A.M., Malakhova S.N., Petrova T.N., Zaitseva T.S. The modern conception of hereditary spherocytosis. Vestnik gematologii = Bulletin of Hematology. 2009; 5 (3): 36–44. [In Russian].
2.
Haley K. Congenital hemolytic anemia. Med. Clin. North. Am. 2017; 101 (2): 361–374. doi: 10.1016/j.mcna.2016.09.008.
3. Blanc L., Wolfe L.C. General considerations of hemolytic diseases, red cell membrane, and enzyme defects. In: Lanzkowsky’s manual of Pediatric Hematology and Oncology. 6th ed. Academic Press, 2016: 137–146.
4. King M.J., Garçon L., Hoyer J.D., Iolascon A., Picard V., Stewart G., Bianchi P., Lee S.H., Zanella A., International council for standardization in haematology. ICSH guidelines for the laboratory diagnosis of nonimmune hereditary red cell membrane disorders. Int. J. Lab. Hematol. 2015; 37 (3): 304–325. doi: 10.1111/ijlh.12335
5. Mahajan V., Jain S.K. Hereditary spherocytosis. Neo Reviews. 2016; 17 (12): 697–704. doi: 10.1542/neo.
17-12-e697
6. Farias M.G. Advances in laboratory diagnosis of hereditary spherocytosis. Clin. Chem. Lab. Med. 2016; 55 (7): 944–948. doi: 10.1515/cclm-2016-0738
7. Roper D., Layton M. Investigation of the hereditary haemolytic anaemias: membrane and enzyme abnormalities. In: Dacie and Lewis Practical Haematology. 11th ed. Elsevier Ltd, 2011. 245–250.
8. Won D.I., Suh J.S. Flow cytometric detection of erythrocyte osmotic fragility. Cytometry B. Clin. Cytom. 2009; 76B: 135–141. doi: 10.1002/cyto.b.20448
9. Warang P., Gupta M., Kedar P., Ghosh K., Colah R. Flow cytometric osmotic fragility – an effective screening approach for red cell membranopathies. Cytometry B. Clin. Cytom.
2011; 80 (3): 186–190. doi: 10.1002/cyto.b.20583
10. Yamamoto A., Saito N., Yamauchi Y., Takeda M., Ueki S., Itoga M., Kojima K., Kayaba H. Flow cytometric analysis of red blood cell osmotic fragility. J. Lab. Autom. 2014; 19 (5): 483–487. doi: 10.1177/2211068214532254
11. Shim Y.J., Won D.I. Flow cytometric osmotic fragility testing does reflect the clinical severity of hereditary spherocytosis. Cytometry B. Clin. Cytom. 2014; 86B: 436–443. doi: 10.1002/cyto.b.21143
12. Ciepiela O., Adamowicz-Salach A., Zgodzińska A., Łazowska M., Kotuła I. Flow cytometric osmotic fragility test: Increased assay sensitivity for clinical application in pediatric hematology. Cytometry. B. Clin. Cytom. 2018; 94 (1): 189–195. doi: 10.1002/cyto.b.21511
13.
Manivannan P., Tyagi S., Chandra D., Mishra P., Pati H.P., Saxena R. Flow cytometric analysis of patients with hereditary spherocytosis – an Indian scenario. Hematology. 2018; 23 (3): 175–180. doi: 10.1080/10245332.2017.1376855КИСЛОТНАЯ, ОСМОТИЧЕСКАЯ И УЛЬТРАЗВУКОВАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ БОЛЬНЫХ, ПОЛУЧАЮЩИХ ЛЕЧЕНИЕ РЕГУЛЯРНЫМ ГЕМОДИАЛИЗОМ | Спиридонов
1. Румянцев АШ. Особенности катаболизма белков в процессе развития хронической почечной недостаточности. Автореф. на соиск…..д.м.н., СПб, 2000: 31
2. Михайлович ВА, Марусанов ВЕ, Бичун АБ, Доманская ИА. Проницаемость эритроцитарных мембран и сорбционная способность эритроцитов – оптимальные критерии тяжести эндогенной интоксикации. Анестезиология и реаниматология 1993; (5): 6669
Петросян ЭА, Неделько НА, Кадо АХ и др. Диагностическая ценность оценки проницаемости мембран эритроцитов в качестве критерия интоксикационного синдрома. Клин Лаб Диагн 2001; (8): 584. Покровский АА. Липиды. Структура, биосинтез. Превращения и функции. Наука, М., 1977; 118
5. Черницкий ЕА, Воробей АВ. Структура и функции эритроцитарных мембран. Наука и техника, Минск, 1981; 216
6. Поэтова ВГ, Гительзон ИИ, Терсков ИА. Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. М., 1967; 81
7. Терсков ИА, Гительзон ИИ. Метод химических (кислотных) эритрограмм. Биофизика 1957; 2(2): 259266
8. Трикуленко АВ, Пинишко УВ.
Кинетика кислотного лизиса эритроцитов разновозрастных популяций в присутствии лигандов некоторых интегральных белков плазматических мембран. Гематология и трансфузиология 1999; 44(1): 1618
9. Конев СВ. Структурная лабильность биологических мембран и регуляторные процессы. Наука и техника, Минск, 1987; 240
10. Kolanjiappan К, Manoharan S, Kayalvizhi M. Measurement of eryrthrocyte lipids, lipid peroxidation, antioxidants and osmotic fragility in cervical cancer patients. Clin Chim Acta 2002; 326 (12): 143149
12.
Candan F, Gultekin F. Effect of vitamin С and zinc on osmotic fragility and lipid peroxidation in zincdeficient haemodialysis patients. Cell Biochem Funct 2002; 20(2): 9598
13. Matteucci E, Giampietro O. Oxidative stress in families of type 1 diabetic patients. Diabetes Care 2000; 23(8): 1182 1186
14. Devasena T, Lalitha S, Padma K. Lipid peroxidation, osmotic fragility and antioxidant status in children with acute poststreptococcal glomerulonephritis. Clin Chim Acta 2001; 308(12): 155161
15. Ibrahim FF, Ghannam MM, Ali FM. Effect of dialysis on erythrocyte membrane of chronically hemodialyzed patients. Ren Fail 2002; 24(6): 779790
16. Vlassopoulo DA, Hadjiyannakos DK, Anogiatis AG et al.
Camitine action on red blood cell osmotic resistance in hemodialysis patients. J Nephrol 2002; 15(1): 6873
17. Морозова ТФ, Липина ОВ, Шраго МИ, Бредихина ЛП. Динамика кислотного и осмотического лизиса прираз личных воздействиях. Криобиология 1990; (4): 1418
18. Заводник ИБ, Пилецкая ТП. Кислотный лизис эритроцитов человека. Биофизика 1997; 42(5): 11061112
19. Verkman AS, Van Hock AN, Ma T et al. Water transport across mammalian cell membranes. Am J Phisiol 1996; (270): 230
20. Van Os CH, Deen PMT. Role of aquaporins in renal water handling: physiology and pathophysiology. Nephrol Dial Transplant 1998; (13): 16451651
21.
Сторожок СА, Соловьев СВ. Структурные и функциональные особенности цитоскелета мембраны эритроцита. Вопр Мед Химии 1992; 38 (2): 1417
22. Антонов ВФ. Липидные поры: стабильность и проницаемость мембран. Соросовский образовательный журнал 1998; (10): 1017
23. Козлов ММ, Черномордик ЛВ, Маркин ВС. Механизм образования безбелковых участков мембраны эритроцита: разрыв мембранного скелета. Биологические мембраны 1989; 6(6): 597 61124. Казеннов АМ, Маслова МН. Структурно-биохимические свойства мембраны безъядерных эритроцитов. Физиол журн СССР им Сеченова 1987; 73 (12): 15871598
25. Горбунов НВ. Влияние структурной модификации белков на липидбелковое взаимодействие в мембране эритроцитов человека.
Бюлл Эксперим Биол и Мед 1993; 116 (11): 488491
26. Заводник ИБ, Пилецкая ТП, Степуро ИИ. Механический лизис эритроцитов человека. Стабилизация мембран белками плазмы. Укр Биохим Журн 1991; 63 (6): 7278
27. Шакиров ДФ, Самсонов ВМ, Кудрявцев ВП, Гильманов АЖ. Исследование кислотной и осмотической резистентности эритроцитов у рабочих нефтехимического производства. Клин Лаб Диагн 2003; 3 (7): 2123
28. Иванов ВИ, Голенда ИЛ. Возрастная динамика кар тины крови и кислотного гемолиза по данным автоматизированного экспрессанализа в условиях г. Кемерово. Физиология человека 1996; 22 (6): 7681
29. Twardowski ZJ. We should strive for optimal hemodialysis: a criticism of the hemodialysis adequacy concept.
Hemodial Int 2003; 7 (1): 516
30. Gutknechi J. Proton/hydroxide conductance through lipid bilayer membranes. J Membr Biol 1984; 82 (4): 105112
31. Gutknechi J. Proton conductance through phospholipid bilayers: water wires or weak acids? J Bioenerg Biomembr 1987; 19 (3): 427442
32. Митрохин НМ, Мунипов МВ, Команов АВ. Влияние температуры на химическую резистентность эритроцитов. Биофизика 1989; 34 (5): 819 825
33. Суглобова ЕД, Спиридонов ВН, Борисов ЮА и др. Биофизические характеристики мембран эритроцитов у больных, получающих лечение регулярным гемодиализом. 1. Резистентность к действию внешнего каналоформера. Нефрология 1998; 2 (4): 6876
34.
Bonomini M, Sirolli V, Settefrati N et al. Increased erythrocyte phosphatidylserine exposure in chronic renal failure. J Am Soc Nephrol 1999; 10 (9): 19821990
35. Bonomini M, Ballone E, Di Stante S et al. Removal of uraemic plasma factor (s) using different dialysis modalities reduces phosphatidylserine exposure in red blood cells. Nephrol Dial Transplant 2004; 19 (1): 6874
36. Казеннов АМ, Маслова МН. Влияние мембранного скелета безъядерных эритроцитов на свойства транспортных АТФаз. Цитология 1991; (11): 32 41
37. Самойлов МВ, Мишнев ОД, Кудрявцев ЮВ и др. Морфофункциональная характеристика эритроцитов при хронической почечной недостаточности и гнойной интоксикации. Клин Лаб Диагн 2002; 2 (6): 18 23
38.
Самойлов МВ, Мишнев ОД, Кудрявцев ЮВ и др. Морфофункциональная характеристика эритроцитов при экстракорпоральной эфферентной детоксикации. Клин Лаб Диагн 2002; 2 (8): 1923
39. Самойлов МВ, Мишнев ОД, Кудрявцев ЮВ. Транс формированные и патологические эритроциты при эндо генной интоксикации и экстракорпоральной детоксикации. Арх Патол 2002; 64 (5): 3640
40. Стецюк ЕА, Ярмолинский ИС, Александров Н.П. и др. Исследование реологических свойств крови во время гемодиализа. Урология и нефрология 1988; 1: 4244
41. Jakic M, Rupcic V, Stipanic S, Slanjvic V. Osmotic resistance in erythrocytes in patients with chronic kidney insufficiency. Lijec Vjesn 1990 SepOct; 112(910): 2847
42.
Wu SG, Jeng FR, Wei SY et al. Red blood cell osmotic fragility in chronically hemodialyzed patients. Nephron 1998; 78 (1): 28 32
43. Nowak E, Wyrwicz G, Dabrowski Z et al. Rheological properties of red blood cells (including reticulocytes) in patients with chronic renal disease. Clin Hemorheol Microcirc 1999; 21 (2): 87 94
ХАРАКТЕРИСТИКА РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ У КАРДИОХИРУРГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ С РАЗЛИЧНОЙ СТЕПЕНЬЮ ВЫРАЖЕННОСТИ ПОСТПЕРФУЗИОННОГО ГЕМОЛИЗА | Мальцева
1. Борисов Ю.А., Спиридонов В.Н., Суглобова Е.Д. Резистентность эритроцитарных мембран: механизмы, тесты, оценка (обзор литературы) // Клинич. лаб. диагностика. 2007. № 12. С. 36–39.
2. Васильев А.П., Сенаторов Ю.
Н., Стрельцова Н.Н. Модификация липидной структуры клеточной мембраны у больных ишемической болезнью сердца с разной степенью поражения коронарного русла // Кардиология. 2005. Т. 45, № 2. С. 53–54.
3. Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов / под ред. Е. Гильдебрант. Красноярск: Красноярский рабочий, 1961. 314 с.
4. Ганиткевич Я.В., Черненко Л.И. Методика определения механической резистентности эритроцитов // Лаб. дело. 1978. № 2. С. 116–117.
5. Дуткевич И.Г. Тактика экстренной диагностики и лечения гемолитических гемотрансфузиологических осложнений // Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. 2007. № 5. С. 77–80.
6. Локшин Л.С., Лурье Г.О., Дементьева И.И. Искусственное и вспомогательное кровообращение в сердечно-сосудистой хирургии: практическое пособие.
М., 2003. 93 с.
7. Михайлович В.А., Марусанова В.Е., Бичун А.Б., Доман-ская И.А. Проницаемость эритроцитарных мембран и сорбционная способность эритроцитов – оптимальные критерии эндогенной интоксикации // Анестезиология и реаниматология. 1993. № 5. С. 66–69.
8. Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., Степовая Е.А., Фёдорова Т.С., Кравец Е.Б., Иванов В.В., Жаворонок Т.В., Часовских Н.Ю., Чудакова О.М., Бутусова В.Н., Яковлева Н.М. Молекулярные нарушения мембраны эритроци-тов при патологии разного генеза являются типовой реакцией организма: контуры проблемы // Бюл. сиб. медицины. 2006. Т. 5, № 2. С. 62–69.
9. Оганов Р.Г., Масленникова Г.Я. Сердечно-сосудистые заболевания в Российской Федерации во второй половине ХХ столетия: тенденции, возможные причины, пер-спективы // Кардиология.
2000. № 6. С. 4–8.
10. Рагино Ю.И., Чернявский А.М., Еременко Н.В., Шахтш-нейдер Е.В., Полонская Я.В., Цымбал С.Ю., Ивано-ва М.В., Воевода М.И. Ключевые лабораторно-диагно-стические биомаркеры коронарного атеросклероза // Кардиология. 2011. № 3. С. 42–46.
11. Рождественская М.А. Определение гемоглобина в плазме консервированной крови // Актуальные вопросы переливания крови. 1955. Вып. 4. С. 55.
12. Руководство по гематологии: в 3 т. / под ред. А.И. Воробьева: 3-е изд., перераб. и доп. М.: Ньюдиамед, 2005. 416 с.
13. Сахау Н.Р., Мирасаева Г.Х., Камилов Ф.Х. и др. Клинико-диагностическая оценка состояния мембран эритроцитов у больных первичным хроническим пиелонефритом // Нефрология.
2005. Т. 9, № 1. С. 47–51.
14. Спиридонов В.Н., Борисов Ю.А., Левыкина Е.Н. и др. Кислотная, осмотическая и ультразвуковая резистентность эритроцитов больных, получавших лечение регулярным гемодиализом // Нефрология. 2004. Т. 8, № 3. С. 22–31.
15. Справочник по функциональной диагностике / под ред. акад. АМН СССР проф. И.А. Кассирского. М.: Медици-на; Высш. шк., 1972. 344 с.
16. Сторожок С.А., Санников А.Г., Захаров Ю.М. Молекулярная структура мембран эритроцитов и их механические свойства. Тюмень: Изд-во Тюм. гос. ун-та, 1997. 140 с.
17. Сукоян Г.В., Берберашвили Т.М., Татулашвили Д.Р., Самсонидзе Т.Г. Динамика структурно-конформационных изменений в актине миокарда и эритроцитов при ишемии сердца // Бюл.
эксперим. биологии и медицины. 2005. Т. 140, № 11. С. 504–505.
18. Фатенков В.Н., Фатенков О.В. Состояние мембран и метаболизма эритроцитов // Ишемическая болезнь сердца. Самара: Самарский гос. мед. ун-т, 2002. С. 60–73.
19. Чумакова С.П., Уразова О.И., Новицкий В.В., Шипулин В.М. Патогенетические факторы интраоперационного гемолиза в кардиохирургии // Патолог. физиология и эксперим. терапия. 2011. № 4. С. 22–28.
20. Vercaemst L. Hemolysis in Cardiac Surgery Patients Undergoing Cardiopulmonary Bypass: A Review in Search of a Treatment Algorithm // The Journal of Extra Corporeal Technology. 2008. V. 40, № 4. P. 257–267.
Исследование осмотической резистентности эритроцитов
АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:
355017, г.
Ставрополь, ул. Ленина 304 (8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)
(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)
Посмотреть подробнееОбособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:
355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)
(8652) 31-68-89 (факс)
Посмотреть подробнееКлиника семейного врача:
355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)
(8652) 31-50-60 (регистратура)
Посмотреть подробнееНевинномысский филиал:
357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1(86554) 95-777, 8-962-400-57-10 (регистратура)
Посмотреть подробнееОбособленное структурное подразделение в г.
Черкесске :
8(8782) 26-48-02, +7-988-700-81-06 (контактные телефоны)
Посмотреть подробнееОбособленное структурное подразделение в г. Элисте :
358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 478(989) 735-42-07 (контактные телефоны)
Посмотреть подробнееЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:
355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)
(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)
Посмотреть подробнееОбособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:
355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 98 (8652) 316-847 (контактный телефон)
Посмотреть подробнееОбособленное структурное подразделение на ул.
Чехова, 77 :
8(8652) 951-943 (контактный телефон)
Посмотреть подробнееОбособленное структурное подразделение в г. Михайловске:
358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).8(988) 099-15-55 (контактный телефон)
Посмотреть подробнееРезистентность эритроцитов
Резистентность эритроцитов
Для оценки физико-химических свойств эритроцитов исследуют стойкость (резистентность) эритроцитов к различным воздействиям. Наибольшее распространение в клинической практике получило исследование осмотической резистентности эритроцитов.
Унифицированный метод определения осмотической резистентности эритроцитов
в модификации Л. И. Идельсона (1974).
Принцип
Количественное определение степени гемолиза
эритроцитов в забуферных гипотонических
растворах хлорида натрия.
Реактивы
Основной раствор (по своей осмотической концентрации соответствует 10 % раствору хлорида натрия) имеет рН 7,4, состав раствора: двузамещенный фосфат натрия (Na2HPО4)—27,31 г (или Na2HPО4*2H2O— 34,23, г), однозамещенный фосфат натрия (NaH2PО4*2H2О)—4,86 г, хлорид натрия— 180 г, дистиллированная вода — до 2 л. Раствор можно хранить в закрытой посуде в холодильнике в течение нескольких месяцев.
Основной раствор разводят в 10 раз и получают раствор, соответствующий по своей осмотической концентрации 1 % раствору хлорида натрия. Из этого раствора готовят рабочие растворы хлорида натрия следующих концентраций: 0,85; 0,75; 0,70; 0,65; 0,60; 0,55; 0,50; 0,45; 0,40; 0,35; 0,30; 0,20; 0,10%. Можно приготовить по 100 мл этих рабочих растворов и сохранять их в холодильнике. Годны в течение 2 нед.
Специальное оборудование
- Фотоэлектроколориметр.
- Термостат на 37 °С.
Ход определения
В две стерильные пробирки с предварительно внесенными 2 каплями гепарина берут по 1,5 мл крови, перемешивают и одну используют для исследования, вторую — оставляют на сутки в термостате. В ряд центрифужных пробирок (14 штук) разливают по 5 мл рабочих растворов хлорида натрия концентрации от 1 до 0,10 %. В каждую центрифужную пробирку добавляют по 0,02 мл перемешанной гепаринизированной крови и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. Центрифугируют смесь крови с растворами хлорида натрия при 2000 об/мин в течение 5 мин. Из каждой пробирки сливают надосадочную жидкость и измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны 500—560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против холостой пробы.
Холостая проба — надосадочная жидкость в пробирке, содержащей 1 % раствор хлорида натрия.
Расчет
За 100% гемолиз принимают гемолиз в пробирке,
содержащей 0,1 % раствор хлорида натрия.
Вычисляют
процент гемолиза в каждой пробирке, сравнивая
величины экстинкции надосадочной жидкости с
экстинкцией, принятой за 100 %, по формуле:
Процент гемолиза=Ех*100 / Е1, где
Е1 — экстинкция надосадочной жидкости в
пробирке с 0,1% раствором хлорида натрия;
ЕХ — экстинкция исследуемой пробы;
100 — процент гемолиза в пробирке с 0,1 % раствором
хлорида натрия.
На следующий день повторяют исследование с кровью, инкубированной 24 ч при 37 °С.
Нормальные величины
У здоровых в свежей крови начало гемолиза отмечают при концентрации хлорида натрия 0,50—0,45 %, а полный гемолиз — при 0,40—0,35 % растворе хлорида натрия.
Клиническое значение
Исследование проводят при подозрении на
гемолитическую анемию. Понижение осмотической
резистентности, т. е. появление гемолиза
эритроцитов при более высокой, чем в норме,
концентрации хлорида натрия (0,70—0,75%),
наблюдается при наследственном
микросфероцитозе и некоторых наследственных
несфероцитарных гемолитических анемиях, а также
иногда при аутоиммунной гемолитической анемии.
В
ряде случаев понижение осмотической
резистентности выявляется только при
исследовании инкубированной крови. Повышение
осмотической резистентности характерно для
талассемии, гемоглобинопатий.
Литература.
Идельсон Л. И. В кн.:Справочник по функциональной диагностике / Под ред. И. А. Кассирского.— М., Медицина, 1970, с. 401.
Определение осмотической стойкости эритроцитов | Медицинский центр ЛМД
Описание
Синонимы (rus): Осмотическая стойкость эритроцитов, сфероцитоз, талласемия, гемолитическая анемия
Синонимы (eng): Osmotic fragility, spherocytosis,thalassemia, hemolytic anemia
Биоматериал: Венозная кровь
Показатель(и): Осмотическая стойкость эритроцитов
Метод(и): Осмотический лизис
Тип контейнера и особенности преаналитики: Пробирка для гематологических исследований с EDTA, 2 мл (фиолетовая крышечка).
Тест на осмотическую стойкость эритроцитов выполняется в свежеприготовленной крови (в течение 2 часов после сбора), а также после инкубации при 37 ° С в течение 24 часов.
Тест на осмотическую стойкость эритроцитов используется для измерения устойчивости эритроцитов к гемолизу при воздействии разных концентраций солевого раствора. Когда эритроциты подвергаются воздействию гипотонической среды, вода попадает в клетку и приводит к ее лизису. Тест на осмотическую стойкость эритроцитов представляет собой классический тест для диагностики наследственного сфероцитоза. Сфероциты являются осмотически менее стойкими клетками, которые легче лизируются в гипотоническом растворе, по сравнению с нормальными эритроцитами.
Классический осмотический тест на осмотическую стойкость, первоначально описанный Parpart et al. (1947), заключается в добавлении цельной крови в серию солевых растворов в диапазоне от 0,1% до 0,9%. Эти образцы подвергают центрифугированию с измерением оптической плотности при 540 нм, чтобы рассчитать процент гемолиза для каждого раствора.
Когда назначается
Диагностика наследственного сфероцитоза, талассемии и гемоглобинопатии, гемолитической анемии неясного генеза
Подготовка к анализу
Специальной подготовки не требуется. Исследование проводится натощак (не принимать пищу 3 часа до исследования, можно пить воду).
Интерпретация
Пониженная осмотическая стойкость эритроцитов характерна для пациентов с наследственным сфероцитозом. Сфероциты являются осмотически менее стойкими клетками, которые легче лизируются в гипотоническом растворе, по сравнению с нормальными эритроцитами. Тест на осмотическую стойкость после инкубации цельной крови в термостате при t=37° С считается более чувствительным, чем тест на осмотическую стойкость эритроцитов без инкубации. Пониженная осмотическая стойкость также может наблюдаться при других заболеваниях, включая наследственный стоматоцитоз, наследственный пиропойкилоцитоз, врожденную дизэритропоэтическую анемию типа II. Данный феномен также может быть ассоциирован с аутоиммунной гемолитической анемией, отравлениями, ожогами, состояниями после гемотрансфузии.
Повышенная осмотическая стойкость эритроцитов указывает на наличие сплющенных эритроцитов (лептоцитов), у которых снижено соотношение площади поверхности к объему. Такое изменение происходит при железодефицитной анемии, талассемии и серповидноклеточной анемии, так как эритроциты с низким содержанием гемоглобина (MCH) и низким средним объемом клеток (MCV) необычайно устойчивы к осмотическому лизису. Ретикулоциты и эритроциты у пациентов после спленэктомии также более осмотически устойчивые по сравнению с нормальными клетками. При заболеваниях печени вследствие пассивного накопления липидов эритроциты также более устойчивы к осмотическому лизису.
Список литературы
- Farias MG et al. Advances in laboratory diagnosis of hereditary spherocytosis — Clin Chem Lab Med., 2017 Jun 27,55(7): p. 944-948
- Bolton-Maggs PH et al. Guidelines for the diagnosis and management of hereditary spherocytosis—2011 update. — Br J Haematol, 2012 Jan;156(1):p.37-49
- Walski T et al. Individual osmotic fragility distribution: a new parameter for determination of the osmotic properties of human red blood cells. — Biomed Res Int. 2014; 2014:162102.
Individual osmotic fragility distribution: a new parameter for determination of the osmotic properties of human red blood cells. — Biomed Res Int. 2014; 2014:162102.Осмотическая хрупкость — обзор
Интерпретация результатов
Осмотическая хрупкость свежих эритроцитов отражает их способность поглощать определенное количество воды перед лизированием. Это определяется соотношением их объема к площади поверхности. Способность нормального эритроцита противостоять гипотоничности обусловлена его двояковогнутой формой, которая позволяет клетке увеличивать свой объем примерно на 70% до того, как поверхностная мембрана растянется; как только этот предел достигнут, происходит лизис. 6 Сфероциты имеют увеличенное отношение объема к площади поверхности; их способность впитывать воду перед растяжением поверхностной мембраны, таким образом, более ограничена, чем обычно, и поэтому они особенно чувствительны к осмотическому лизису. Повышение осмотической хрупкости является свойством сфероидальной формы клетки и не зависит от причины сфероцитоза.
Характерно, что кривые осмотической хрупкости пациентов с ГВ, которым не делали спленэктомию, показывают «хвост» из очень хрупких клеток (рис.12-3). При нанесении на вероятностную бумагу график показывает две популяции клеток: очень хрупкие и нормальные или слегка хрупкие. После спленэктомии эритроциты становятся более однородными, кривая осмотической хрупкости указывает на более непрерывный спектр клеток, от хрупких до нормальных.
Пониженная осмотическая хрупкость указывает на присутствие необычно уплощенных эритроцитов (лептоцитов), в которых отношение объема к площади поверхности уменьшено. Такое изменение происходит при железодефицитной анемии и талассемии, при которых эритроциты с низким средним гемоглобином клеток (MCH) и средним объемом клеток (MCV) необычно устойчивы к осмотическому лизису (рис.12-1). Простой тест на осмотическую хрупкость одной пробирки — полезный скрининговый тест на β-талассемию и некоторые гемоглобинопатии в странах с высокой частотой этих аномалий (стр.
556). Ретикулоциты и эритроциты пациентов, перенесших спленэктомию, также имеют большее количество мембран по сравнению с нормальными клетками и являются осмотически устойчивыми. При заболевании печени клетки-мишени могут продуцироваться путем пассивного накопления липидов, и эти клетки также устойчивы к осмотическому лизису. 7
Осмотическая хрупкость эритроцитов после инкубации в течение 24 часов при 37 ° C также является отражением отношения их объема к площади поверхности, но факторы, которые изменяют это соотношение, более сложны, чем в свежих эритроцитах.Повышенная осмотическая хрупкость нормальных эритроцитов, возникающая после инкубации (рис. 12-2), в основном вызывается набуханием клеток, связанным с накоплением натрия, превышающим потерю калия. Такой обмен катионов определяется мембранными свойствами эритроцитов, которые контролируют пассивный поток ионов, и метаболической компетентностью клетки, которая определяет активную перекачку катионов против градиентов концентрации.
Во время инкубации в течение 24 часов метаболизм эритроцитов подвергается стрессу, и механизмы накачки имеют тенденцию к отказу, одним из факторов является относительный недостаток глюкозы в среде.
Осмотическая хрупкость эритроцитов с аномальной мембраной, такой как мембраны HS и наследственный эллиптоцитоз (HE), ненормально возрастает после инкубации (рис. 12-2). Подобные результаты наблюдаются при наследственном стоматоцитозе. 8 Результаты для эритроцитов с гликолитической недостаточностью, например с недостаточностью пируваткиназы (PK), различны. При серьезном дефиците осмотическая хрупкость может значительно увеличиваться (рис. 12-2), но в других случаях хрупкость может уменьшаться из-за большей потери калия, чем увеличения количества натрия.При большой и малой талассемии осмотическая хрупкость часто заметно снижается после инкубации, опять же из-за заметной потери калия. 9 Аналогичное, хотя обычно менее заметное изменение наблюдается при железодефицитной анемии.
Подводя итог, измерение осмотической хрупкости эритроцитов дает полезную информацию о том, в норме ли эритроциты пациента, потому что ненормальный результат неизменно указывает на отклонение от нормы. Однако обратное неверно (т.е. результат, находящийся в пределах нормы, не означает, что красные клетки в норме).Результаты некоторых важных гемолитических анемий обобщены в Таблице 12-2.
Осмотическая толерантность эритроцитов птиц к полному гемолизу в воде, свободной от растворенных веществ
Parpart, A.K. Является ли осмотический гемолиз явлением «все или ничего»? Biol. Бык. 61 , 500–517 (1931).
Артикул Google Scholar
Джей А. В. и Роулендс С. Стадии осмотического гемолиза. Дж.Physiol. 252 , 817–832 (1975).
CAS Статья Google Scholar
Чернышев А.В. и др. . Лизис эритроцитов в изотоническом растворе хлорида аммония: теоретическое моделирование и экспериментальная проверка.
J. Theor. Биол. 251 , 93–107 (2008).
MathSciNet CAS Статья Google Scholar
Cyprych, K., Procek, J., Langner, M. & Przybylo, M. Усовершенствованный метод оценки способности соединений дестабилизировать клеточную плазматическую мембрану. Chem. Phys. Липиды 164 , 276–282 (2011).
CAS Статья Google Scholar
Миттал А. и Бенц Дж. Комплексный кинетический анализ гриппа, опосредованного гемагглютинином слияния мембран: роль связывания сиалата. Biophys. Дж. 81 , 1521–1535 (2001).
ADS CAS Статья Google Scholar
Миттал, А., Лейкина, Э., Бенц, Дж. И Черномордик, Л. В. Кинетика гриппа, опосредованного гемагглютинином слияния мембран как функция техники. Анал. Biochem. 303 , 145–152 (2002).
CAS Статья Google Scholar
Миттал, А., Лейкина, Э., Черномордик, Л. В. и Бенц, Дж. Кинетическая дифференциация гриппозных гемагглютининов слияния и гемифузии. Biophys. J. 85 , 1713–24 (2003).
CAS Статья Google Scholar
Лейкина Э. и др. . Гемагглютинины гриппа вне зоны контакта необходимы для расширения пор слияния. J. Biol. Chem. 279 , 26526–26532 (2004).
CAS Статья Google Scholar
Саха, А. и Гош, Дж. Биосинтез гемоглобинов кур. Наука 132 , 468–470 (1960).
ADS CAS Статья Google Scholar
Мацуда Г. и Огата К. Биосинтез гемоглобина в эритроцитах курицы и ингибирующее действие актиномицина D. J. Biochem. 59 , 561–569 (1966).
CAS Статья Google Scholar
Гэри-Бобо К. М. и Соломон А. К. Свойства растворов гемоглобина в эритроцитах. J. Gen. Physiol. 52 , 825–853 (1968).
CAS Статья Google Scholar
Стоянович, Р. и др. . Выделение гемоглобина из эритроцитов крупного рогатого скота путем контролируемого гемолиза в мембранном биореакторе. Заявл. Biochem. Biotechnol. 166 , 1491–1506 (2012).
Артикул Google Scholar
Thomas, S. L. et al. . Малярийный паразит Plasmodium gallinaceum активирует каналы эритроцитов хозяина. FEBS Lett. 500 , 45–51 (2001).
CAS Статья Google Scholar
Удден М. М. In vitro субгемолитические эффекты бутоксиуксусной кислоты на эритроциты человека и крысы. Toxicol Sci. 69 , 258–264 (2002).
CAS Статья Google Scholar
Брам, Дж. Проницаемость эритроцитов для хлоридов, мочевины и воды. J. Exp. Биол. 216 , 2238–2246 (2013).
CAS Статья Google Scholar
Ди Каприо, Г., Стокс, К., Хиггинс, Дж. М., Шенбрун, Э.Одноклеточное измерение сродства к кислороду красных кровяных телец. Proc. Natl. Акад. Sci. США 112 , 9984–9989 (2015).
Артикул Google Scholar
Льюис, Дж. Х. и Фергюсон, Э. Э. Осмотическая хрупкость эритроцитов премиальных млекопитающих. Комп. Biochem. Physiol. 18 , 589–95 (1966).
CAS Статья Google Scholar
Олдрич, К. Дж., Сондерс, Д. К., Зиверт, Л. М. и Зиверт, Г. Сравнение осмотической хрупкости эритроцитов у земноводных, рептилий, птиц и млекопитающих. Пер. Канс. Акад. Sci. 109 , 149–158 (2006).
Артикул Google Scholar
Stier, A. et al. . Эритроциты птиц имеют функциональные митохондрии, что открывает новые перспективы для птиц в качестве животных моделей в изучении старения. Фронт. Zool. 10 , 33 (2013).
Артикул Google Scholar
Гаррет, Р. Дж. Б. и Буллингтон, Д. М. Микротурбидиметрическое определение осмотической хрупкости эритроцитов у новорожденных, отъемных и взрослых крыс. Life Sci. 16 , 1233–1240 (1975).
CAS Статья Google Scholar
Эзелл, Г.Х., Суля, Л. Л. и Додген, К. Л. Некоторое необычное поведение эритроцитов рыб в гипотонических солевых растворах. Комп. Biochem. Physiol. 30 , 137–147 (1969).
CAS Статья Google Scholar
Эзелл, Г. Х., Суля, Л. Л. и Додген, К. Л. Сравнение осмотической хрупкости и других характеристик эритроцитов двух видов сомов, Galeichthys felis (обыкновенный соленый сом) и Ictalurus punctatus (канальный сом). Комп. Biochem. Physiol. 31 , 863–868 (1969).
CAS Статья Google Scholar
Oyewale, J. O. & Durotoye, L.A. Осмотическая хрупкость эритроцитов двух пород домашних птиц в теплых влажных тропиках. Lab. Anim. 22 , 250–254 (1988).
CAS Статья Google Scholar
Фрей, Ю.Ф. и Перк К. Осмотический гемолиз ядерных эритроцитов. Exp. Cell Res. 35 , 230–238 (1964).
CAS Статья Google Scholar
Перк, К., Фрей, Ю. Ф. и Герц, А. Осмотическая хрупкость эритроцитов молодых и зрелых домашних и лабораторных животных. Am. J. Vet. Res. 25 , 1241–1248 (1964).
CAS PubMed Google Scholar
Viscor, G. & Palomeque, J. Метод определения кривых осмотической хрупкости эритроцитов у птиц. Lab. Anim. 16 , 48–50 (1982).
CAS Статья Google Scholar
Мазерон П., Диделон Дж., Мюллер С. и Штольц Дж. Ф. Теоретический подход к измерению осмотической хрупкости эритроцитов с помощью оптического пропускания. Photochem. Photobiol. 72 , 172–178 (2000).
CAS Статья Google Scholar
Вагнер М.А., Андемариам Б. и Десаи С.А. Двухкомпонентная модель осмотического лизиса эритроцитов, инфицированных Plasmodium falciparum. Biophys. J. 84 , 116–123 (2003).
ADS CAS Статья Google Scholar
Дональдсон, Дж., Дангарембизи, Р., Мтетва, Б., Мадзива, М.Т. и Эрлвангер, К. Х. Прогрессивные эффекты диеты с высоким содержанием жиров на осмотическую хрупкость эритроцитов, показатели роста и уровни триглицеридов и холестерина в сыворотке у цесарок (Numida meleagris) и московской утки ( Cairina moschata ). J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. (Берл) 98 , 867–874 (2014).
CAS Статья Google Scholar
Дональдсон, Дж., Пиллэй, К., Мадзива, М. Т. и Эрлвангер, К.H. Влияние различных диет с высоким содержанием жиров на осмотическую хрупкость эритроцитов, показатели роста и концентрацию липидов в сыворотке у самцов японского перепела ( Coturnix coturnix japonica ). J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. (Берл) 99 , 281–289 (2015).
CAS Статья Google Scholar
Аденкола А. Ю. и Ангани М. Т. Влияние добавок аскорбиновой кислоты на гематологию и параметры окислительного стресса цыплят-бройлеров в жаркий и сухой сезон в саванне Южной Гвинеи. J. Poultry Res. 14 , 28–33 (2017).
Google Scholar
Козлов М.М., Маркин В.С. Теория осмотического лизиса липидных везикул. J. Theor. Биол. 109 , 17–39 (1984).
CAS Статья Google Scholar
Оркатт, Р. Х., Турмонд, Т. С. и Ферслю, К. Э. Математическое моделирование осмотической хрупкости эритроцитов кролика. J. Pharmacol. Toxicol. Методы 34 , 169–174 (1995).
CAS Статья Google Scholar
Фернандес-Альберти, А. и Финк, Н. Е. Доверительные интервалы осмотической хрупкости эритроцитов: определение с помощью математической модели. Clin. Chem. Лаборатория. Med. 38 , 433–436 (2000).
Артикул Google Scholar
Cayley, D. S., Guttman, H. J. & Record, M. T. Jr. Биофизическая характеристика изменений количества и активности клеток Escherichia coli и воды в компартментах, а также тургорного давления в ответ на осмотический стресс. Biophys. J. 78 , 1748–1764 (2000).
CAS Статья Google Scholar
Law, R. et al. . Сдвиги пути и термическое смягчение при принудительном разворачивании спектриновых доменов с температурной привязкой. Biophys. J. 85 , 3286–93 (2003).
ADS CAS Статья Google Scholar
Bansal, S. & Mittal, A. Извлечение предпочтений по кривизне липидов, собранных в плоские бислои, показывает возможные кинетические окна для генезиса двухслойной асимметрии и образования доменов в биологических мембранах. J. Membrane Biol. 246 , 557–570 (2013).
CAS Статья Google Scholar
Bansal, S. & Mittal, A. Статистическая аномалия указывает на симбиотическое происхождение эукариотических мембран. Мол. Биол. Ячейка 26 , 1238–1248 (2015).
CAS Статья Google Scholar
Singh, S. & Mittal, A. Длина трансмембранного домена служит признаком сложности организма и механизмов транспорта вируса. Sci. Отчет 6 , 22352, https://doi.org/10.1038/srep22352 (2016).
ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar
Миттал, А. и Сингх, С. Понимание эволюции эукариот по длине трансмембранного домена. J. Biomol. Struct. Дин. 36 , 2194–2200 (2018).
CAS Статья Google Scholar
Бенга, Г. Белки водного канала (позже названные аквапоринами) и родственники: прошлое, настоящее и будущее. IUBMB Life 61 , 112–133 (2009).
CAS Статья Google Scholar
Кестнер, Л. Направление эритроцитов: молекулярная биология конкурирует с патч-зажимом. Фронт. Мол. Biosci. 2 , 46 (2015).
Артикул Google Scholar
Крайби А., Валле В., Фирсов Д., Гесс С. К. и Хоррисбергер Дж.-D. Модуляция протеазой активности эпителиального натриевого канала, экспрессируемого в ооцитах Xenopus. J. Gen. Physiol. 111 , 127–138 (1998).
CAS Статья Google Scholar
Кровь Лаборатория | Хрупкость эритроцитов > Осмотический гемолиз |
| Клеточные мембраны представляют собой полупроницаемые барьеры и осмотические между внутриклеточными и внеклеточными жидкостями устанавливаются градиенты, которые могут вызвать вода поступает в клетки и выходит из них.Величина осмотического давления зависит от разница между концентрацией недиффундирующих ионов на каждой стороне мембрана. | |
| Теоретические основы об этом упражнении нужно будет прочитать в вашем учебнике. | |
| В внутриклеточная жидкость эритроцитов представляет собой раствор солей, глюкозы, белка и гемоглобин.0,9% раствор NaCl называется изотонический : когда клетки крови находятся в такой среде, внутриклеточные и внеклеточные жидкости находятся в осмотическое равновесие через клеточную мембрану, и нет чистого притока или оттока вода. | |
При воздействии гипертонической среды (например, 1,8% NaCl), клетки теряют свою нормальную двояковогнутую форму, претерпевая коллапс (что приводит к зазубринам ) из-за быстрого осмотического оттока воды. | С другой стороны, в гипотоническом окружающей среде (например, 0,4% NaCl или дистиллированная вода), происходит приток воды: клетки набухают, целостность их мембран нарушается, позволяя их гемоглобин ( гемолиз ), который растворяется во внешней среде. |
Зубчатый | Гемолиз |
В этом эксперименте мы используем то свойство, что осмотическая хрупкость (или предрасположенность к гемолизу) эритроцитов составляет , неравномерно , а количество клеток, подвергающихся гемолизу, зависит от степени гипотоничности внеклеточная среда.Концентрация высвободившегося гемоглобина в каждой тестовой среде является показатель степени осмотического гемолиза. Ваша задача — изучить взаимосвязь между степень гемолиза и осмолярность среды, в которой взвешены эритроциты. | |
К продолжить процедуру определения хрупкости эритроцитов, нажмите здесь | |
Сравнение осмотической хрупкости эритроцитов у земноводных, рептилий, птиц и млекопитающих на JSTOR
AbstractОсмотическая хрупкость эритроцитов (EOF) — это мера силы эритроцитов и их способности выдерживать различные осмотические градиенты.Осмотическая хрупкость эритроцитов сравнивалась среди множества наземных эктотерм, водных / полуводных эктотерм и эндотерм. Мы предположили, что EOF должен быть самым низким у тех животных, которые являются водными и чьи эритроциты, вероятно, будут подвергаться воздействию гипотонических условий (то есть у некоторых земноводных и рептилий). Наибольшая осмотическая устойчивость эритроцитов (т.е. наименее хрупкие эритроциты) была обнаружена у лягушки-быка (Rana catesbeiana), за которой в порядке убывания следовали личиночные тигровые саламандры (Ambystoma tigrinum), морская жаба (Bufo marinus), декоративная коробчатая черепаха (Terrepene ornata ornata). ), окрашенная черепаха (Chrysemys picta bellii), красноухий бегунок (Trachemys scripta elegans), краснобокая подвязочная змея (Thamnophis sirtalis parietalis), домашняя курица (Gallus gallus), хлопковая крыса (Sigmodon hispidus), крыса Sprague-Dawley ( Rattus norvegicus) и восточный лесной крыс (Neotoma floridana).У водных / полуводных амфибий (R. catesbeiana и A. tigrinum) обнаружена значительно более высокая осмотическая резистентность эритроцитов, чем у наземных амфибий (B. marinus). Однако среди рептилий не было отмечено значительных различий между наземными и водными / полуводными видами. Эритроциты эктотермов обладали большей осмотической устойчивостью, чем у эндотермов. Такие различия могут быть необходимы из-за воздействия широких диапазонов температур в эктотермах и / или большой продолжительности жизни эктотермных эритроцитов в эритроцитах по сравнению с эндотермными.Ядерные эритроциты были более осмотически устойчивыми, чем неядерные эритроциты. Кроме того, осмотическая резистентность эритроцитов коррелировала со средним объемом эритроцитов. Эритроциты большего размера были более осмотически устойчивыми, чем эритроциты меньшего размера. Уравнения полиномиальной регрессии, вычисленные для аппроксимации этих данных, показали, что кубический полином отлично подходит, если исключить данные по личинкам тигровой саламандры. Наши данные предполагают, что объем эритроцитов может играть важную роль в осмотической резистентности эритроцитов.
Информация о журнале«Транзакции Канзасской академии наук» — это рецензируемый журнал, основанный в 1872 году и являющийся официальным изданием Канзасской академии наук. «Транзакции» — это междисциплинарный рецензируемый научный журнал по всем предметам в области биологических, культурных и физических наук, математики и информатики, истории и философии науки и естественнонаучного образования. Хотя Транзакции открыты для всех дисциплин, они ориентированы в первую очередь на статьи, представляющие особый региональный интерес (Канзас и Великие равнины), или более общие статьи, написанные региональными авторами.Сделка публикуется (в бумажном виде) два раза в год; Выпуск 1-2 весной, а осенью 3-4.
Информация об издателеКанзасская академия наук была основана в 1868 году для поддержки науки и естественнонаучное образование в штате Канзас. Членство в Академии открыто любому, кто хочет присоединиться. Академия является членом Национальной ассоциации. Академий наук и является аффилированным лицом с Американской ассоциацией Развитие науки и U.С. Национальная академия наук. Миссия Академии состоит из двух частей: 1) Поощрять образование в области наук и распространять научная информация через средства Академии, и 2) для достижения более тесное сотрудничество и взаимопонимание между учеными и не учеными, чтобы они могли работать вместе в общем деле развития науки
Осмотическая хрупкость эритроцитов у некоторых парнокопытных млекопитающих: взаимосвязь с осмоляльностью плазмы и размерами эритроцитов
Bagge U, Brånemark PI, Karlsson R et al.(1980) Трехмерные наблюдения за деформацией эритроцитов в капиллярах. Клетки крови 6: 231–237
PubMed CAS Google Scholar
Басараб Дж. А., Берг Р. Т., Томпсон Дж. Р. (1980) Хрупкость эритроцитов у «двоякого» крупного рогатого скота. Can J Anim Sci 60: 869–876
Статья Google Scholar
Betticher DC, Geiser J (1989) Устойчивость эритроцитов млекопитающих разного размера к гипертонической среде.Comp Biochem Physiol 93A: 429–432
Статья Google Scholar
Brodlie KW (1980) Обзор методов построения кривых и функций. В кн .: Математические методы в компьютерной графике и дизайне. Academic Press, Лондон
Google Scholar
Cameron IL, Fullerton GD (1990) Модель для объяснения поведения осмотического давления гемоглобина и сывороточного альбумина. Biochem Cell Biol 68: 894–898
PubMed CAS Статья Google Scholar
Chien S (1970) Зависимость эффективного объема клеток от сдвига как определяющий фактор вязкости крови.Наука 168: 977–979
PubMed Статья CAS Google Scholar
Chien S (1985) Роль клеток крови в регуляции микроциркуляции. Microvasc Res 29: 129–151
PubMed Статья CAS Google Scholar
Чиен С., Усами С., Делленбэк Р. Дж. И др. (1971) Сравнительная гемореология: гематологические последствия видовых различий в вязкости крови.Биореология 8: 35–57.
PubMed CAS Google Scholar
Чошняк И., Школьник А. (1977) Быстрая регидратация у черных бедуинских коз: хрупкость эритроцитов и роль рубца. Comp Biochem Physiol 56A: 581–583
Статья Google Scholar
Choshniak I, Wittenberg C, Rosenfeld J et al. (1984) Быстрая регидратация и функция почек у черных бедуинских коз.Physiol Zool 57: 573–579
Google Scholar
Dacie JV, Lewis SM (1975) Практическая гематология, 5-е изд. Черчилль Ливингстон, Эдинбург, стр. 202
Google Scholar
Detraglia M, Cook FB, Stasiw DM et al. (1974) Хрупкость эритроцитов при старении. Biochim Biophys Acta 345: 213–219
PubMed Статья CAS Google Scholar
Драбкин Д.Л., Остин Дж. Х. (1935) Спектрофотометрические исследования В.Методика анализа неразбавленной крови и концентрированного раствора гемоглобина. J Biol Chem 112: 105–115
CAS Google Scholar
Gaehtgens P, Schmidt F, Will G (1981a) Сравнительная реология ядросодержащих и неядерных эритроцитов I. Микрореология эритроцитов птиц во время капиллярного потока. Pflügers Arch 390: 278–282
PubMed Статья CAS Google Scholar
Gaehtgens P, Will G, Schmidt F (1981b) Сравнительная реология ядросодержащих и безъядерных эритроцитов II.Реологические свойства суспензий эритроцитов птиц в узких капиллярах. Pflügers Arch 390: 283–287
PubMed Статья CAS Google Scholar
Godal HC, Elde AT, Nyborg N et al. (1980) Нормальный диапазон осмотической хрупкости эритроцитов. Scand J Haematol 25: 107–112
PubMed CAS Google Scholar
Хилл А.В. (1910) Возможные эффекты агрегации молекул гемоглобина на его кривой диссоциации.J Physiol 40: 4–5
Google Scholar
Джейн С.К., Уильямс Д.М. (1988) Медно-дефицитная анемия: изменение липидов и вязкости эритроцитов у крыс. Am J Clin Nutr 48: 637–640
PubMed CAS Google Scholar
Джейн, Северная Каролина, Коно, CS, Майерс А. и др. (1980) Серповидные клетки веретенообразных эритроцитов у ангорских коз: наблюдения за осмотической и механической хрупкостью и изменением формы клеток во время анемии.Res Vet Sci 28: 25–35
PubMed CAS Google Scholar
Mosior M, Bialas WA, Gomulkiewicz J (1988) Влияние DIDS на осмотические свойства эритроцитов крупного рогатого скота. Biochim Biophys Acta 945: 51–55
PubMed Статья CAS Google Scholar
Parpart AK, Lorenz PB, Parpart ER et al. (1947) Осмотическая устойчивость (хрупкость) эритроцитов человека.J Clin Invest 26: 636–640
PubMed Статья CAS Google Scholar
Перл Р., Рид Л. Дж. (1920) О темпах роста населения Соединенных Штатов с 1790 года и их математическом представлении. Proc Natl Acad Sci USA 6: 275–278
PubMed Статья CAS Google Scholar
Perk K, Frei YF, Herz A (1964) Осмотическая хрупкость эритроцитов молодых и зрелых домашних и лабораторных животных.Am J Vet Res 25: 1241–1248
PubMed CAS Google Scholar
Richieri GV, Mel HC (1985) Влияние температуры на осмотическую хрупкость и мембрану эритроцитов. Biochim Biophys Acta 813: 41–50
PubMed Статья CAS Google Scholar
Rifkind JM, Araki K, Hadley EC (1983) Взаимосвязь между осмотической хрупкостью эритроцитов человека и возрастом клеток.Arch Biochem Biophys 222: 582–589
PubMed Статья CAS Google Scholar
Силаников Н. (1989) Роль рубца и слюны в гомеостатической реакции на быструю регидратацию у крупного рогатого скота. Am J Physiol 256: R816-R821
PubMed CAS Google Scholar
Силаников Н. (1991) Влияние пероральной, внутрибрюшинной и внутриюремной регидратации на задержку воды, объем рубца, функцию почек и чувство жажды у коз.Comp Biochem Physiol 98A: 253–258
Статья Google Scholar
Svetina S, ekš B (1983) Гипотеза двухслойной пары трансформации формы эритроцитов и осмотического гемолиза. Биомед Биохим Акта 42: S86-S90
PubMed CAS Google Scholar
Try K (1980) Линия кривой осмотической хрупкости эритроцитов. Scand J Haematol 24: 157–161
PubMed CAS Google Scholar
Turner JC (1979) Осмотическая хрупкость эритроцитов пустынного снежного барана.Comp Biochem Physiol 64: 167–175
Статья Google Scholar
Van der Vegt SGL, Ruben AMTh, Werre JM et al. (1985) Характеристики мембран и осмотическая хрупкость эритроцитов, фракционированных с помощью центрифугирования под углом и противоточного центрифугирования. Br J Haematol 61: 405–413
PubMed Статья Google Scholar
Виктора Л., Йозова О., Зубкова М. (1974) Свободный гемоглобин и механическое и осмотическое сопротивление эритроцитов лабораторных животных.Physiol Bohemoslov 23: 565–568
PubMed CAS Google Scholar
Viscor G, Palomeque J (1982) Метод определения кривых осмотической хрупкости эритроцитов у птиц. Lab Anim 16: 48–50
PubMed Статья CAS Google Scholar
Waugh R, Evans EA (1979) Термоэластичность мембраны эритроцитов. Biophys J 26: 115–132
PubMed CAS Статья Google Scholar
Веннберг А., Хенстен-Петтерсен А. (1981) Чувствительность эритроцитов различных видов к гемолизации in vitro.J Biomed Mater Res 15: 433–435
PubMed Статья CAS Google Scholar
Yamaguchi K, Jürgens KD, Bartels H et al. (1987) Свойства переноса кислорода и размеры эритроцитов у высокогорных верблюдов, верблюдов и коз. J Comp Physiol B 157: 1–9
PubMed Статья CAS Google Scholar
Стабильность охлажденных образцов цельной крови для теста на осмотическую хрупкость
ВведениеТест на осмотическую хрупкость (OFT) обычно используется для оценки устойчивости эритроцитов к гемолизу, что помогает в диагностике нескольких заболеваний эритроцитов, таких как гемолитическая анемия, наследственный сфероцитоз. , эллиптоцитоз и талассемия.1 Впервые представленный в клинических лабораториях Дейси в 1954 году, OFT анализирует гемолиз эритроцитов с использованием серии гипотонических растворов хлорида натрия (NaCl). В 1980 году Занелла и др. представила модифицированную версию классического метода Дейси, добавив глицерин в изотонический фосфатно-солевой буфер. Длина волны света, обычно используемая для измерения, составляет 540 нм, при этом только гемоглобин (как основной белок эритроцитов) участвует в абсорбции. Осмотическая хрупкость эритроцитов затем определяется по сдвигам кривой гемолиза путем корреляции светопоглощения и концентрации NaCl.2
OFT — это, по сути, ручной, трудоемкий и требующий много времени анализ, поэтому в большинстве клинических лабораторий его нельзя проводить ежедневно.1 Таким образом, образцы цельной крови могут храниться в течение нескольких дней перед исследованием3. что большинство лабораторных ошибок происходит на преаналитической фазе, в первую очередь из-за отсутствия стандартизированных процедур для сбора образцов (т. е. транспортировки, обращения и подготовки перед тестированием) и хранения.4 В определенных областях тестирования, таких как лабораторная гематология, последствия Ошибки часто могут быть серьезными, особенно те, которые связаны со специализированными диагностическими тестами, поскольку они могут привести к получению ложноположительных или отрицательных результатов тестов и неправильному диагнозу, тем самым ставя под угрозу безопасность пациента и вызывая дополнительные, но предотвратимые расходы для системы здравоохранения.Клинические последствия лабораторных ошибок могут быть пагубными, поскольку они могут способствовать срыву как клинических, так и терапевтических решений5. Согласно документу Международной организации по стандартизации (ISO) 15189: 2012, медицинские лаборатории всегда должны проверять стабильность образца крови и оценивать потенциальное влияние. некоторых преаналитических переменных (например, времени и температуры хранения перед анализом) .6 Что касается OFT, на этот тест могут влиять несколько преаналитических переменных, связанных с анаэробным метаболизмом эритроцитов.7 Таким образом, это исследование было направлено на проверку стабильности образцов цельной крови, используемых для оценки осмотической резистентности эритроцитов.
Материалы и методыДвадцать один последовательный стандартный образец цельной крови (средний возраст пациента 68 ± 9 лет; 6 женщин и 15 мужчин), собранный в пробирки с 5,4 мг K2EDTA (Vacutest Kima, Падуя, Италия) и переданный в местную лабораторию для оценки осмотической резистентности эритроцитов тестировали сразу после сбора (день 0) и через различные временные интервалы после него (1, 2, 3, 4, 7, 10 и 14 дней).В течение периода исследования все образцы хранились в холодильнике при 4 ° C. OFT проводился с помощью Osmored Monotest (1,3% глицерин; Eurospital, Триест, Италия), который использует как гиперосмотический (нормальное значение,> 70%), так и гипосмотический (нормальное значение, 8 потенциальных ассоциаций были протестированы с помощью корреляции Спирмена. Статистический анализ был выполнен с помощью Analyze-it (Analyze-it Software Ltd, Лидс, Великобритания). Статистическая значимость была установлена на p
. Результаты. Вариация гиперосмолярной и гипосмолярной устойчивости (процент гемолиза) в образцах цельной крови, хранящихся до 14 дней при 4 ° C показано в таблице 1.Среднее значение гиперосмолярного и гипосмолярного сопротивления прогрессивно увеличивалось по сравнению с исходным уровнем, достигая статистической значимости на 7-й день для гиперосмолярного сопротивления и на 1-й день для гипосмолярного сопротивления, соответственно. Среднее относительное увеличение процентных значений гемолиза становится выше контрольного значения изменения (т. Е. 33%) на 3-й день для гипосмолярного сопротивления, в то время как этот предел никогда не был достигнут в течение периода исследования для гиперосмолярного сопротивления (рис. 1). Была обнаружена значимая обратная связь между средним увеличением гиперосмолярного сопротивления с течением времени и исходным значением гиперосмолярного сопротивления (r = -0.92; p Рис.2). В отличие от этих результатов, среднее увеличение гиперосмолярного сопротивления не было связано с возрастом (r = -0,41; p = 0,067), полом пациентов (r = 0,00; p = 1,00) или значением гемоглобина (r = -0,14; p = 0,559), в то время как среднее увеличение гипосмолярного сопротивления не было связано с полом пациентов (r = 0,00; p = 1,00), гемоглобином (r = 0,30; p = 0,189), MCV (r = -0,29; p = 0,194 ) или MCH (r = -0,18; p = 0,444).
ОбсуждениеВ 2011 году Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) подтвердила идею о том, что надлежащее управление образцами пациентов имеет решающее значение для точности и надежности лабораторных исследований, а также для гарантии принятия клинических решений.9 Следовательно, лаборатории должны проявлять инициативу в обеспечении того, чтобы все пробы соответствовали необходимым требованиям для получения точных результатов испытаний, поскольку управление пробами является частью контроля процесса и одним из важных аспектов системы менеджмента качества.9 Качество пробы крови остается основой для качества всего процесса тестирования, поскольку получение неподходящих образцов может быть связано с задержкой диагностики, пропущенными или неправильными диагнозами, но также может создавать значительные экономические ограничения для бюджетов больниц и лабораторий.10
В соответствии с продолжающейся реорганизацией медицинских лабораторных служб, которые все больше интегрируются в большие сети учреждений (т. Е. Так называемая парадигма «ступица и спица»), потребуются более активные усилия по мониторингу качества диагностики. образцы крови.11 Надежные данные свидетельствуют о том, что преаналитическая фаза является наиболее важной частью всего процесса тестирования, поскольку до 70% диагностических ошибок связаны с несоответствующими процедурами сбора, обработки, транспортировки и хранения образцов.10
OFT, один из старейших гематологических лабораторных тестов, используемых для оценки физического состояния эритроцитов, остается важным анализом для выявления нарушений эритроцитов (эритроцитов). Вкратце, OFT измеряет соотношение поверхность / объем эритроцитов в том виде, в каком оно существует, когда они суспендированы в изотонической среде, что отражает степень избыточности мембраны, когда эритроциты находятся в равновесии в изотоническом солевом растворе с глицерином или без него.12 Однако Условия хранения образцов крови могут иметь сильное влияние на форму, объем и целостность эритроцитов из-за непрерывного анаэробного метаболизма этих элементов крови.Рапопорт первоначально описал, что во время хранения эритроцитов могут происходить повреждения мембраны, что может затем привести к сферической трансформации, снижению избыточности мембраны и повышенной уязвимости при относительно высокой осмотической силе. 13 Beutler et al. также продемонстрировали, что изменение осмотической хрупкости происходит не только из-за потери целостности мембраны, но и из-за присутствия в клетке осмотически активных веществ (например, лактата), которые затем делают гиперосмолярное внутриклеточное пространство, когда клетка погружается в изотонический физиологический раствор. .12
В совокупности наши результаты демонстрируют, что длительное хранение цельной крови может иметь существенное влияние на диагностическую точность OFT, особенно при гипосмолярной резистентности. Поэтому образцы цельной крови не следует хранить в холодильнике при 4 ° C более 2 дней до тестирования. Эти результаты согласуются с результатами, опубликованными почти 25 лет назад Saxena et al., 14, которые показали, что хранение при 4 ° C до 15 дней гепаринизированных образцов цельной крови было связано с умеренным увеличением осмотической хрупкости эритроцитов (по оценке с использованием гипотонических солевых растворов), хотя экспериментов по оценке стабильности гипосмолярной резистентности не проводилось.
В заключение, результаты нашего исследования демонстрируют, что стабильность образца кажется критической для OFT, особенно для гипосмолярной резистентности. Этот вывод может помочь лабораторным специалистам определить четкую политику требований к хранению проб для тестирования OFT в лабораторных справочниках.
Конфликт интересовАвторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Авторские взносыGLS и GL разработали и спроектировали исследование, проанализировали данные, выполнили статистический анализ и составили рукопись; DD и FD проводили эксперименты; GLS и GL интерпретировали данные и написали рукопись.Все авторы критически отредактировали рукопись и одобрили окончательную версию.
Влияние на морфологию, осмотическую хрупкость и электрокинетический потенциал эритроцитов при гипертонии
Название: Влияние на морфологию, осмотическую хрупкость и электрокинетический потенциал эритроцитов при гипертонии
ОБЪЕМ: 13 ВЫПУСК: 2
Автор (ы): С.С.Гайквад * и Дж.Г. Авари *
Принадлежность: Департамент фармацевтических наук, Университет Нагпура RTM, Махатма, Образовательный кампус Джотиба Фули, Амравати-роуд, Нагпур, 440033, Махараштра, Департамент фармацевтических наук, Университет Нагпура RTM, Махатма, Образовательный кампус Джотиба Фулейва, Амра , 440033, Maharashtra
Ключевые слова: Гипертония, эритроциты (эритроциты), сахарный диабет (СД), осмотическая хрупкость, эритроциты, электрохимический свойство, дзета-потенциал.
Реферат: Справочная информация: Гипертония — распространенная проблема со здоровьем, встречающаяся у многих населения и ведущий глобальный фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ). Целью этого исследования было оценить эффективность дзета-потенциала эритроцитов как потенциального дополнительный индикатор риска сердечно-сосудистых расстройств, чтобы пациенты с этим могли быть быстрее выявлены и обработаны.
Методы: в настоящем исследовании у пациентов были взяты образцы крови в 5% растворе декстрозы. страдающие гипертонией и здоровые добровольцы (не принимали никаких лекарств).Подвижность отдельные эритроциты отслеживались с помощью программного обеспечения Zeta meter-ZM4DAQ, полученного под микроскопом. видеоизображения, данные были записаны по 10 раз для каждого образца, а средний дзета-потенциал в mv был записан.
Результаты: мы обнаружили, что среднее значение ЗП эритроцитов в контрольной группе составило 23,41 мВ (± 1,87).