Определение хеликобактер пилори – признаки заражения и способы выявления бактерии, исследование кала и проведение ФГДС, в каких случаях назначается исследование

Содержание

Методы диагностики h pylori: виды анализа на бактерию

сывороткаИнфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови

Диагностика H. pylori позволяет определить наличие бактерии в организме. Бактерия хелиобатер вызывает особый вид гастрита, который ощутимо усложняет жизнь пациенту. Кроме того, опасность заражения H. pylori представляет опасность не только для самого больного, но для окружающих, так как бактерия может передаваться различными путями. На сайте gastritinform.ru вы можете ознакомиться в различными методами диагностики h pylori. Грамотно проведенное исследование — половина успеха в лечении гастрита.

Общая информация об исследовании

H. pyloriH. pylori – это грамотрицательный, факультативно-анаэробный микроорганизм, способный инфицировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки

H. pylori – это грамотрицательный, факультативно-анаэробный микроорганизм, способный инфицировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. В большинстве случаев инфицирование H. pylori (геликобактериоз, или хеликобактериоз) носит постоянный, хронический характер. Геликобактериоз очень распространен: бактерия H. pylori может быть выявлена у 50 % людей земного шара. При этом H. pylori-ассоциированные заболевания (гастрит, язва желудка или двенадцатиперстной кишки, аденокарцинома желудка, MALT-лимфома) возникают только у 15-20 % инфицированных пациентов. Особенностью этих заболеваний является их благоприятный прогноз при условии их ранней диагностики и полной эрадикации H. pylori. Ведущее значение в диагностике геликобактериоза принадлежит лабораторным методам исследования.

Общая информация о методах исследования H. pylori

Существует несколько методов выявления H. pylori. Прямые методы позволяют непосредственно выявить сам микроорганизм. Для большинства прямых методов необходим образец ткани слизистой оболочки (биоптат) и/или содержимое желудка и двенадцатиперстной кишки (аспират), которые обычно получают во время эндоскопического исследования. Таким образом, прямые методы исследования, как правило, являются инвазивными. В отличие от этого, непрямые методы выявляют не сам микроорганизм, а косвенные признаки инфекции, например специфические антитела в сыворотке крови (серологические тесты) или содержание меченого атома углерода в выдыхаемом воздухе (дыхательный уреазный тест). Так как для проведения непрямых тестов не требуется эндоскопического исследования, они называются неинвазивными. Как прямые, так и непрямые тесты на H. pylori, имеют свои преимущества и недостатки. Для точной диагностики геликобактериоза требуется сразу несколько тестов. В связи с этим особенно удобным для врача и пациента является комплексный анализ, включающий все необходимые тесты на H. pylori.

Одним из самых чувствительных методов выявления H. pylori является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (РТ-ПЦР). РТ-ПЦР – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в образце ткани) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Так как анализ основан на выявлении генетического материала, РТ-ПЦР позволяет выявлять присутствие любых форм H. pylori (не только активных спиралевидных, но и неактивных кокковых, некультивируемых), в результате чего исследование характеризуется очень высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность метода бактериологического посева.

Теоретически для осуществления РТ-ПЦР достаточно присутствие 1 молекулы ДНК. На практике концентрация возбудителя в образце должна составлять около 10-100 КОЕ/мл. Такая высокая чувствительность теста означает, что получение отрицательного результата исследования позволяет исключить H. pylori как причину заболевания. Это имеет принципиальное значение при дифференциальной диагностике НПВС-ассоциированных, стрессовых и ишемических гастритов и язв.

Следует отметить, что, несмотря на очень высокую чувствительность теста (85-98 %), ложноотрицательные результаты все же возможны. Так, например, ложноотрицательный результат может быть получен, если бактериальная нагрузка очень низкая (например, на фоне приема некоторых антибиотиков). Ошибок диагностики можно избежать при комбинации этого прямого теста с серологическими исследованиями.

сывороткаИнфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови

Инфицирование H. pylori сопровождается значительным нарастанием иммуноглобулинов класса IgG и IgA в сыворотке крови. Эти иммуноглобулины (антитела) определяются в крови с помощью непрямых тестов. IgG обнаруживаются в 95-100 % случаев геликобактериоза, а IgA – в 68-80 %. Исследование позволяет определить титр антител, то есть является количественным. Как правило, высокие титры антител более характерны для активной, текущей инфекции. Следует отметить, однако, что четкой корреляции между титром антител и степенью тяжести инфекции нет.

Серологические тесты, как и метод РТ-ПЦР, имеют некоторые ограничения. Так, результат анализа зависит от особенностей иммунного ответа пациента. Иммунный ответ пациентов, принимающих цитостатические препараты, и пожилых людей характеризуется пониженной выработкой специфических антител (любых, в том числе к H. pylori). По этой причине во избежание диагностических ошибок серологические тесты целесообразно дополнять прямыми тестами. Эта особенность была учтена при составлении комплексного анализа на H. pylori.

Таким образом, комплексный анализ на H. pylori – это комбинация необходимых и достаточных тестов для выявления этого микроорганизма. Комплексный анализ не предназначен для контроля лечения. Результат как РТ-ПЦР, так и исследования иммуноглобулинов IgG и IgA будет оставаться положительными даже в случае полной эрадикации H. pylori. Ложноположительный результат РТ-ПЦР в этом случае обусловлен способностью этого метода выявлять ДНК любых, даже разрушенных микроорганизмов, ложноположительный результат серологических тестов − особенностями динамики иммунного ответа.

Бактериологический метод

Метод основан на идентификации возбудителя путем посева из биоптата СОЖ. Полученные при эндоскопии биоптаты помещают в пробирки с транспортными средами (Cary-Blaer или Pylori-средой). Посев материала желательно проводить в день его поступления в лабораторию. Инкубация посевов осуществляется в микроаэрофильных условиях при содержании кислорода ≤5%. В дальнейшем проводится идентификация выделенных культур, определяются их морфологические, тинкториальные свойства, чувствительность к антибиотикам.

Специфичность метода – 98%, чувствительность – 76–90% [16], по другим данным – 50–90% [17]. Определенное количество ложноотрицательных результатов возникает при несоблюдении или неточном соблюдении методики исследования. Несмотря на точность метода, он редко используется в обычной клинической практике из-за длительности анализа (средняя продолжительность исследования – 7 дней), сложности его постановки и высокой стоимости. Метод рекомендуется после двух неудачных курсов эрадикационной терапии, когда выбор антибиотиков определяется чувствительностью НР к ним [10, 13].

Виды анализа на хеликобактер пилори

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами.

Анализ кала

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Анализ крови
  • Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген хеликобактер пилори в человеческом организме вызывает ответную реакцию иммунной системы — выработку антител, или иммуноглобулинов. Данный анализ, как и анализ кала, является качественным. В роли биоматериала выступает венозная кровь. Помимо описанных выше симптомов и состояний, этот анализ также назначают в качестве профилактического обследования лицам, имевшим бытовые контакты с людьми, страдающими заболеваниями желудочно-кишечного тракта.
  • Метод вестерн-блота. Данное исследование проводится, если у пациента обнаружены антитела к хеликобактер пилори. Этот анализ является более специфичным методом диагностики, так как дает дифференцированные сведения об антителах. Точность определения количества антител достигается путем разделения с помощью электрофореза белков экстракта бактерии. Биоматериал для исследования — венозная кровь.

Гистологический метод

ГМ позволяет непосредственно визуализировать НP и может быть рекомендован для первичной диагностики у больных, которым показана ЭГДСГМ позволяет непосредственно визуализировать НP и может быть рекомендован для первичной диагностики у больных, которым показана ЭГДС

ГМ позволяет непосредственно визуализировать НP и может быть рекомендован для первичной диагностики у больных, которым показана ЭГДС. Материалом исследования является биоптат СОЖ. Преимуществами ГМ являются простота исполнения, удобство хранения, транспортировки. Специфичность гистологического метода может достигать 100%, а чувствительность – 91–93% [18].
Высокочувствительным (97%) и высокоспецифичным (100%) методом для диагностики инфекции НР является флюоресцентная гибридизация in situ (метод FISH) на гистологических препаратах. Метод FISH может идентифицировать кокковидную форму НР, которая обычно не обнаруживается путем рутинного гистологического исследования. Кроме того, FISH – это быстрый, точный и экономически эффективный метод обнаружения устойчивости к кларитромицину НР в образцах биопсии желудка [15].

Несмотря на высокую чувствительность гистологического метода, на его диагностическую точность могут оказать влияние количество биоптатов и место их забора. Для получения оптимальной информации рекомендуется множественная биопсия, которая также обеспечивает морфологическую оценку СОЖ [19]. Сиднейская система рекомендует исследование не менее пяти биоптатов: по два из антрального отдела (2–3 см от привратника по большой и малой кривизне), по два из тела желудка (по большой и малой кривизне, примерно в 8 см от кардии) и один из угла желудка. Ценность исследования повышается при оценке степени и стадии гастрита по системе OLGA или OLGIM, которые позволяют оценить прогноз заболевания [20].

При малой обсемененности НР, а также при утрате бактерий в процессе подготовки препаратов вероятны ложноотрицательные результаты. При слабой подготовке гистолога возможна идентификация в качестве НР других микроорганизмов – ложноположительный результат.
Чувствительность и специфичность ГМ у пациентов с кровотечением из верхних отделов ЖКТ в среднем ­составляют лишь 70% [21]. Поэтому к вопросу диагностики и лечения НР следует вернуться в период ремиссии в плановом порядке.

Следует учитывать, что обнаружить НР удается только на достаточно тонких и хорошо окрашенных срезах. При наличии атрофических изменений в СОЖ повышается частота ложноотрицательных результатов. Более того, в области кишечной метаплазии HР в большинстве случаев не обнаруживается ни при обычных, ни при специальных методах окрашивания, несмотря на серологические признаки инфекции. Исчезновение HР коррелирует с развитием кишечной метаплазии и снижением секреции желудка [22]. У пациентов, принимающих антисекреторные средства (h3-блокаторы, ИПП), препараты висмута и антибиотики, чувствительность и специфичность ГМ снижены [19, 22]. Универсальной рекомендацией является отмена ИПП за 2 нед до проведения исследования, антибиотиков и препаратов висмута – за 30 дней [23].

Цитологический метод является одним из вариантов гистологического исследования. Материалом являются мазки-отпечатки биоптатов СОЖ, взятых при эндоскопическом исследовании, которые в последующем высушиваются и окрашиваются по методу Романовского–Гимзы.

Быстрый уреазный тест

БУТ является непрямым методом диагностики НР на основе выявления уреазной активности бактерииБУТ является непрямым методом диагностики НР на основе выявления уреазной активности бактерии

БУТ является непрямым методом диагностики НР на основе выявления уреазной активности бактерии. Тест требует взятия биоптата СОЖ, который помещается в пробирку (лунку) с мочевиной и индикатором на жидкостной, гелевой или сухой основе. По изменению цвета индикатора при повышении рН среды в результате расщепления мочевины микробной уреазой можно с достаточно высокой точностью идентифицировать НР. В клинической практике при наличии показаний к эндоскопии и отсутствии противопоказаний к проведению биопсии БУТ рекомендуется использовать в качестве диагностического метода первой линии [24].

Чувствительность БУТ в зависимости от количества биоптатов варьирует в пределах 80–90% [26] (по другим данным – от 61 до 74% [27]). Увеличение количества биоптатов, их забор из двух отделов желудка (из тела и антрума) позволяют увеличить чувствительность БУТ [28]. При использовании качественных тестов и нескольких гастробиоптатов, хорошей обработке биопсийных щипцов специфичность теста может достигать 95–100% [25, 26] (по другим данным – 90% [17]). Ложноположительные результаты наблюдаются редко и могут быть обусловлены присутствием других уреазосодержащих бактерий, таких как Proteus mirabilis, Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae и Staphylococcus aureus. Ложноотрицательные результаты теста наблюдаются чаще, чем ложноположительные, что не позволяет использовать отрицательный результат для исключения НР [10]. Ложноотрицательные результаты могут быть получены у пациентов, перенесших язвенное кровотечение, на фоне приема ИПП, антибиотиков, препаратов висмута, а также при выраженной атрофии или метаплазии СОЖ [29].

Таким образом, положительный результат БУТ свидетельствует о наличии НР и дает возможность назначать лечение, но отрицательный – не позволяет исключить НР, поэтому БУТ не рекомендован для оценки эффективности эрадикации [10].

13С/14С-уреазный дыхательный тест

УДТ также основан на выявлении уреазной активности НР. В присутствии НР происходит гидролиз принятого per os раствора мочевины, меченного изотопом углерода (13C или 14C). Углекислый газ (13CO2 или 14CO2) поступает в кровь и, в конечном итоге, выделяется через легкие в выдыхаемом воздухе. Пробы воздуха берутся исходно и через определенное время (при использовании 13C-мочевины – через 30 мин) после приема тестового раствора. Прирост меченого CO2 выражается как дельта по сравнению с исходным значением (DOB). Обычно в качестве критерия присутствия инфекции HР используют DOB >2,0‰. Показано, что значение DOB положительно коррелирует с бактериальной нагрузкой HР [30]. Чувствительность 13C-УДТ составляет 96%, специфичность – 93% [31].

Изначально УДТ разработан с использованием мочевины, меченной слабо радиоактивным изотопом 14С, однако в настоящее время он практически полностью заменен на тест с мочевиной, меченной стабильным не радиоактивным изотопом 13С [31]. 13C-УДТ предпочтительнее 14C-УДТ, поскольку позволяет избежать даже минимального воздействия радиации. Однако меньшая стоимость теста и оборудования обеспечивает популярность 14C-УДТ в развивающихся странах. Точность диагностики 13C-УДТ и 14C-УДТ не отличается, и оба теста можно считать «золотым стандартом» среди неинвазивных методов диагностики HР [32]. Ложноположительные результаты редки, но могут наблюдаться после выполнения ЭГДС с биопсией непосредственно перед тестом, у больных, перенесших резекцию желудка, а также при значительном снижении секреции желудка.

уреазный дыхательный тестУДТ также основан на выявлении уреазной активности НР. В присутствии НР происходит гидролиз принятого per os раствора мочевины, меченного изотопом углерода (13C или 14C)

Небольшое количество ложноотрицательных результатов может быть связано с нарушением методики взятия и хранения проб выдыхаемого воздуха, физической нагрузкой накануне и в процессе выполнения теста. Как и при большинстве других тестов, достоверный результат УДТ может быть получен после 2-недельной отмены ИПП и не ранее чем через 4 нед после прекращения приема антибиотиков и препаратов висмута. Консенсус Маастрихт V оценивает УДТ с меченой мочевиной как лучший способ диагностики НР с высокой чувствительностью и специфичностью и с отличной производительностью как для первичной диагностики инфекции, так и для оценки эффективности эрадикации [10].

В России получил распространение дыхательный тест с немеченой мочевиной («Хелик-тест»). Результаты открытого многоцентрового исследования эффективности дыхательных тестов продемонстрировали его недостаточную чувствительность (78%) и низкую специфичность (62%) [33]. Авторы другого исследования «Хелик-теста» отметили, что низкая специфичность Nh4-уреазных тестов и, как следствие, высокая частота ложноположительных результатов не допускают их использование для первичной диагностики инфекции и контроля эффективности эрадикации НР [34].

Исследование кала на наличие антигена НР

Анализ кала на антиген HР (АГ HР) – это другой неинвазивный метод диагностики с высокой чувствительностью (94%) и специфичностью (97%) [35]. Существует два варианта исследования: иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохроматографический анализ (ИХА) с использованием поликлональных (ПА) или моноклональных (МА) антител. Тесты на основе МА более точны, а ИФА обеспечивают более надежные результаты, чем ИХА [35].

Наряду с 13С-УДТ моноклональный тест на основе ИФА рекомендован как для первичной диагностики НР-инфекции, так и для контроля эрадикации [10]. Моноклональный АГ в кале является удобным и эффективным тестом для диагностики НР у детей [36, 37]. Кроме того, исследование антигена HР можно применять для эпидемиологических исследований и программ скрининга ввиду относительно невысокой стоимости исследования и оборудования [21]. Причинами ложноотрицательных результатов могут являться неравномерное распределение АГ в каловых массах, разрушение АГ при замедлении эвакуации каловых масс (запоры), желудочно-кишечное кровотечение [37].

Серологический метод – выявление антител IgG к HР в плазме крови

Колонизация НР вызывает системный иммунный ответ. Через 3–4 нед после инфицирования в крови больных появляются антитела к НР Эти антитела определяются путем ИФА. Поскольку инфекция является хронической и ее спонтанный клиренс невозможен, то положительные серологические тесты у нелеченых пациентов указывают на наличие текущей инфекции. Специфичность метода – 93–94%, чувствительность – 59–71% [38].

Несмотря на то что уровень антител в процессе успешной эрадикации падает, серологическая реакция остается положительной в течение ряда лет. Этот «серологический рубец» не позволяет использовать серологическое исследование крови для оценки эффективности лечения (причина ложноположительных результатов). Кроме того, серологический метод мало информативен у пациентов со слабым иммунным ответом, а антитела IgG появляются не ранее чем через месяц после инфицирования (причина ложноотрицательных результатов).
Преимуществом серологического метода для первичной диагностики НР является возможность его использования у лиц, принимающих ИПП и антибиотики [10], а также после состоявшегося желудочно-кишечного кровотечения и при атрофии СОЖ. Все перечисленные ситуации ассоциированы со снижением бактериальной «нагрузки», ввиду чего остальные диагностические тесты могут дать ложноотрицательный результат [39].

Растет интерес к расширению возможностей выявления НР-инфекции в режиме реального времени во время эндоскопического обследования желудка, что позволит сократить расходы на диагностику и лечение. Новые возможности для диагностики не только предраковых заболеваний желудка, но и НР-инфекции открыло исследование в узкоспектральном режиме. Узкоспектральная визуализация (linked color imaging – LCI) – новый метод визуальной эндоскопии, разработанный в Токио, основанный на использовании узкополосного коротковолнового света, что позволяет обнаружить воспаление или атрофию и предраковые изменения в слизистой оболочке.

Серологический методКолонизация НР вызывает системный иммунный ответ. Через 3–4 нед после инфицирования в крови больных появляются антитела к НР Эти антитела определяются путем ИФА

Проведено ретроспективное исследование эндоскопических изображений 60 пациентов (30 с доказанной HР-инфекцией и 30 – без НР), с целью сравнения точности LCI и традиционной эндоскопии в белом свете (white-light endoscopy – WLE) для диагностики HР-инфекции. Оценивалась эндоскопически выявленная диффузная гиперемия слизистой оболочки, которая могла коррелировать с НР-инфекцией. Авторы нашли более высокую точность, чувствительность и специфичность (85,8; 93,3 и 78,3%, соответственно) для диагностики HР с использованием LCI по сравнению с обычным WLE (74,2; 81,7 и 66,7%, соответственно). Авторы пришли к выводу, что эндоскопия с применением LCI более информативна, чем WLE, для выявления диффузной гиперемии СОЖ и, соответственно, подозрения на наличие HР [40].

Основными задачами, стоящими перед врачом, являются диагностика HР, подбор эффективной схемы терапии и, в дальнейшем, оценка эффективности проведенного лечения. При выборе метода тестирования HР необходимо, в первую очередь, учитывать его чувствительность и специфичность. Каждый из применяемых сегодня методов имеет свои недостатки, и поэтому ограничиваться в практической деятельности только одним из них нежелательно. Методы, которые можно использовать для первичной диагностики, представлены в табл. 3, для контроля эффективности терапии – в табл. 4.
Прием ИПП ограничивает точность диагностических методов в связи со снижением уреазной активности НР, а также уменьшением количества вегетативных (спиралевидных) форм бактерии. В одном исследовании при сравнении подавляющего действия ИПП на HР показано, что, в отличие от омепразола и лансопразола, пантопразол не ингибирует рост HР и уреазу [40]. Исследуется диагностическая ценность тестов после 7-дневной отмены ИПП. Тем не менее универсальной рекомендацией остается 14-дневная отмена любых ИПП перед большинством тестов. 

Дыхательный тест 13С на helicobacter pylori является неинвазивным методом диагностики и текущего контроля хода лечения
Прежние методы диагностики ограничивались косвенными доказательствами наличия антител к helicobacter pylori, выявлением helicobacter pylori в кале или биоптате.
Недостатком часто используемого скрининга методом иммуноферментного анализа (EIA) для выявления антител к helicobacter pylori является его неэффективность в отношении недавно произошедшего заражения, когда антитела еще не выработались. Также он не подходит для контроля эрадикации, поскольку антитела сохраняются длительное время.

Недостатком выявления helicobacter pylori в кале является зависимость от консистенции стула, из-за которой количество антител может существенно различаться. К тому же анализ кала на helicobacter pylori не подходит для текущего контроля хода лечения. Инвазивная эндоскопическая диагностика обременительна для пациента, не исключает риска кровотечения, к тому же ее результаты не отличаются достоверностью, потому что helicobacter может распределяться по слизистой желудка неравномерно. Поэтому для повышения достоверности исследования биоптаты приходится брать из различных участков слизистой.

Дыхательный тест с изотопом мочевины 13C дает возможность проводить неинвазивную первичную диагностику и контроль хода лечения. После приема изотопа мочевины 13С внутрь бактериальная уреаза начинает его расщепление на изотоп диоксида углерода 13С и аммиак. Изотоп 13С не является радиоактивным, поэтому он полностью безопасен для человека. Тест можно без ограничений использовать для обследования беременных.

Ход тестирования

  1. Пациент выдыхает воздух в специальный пакет (нулевая проба).
  2. Пациент должен, не разжевывая, проглотить 50 мг мочевины, содержащей изотоп 13C (таблетки Diabact Urea Breath Test), запивая ее 50–100 мл воды.
  3. Через 10 минут пациент снова выдыхает воздух во второй пакет.

Нормальные показатели
Результаты: Оценка результата производится методом спектрометрии изотопа (определение содержания изотопа 13С в диоксиде углерода).
Если за 10 минут количество изотопов 13С в диоксиде углерода увеличилось больше, чем на предельно допустимый показатель (1,7 %), результат считается положительным.

отрицательный результат:< 1,3 %
граничный результат:1,3–1,7 %
положительный результат:> 1,7 %

Рекомендация 
Текущий контроль хода лечения необходимо выполнить через 4–6 недель. Прием антибиотиков и препаратов висмута необходимо прекратить за 28, а ингибиторов протонной помпы – за 14 дней до исследования.

Источники:

https://www.mdi-labor.de/ru/dlja-vracej/informacija-laboratorii/d-chatel-n-j-test-13s-na-helicobacter-pylori/

https://con-med.ru/magazines/terapevticheskiy_arkhiv_/terapevticheskiy_arkhiv_-12-2018/metody_diagnostiki_infektsii_helicobacter_pylori_v_klinicheskiy_praktike/

https://helix.ru/kb/item/40-

https://www.kp.ru/guide/analiz-na-khelikobakter-pilori.html

Post Views: 544

Бактерия хеликобактер пилори, консультация гастроэнтеролога

Многие желают узнать, как передается и лечится хеликобактер пилори – опасная бактерия, живущая в желудке, виновница хронического гастрита, эрозий, язв и даже рака желудка.

Что это за бактерия?

Хеликобактери пилори – в переводе с  латыни – это спиралевидная бактерия, живущая в привратнике. И действительно микроскопическая бактерия похожа на спираль, окруженную волосками. С помощью этих волосков – жгутиков она довольно быстро перебирается по внутренним органам к месту своего постоянного жительства – привратнику — нижнему ярусу желудка и начальному отделу кишечника – луковице двенадцатиперстной кишки. Бактерия хеликобактер опровергла миф о том, что соляная кислота желудка убивает все микробы. Напротив, маленькая хищница в разрушающей кислоте чувствует себя как дома, благодаря ферменту уреазе, который расщепляет соляную кислоту.

Как же воздействует хеликобактер на желудок? Уничтожает париетальные (пристеночные) клетки слизистой (внутренней) оболочки желудка, выбрасывая ядовитые продукты – токсины. Защитные клетки крови – нейтрофилы, лимфоциты и другие, преследуют вредителя, пытаясь уничтожить и его, и измененные париетальные клетки – возникает воспаление. Количество защитной слизи на участке пребывания бактерии заметно снижается, на измененный участок стремительно воздействует соляная кислота, усугубляя неизменное воспаление слизистой. Это проявляется болью в желудке «под ложечкой», изжогой, отрыжкой, налетом на языке, неприятным запахом изо рта, постоянной тошнотой, то есть симптомами хронического гастрита.  Хроническое длительное воспаление слизистой оболочки желудка приводит к  изменению ее клеток, вплоть до развития рака желудка.

Как хеликобактер попадает в организм? Поскольку хеликобактер живет в желудке, то заражение возможно при попадании бактерии в организм человека через рот. Это и привычка брать еду или посуду немытыми руками, и желание попробовать еду в чужой тарелке или откусить от яблока или бутерброда товарища, когда предлагают попробовать — так часто заражаются дети. Кроме того заразиться можно при пользовании общей посудой, через поцелуи, в связи с чем хеликобактер часто встречается у членов одной семьи.

Так что же теперь и в кафе со своей посудой ходить? К счастью, хеликобактер не устойчивая бактерия и обработки посуды в посудомоечной машине достаточно, чтобы ее уничтожить. Хорошие рестораны и кафе конечно оборудованы такими машинами, и посещать их можно без риска заражения.

Как узнать, есть ли у меня инфекция хеликобактер пилори?

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами. В первую очередь это гистологический метод, когда при проведении ФГДС (фиброгастродуоденоскопии) – обследования желудка, которое можно провести в Челябинске в Клинике Вся Медицина  — берут для исследования клетки слизистой оболочки желудка. Выявляется не только бактерия хеликобактер пилори, но и оценивается состояние внутренней оболочки желудка – выраженность воспаления и степень изменения клеток слизистой на фоне воспаления. Следующие методы – дыхательные тесты. Хеликобактер вырабатывает фермент уреазу, который способен разлагать мочевину с образованием аммиака и углекислого газа. Сущность методов в определении или состава углекислого газа в выдыхаемом воздухе у пациента (уреазный дыхательный тест) или аммиака (Хелик-тест). Хелик-тест достаточно широко используется, особенно в детской практике, как простой для пациента, не инвазивный метод диагностики. Еще один распространенный метод диагностики – выявление специфичных антител иммуноглобулинов класса G  — IgG в крови пациента. Инфицирование хеликобактер пилори сопровождается развитием иммунного ответа – выработкой антител, из которых IgG встречаются в 95-100% случаев. Это достоверный метод диагностики, позволяющий оценить степень обсемененности хеликобактером, но не лучший способ для контроля лечения хеликобактерной инфекции, так как уровень антител IgG может оставаться высоким после полной гибели микроорганизма в течение длительного времени – 1-1,5 года. В этом случае, если все же делается анализ на антитела, оценивают снижение их уровня не ранее, чем через 2-3 месяца после окончания лечения. Чаще для контроля эффективности лечения хеликобактерной инфекции проводится анализ кала. Он основан на выявлении в кале ДНК хеликобактера и является качественным  — показывает обнаружен хеликобактер или нет, без оценки степени обсемененности. Метод можно применять и для диагностики наличия инфекции до лечения, например, у детей, как простой и безболезненный.

У меня выявлен хеликобактер пилори – что делать?

При выявлении положительного анализа на хеликобактер пилори нужно обратиться за консультацией к гастроэнтерологу или терапевту. В лечении инфекции используются антибиотики, и назначает их только врач.

Можно ли вылечить хеликобактер приемом препарата де-нол, как показывают в рекламе, или народными средствами? Полностью избавиться от инфекции хеликобактер пилори можно только определенными антибиотиками.

Нужно ли мне травить себя антибиотиками, если меня ничего не беспокоит, а результат анализа на хеликобактер положительный? Инфекция может и не беспокоить, в 70% случаев так и происходит, гастрит годами протекает «молча», но через несколько лет вследствие вялотекущего воспаления возникает атрофия слизистой оболочки и нельзя исключить ее переход в рак желудка. В каждом конкретном случае решение о проведении лечения принимает лечащий врач.

Инфекция хеликобактер пилори очень распространена среди населения, есть ли смысл в лечении, если потом можно повторно заразиться? Да, повторное инфицирование возможно, но происходит не часто – примерно 6 человек из 100 пролеченных приобретают инфекцию вновь при несоблюдении правил профилактики. Они очень просты – мыть руки перед едой, не пробовать чужую еду, не есть в сомнительных забегаловках, где нет уверенности в правильной обработке посуды, не целовать не очень близких людей. Важно также при выявлении инфекции хеликобактер пилори проверить на нее  всех членов семьи, начиная с подросткового возраста, и в идеале – пролечиться одновременно всем инфицированным. Детей, если ничего не беспокоит, лечат с подросткового возраста – с 12-13 лет. Если ребенок жалуется на боли в животе или тошноту, то обследование и лечение проводят по показаниям в более раннем возрасте.

Люди очень часто жалуются на обострение гастрита. А ведь во многих случаях его можно вылечить, избавившись от бактерии, которая вызвала воспаление желудка. Если инфекцию оставить без внимания, со временем, гастрит перейдет в атрофический. Тогда пациенту нужно будет минимум раз в год брать биопсию в 5-7 местах желудка, чтобы не пропустить рак.

Анализ на Хеликобактер пилори: расшифровка, норма, как сдавать

Содержание статьи:

Анализ на Хеликобактер (Helicobacter pylori) назначается при наличии симптомов хронического гастрита и язвы желудка, поскольку именно эта бактерия является возбудителем данных заболеваний. Что это такое, в каких случаях следует проводить исследование, как расшифровывать результаты и как лечить инфекцию?

Название микроорганизма происходит от «пилори», указывающего на место его обитания (пилорический отдел желудка), и характеристики формы – «хелико», что значит «спиралевидная».

Анализы на Хеликобактер

Существует несколько способов диагностики HP-инфекции (сокращение НР от Helicobacter pylori), они имеют разную достоверность и отличаются по времени и стоимости проведения. Какой из методов быстрее и дешевле, а какой точнее покажет результат?

Методы лабораторной диагностики инфекции хеликобактер пилори делятся на инвазивные и неинвазивные. Инвазивные предполагают проведение эндоскопии с взятием биоматериала (биопсия) и последующим цитологическим исследованием.

Анализы на Хеликобактер позволяют выявить наличие инфекции и произвести ее количественную оценкуАнализы на Хеликобактер позволяют выявить наличие инфекции и произвести ее количественную оценку

Самыми информативными из неинвазивных тестов считаются иммунологические исследования, с помощью которых определяют наличие антител к хеликобактер пилори в крови, антигена Н. pylori в кале, анализы методом ПЦР, позволяющие выявить генетический материал бактерии, и дыхательные тесты.

ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить фрагменты ДНК возбудителя хеликобактериоза. В качестве исследуемого биоматериала используют каловые массы. В ходе анализа из биоматериала выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно дублируется на специальном устройстве – амплификаторе. Когда количество ДНК оказывается достаточным для дальнейшей детекции, выясняют, обнаружен ли в пробе геномный фрагмент, характерный для Helicobacter pylori. Положительный результат означает наличие хеликобактерной инфекции. Анализ на ПЦР позволяет подтвердить присутствие чужеродного микроорганизма в организме с точностью до 90-95%. В норме генетический материал Helicobacter pylori в исследуемом материале не обнаруживается.

ИФА

Иммунологические методы не определяют возбудителя напрямую, а выявляют антитела к характерным для него антигенам.

Инфекцию, вызванную Helicobacter pylori, связывают с хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, злокачественными опухолями желудка (аденокарциномой, В-клеточной лимфомой).

Основным методом анализа крови на антитела является иммуноферментный анализ (ИФА) – количественное определение уровня антител классов IgA, IgM и IgG к Helicobacter pylori. ИФА также позволяет оценить эффективность терапии инфекции. Так, выработка антитела IgM к Helicobacter pylori – маркер острой стадии процесса. Через несколько недель после первичного инфицирования IgM исчезают. При прогрессировании заболевания и переходе его в хроническую форму обнаруживаются антитела класса IgA, затем IgG. Высокий уровень их концентрации сохраняются в крови в течение длительного времени. Чувствительность метода составляет 87-98%.

Иммуноблотинг

Иммуноблотинг существенно уступает другим иммунологическим методам как по стоимости, так и по трудоемкости выполнения анализа, однако только с его помощью можно, имея лишь сыворотку крови больного, получить данные о свойствах штамма Helicobacter pylori (на основании того, продуцирует ли он специфические антигены CagA и VacA).

Дыхательные тесты

Дыхательный тест – определение в выдыхаемом пациентом воздухе продуктов гидролиза мочевины уреазой Н.pylori. Исследование основано на способности бактерии продуцировать гидролитический фермент уреазу. В пищеварительном тракте уреаза разлагает мочевину до углекислого газа и аммиака. Углекислый газ транспортируется в легкие и выделяется с воздухом в процессе дыхания, его количество фиксируется специальным прибором для уреазного анализа. Дыхательные тесты на хеликобактер подразделяют на углеродные и аммиачные.

Микробиологические методы

Микробиологические и бактериологические методы используются реже, так как для их проведения нужно больше времени. Они предполагают бактериологический посев кала, выделение культуры возбудителя и определение его чувствительности к антибиотикам. В ходе исследования кал помещают в ростовую среду, благоприятную для выращивания колоний хеликобактера. Спустя определенный срок культуру изучают под микроскопом, отмечая количество колоний и их свойства.

Основные признаки, которые могут указывать на инфицирование Хеликобактер пилори, являются типичными симптомами заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Решение о выборе метода принимает лечащий врач. При выявлении у пациента НР-инфекции может быть целесообразным обследование членов семьи больного.

Подготовка к анализу

Для сдачи анализа на Хеликобактер не требуется специальной подготовки, но важно соблюсти общие правила, так как только правильно собранный материал гарантирует достоверность результата. Как правило, все анализы сдаются натощак, то есть после как минимум восьми часов воздержания от пищи. Перед исследованием следует исключить прием алкоголя, курение, употребление жирной и жареной пищи. При самостоятельном сборе материала, например, для анализа кала, важно избегать его загрязнения, так как любые посторонние включения (например, моющие средства, которыми чистился унитаз или подкладное судно) могут исказить результат.

Важное правило при сдаче анализов: в течение месяца перед забором материала пациент не должен принимать антибиотики и препараты, стимулирующие перистальтику желудка.

Как происходит расшифровка результатов

Если проводился качественный анализ (определение наличия бактерий Хеликобактер в организме), то в бланке результатов может быть только два варианта – «отрицательный» или «положительный». Если же метод анализа предполагал количественную оценку, нормы результатов зависят от методики, лаборатории, единиц измерения и других факторов, поэтому интерпретировать результаты анализа может только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает лечение.

Читайте также:

8 эффективных народных средств борьбы с язвенной болезнью

Наследие древней Аюрведы: 10 полезных пряностей

Как организовать питание школьника

Хеликобактер пилори и ее особенности

До 70-х годов прошлого века считалось, что любые бактерии, попадающие в желудок, гибнут под воздействием соляной кислоты, лизоцима и иммуноглобулина. В 1989 г. исследователи сумели выделить в чистом виде и культивировать спиралевидный микроорганизм со слизистой оболочки желудка больного, страдающего гастритом – бактерию Helicobacter pylori.

Самыми информативными из неинвазивных тестов считаются иммунологические исследования, с помощью которых определяют наличие антител к хеликобактер пилори в крови, антигена Н. pylori в кале, анализы методом ПЦР, позволяющие выявить генетический материал бактерии, и дыхательные тесты.

Название микроорганизма происходит от «пилори», указывающего на место его обитания (пилорический отдел желудка), и характеристики формы – «хелико», что значит «спиралевидная».

Заражение бактерией обычно происходит при контакте с грязными поверхностями, через слюну, воздушно-капельным способом, в результате контакта с инфицированным больным, несоблюдения правил личной гигиены, употребления в пищу недостаточно чистых овощей и фруктов, воды из загрязненных источников.

После попадания в организм бактерия передвигается по слизистой оболочке желудка с помощью жгутиков и закрепляется на его стенках. Микроорганизм вырабатывает вещества, разрушающие клетки эпителия слизистой оболочки желудка, выделяет токсины, вызывающие иммунные заболевания. Пытаясь защититься от паразитирующего микроорганизма, желудок увеличивает секрецию соляной кислоты и веществ, разрушающих его стенки. Однако бактерия способна длительное время выживать в кислой среде благодаря выделяемому ею ферменту – уреазе, которая защищает микроорганизм от воздействия желудочного сока.

В 1989 году был выявлен инфекционный возбудитель гастрита и язвенной болезни желудка – бактерия Хеликобактер пилориВ 1989 году был выявлен инфекционный возбудитель гастрита и язвенной болезни желудка – бактерия Хеликобактер пилори

Появление клинических симптомов зависит от состояния иммунитета. Среди инфицированных людей встречается и бессимптомное носительство, так как микроб способен к длительному паразитированию без выраженных клинических проявлений и конфликтов с иммунной системой хозяина. В этом случае бактерия принимает неактивную форму, увеличивая активность при появлении благоприятных для нее условий. Однако даже в неактивном состоянии патогенный микроорганизм способен вызывать повреждение стенок желудка и двенадцатиперстной кишки. Развивающиеся воспалительные изменения способны привести к атрофии слизистой оболочки и развитию злокачественных новообразований.

Если проводился качественный анализ (определение наличия бактерий Хеликобактер в организме), то в бланке результатов может быть только два варианта – «отрицательный» или «положительный».

Инфекцию, вызванную Helicobacter pylori, связывают с хроническим гастритом, язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, злокачественными опухолями желудка (аденокарциномой, В-клеточной лимфомой).

Симптомы инфекции Helicobacter pylori

Основные признаки, которые могут указывать на инфицирование Хеликобактер пилори, являются типичными симптомами заболеваний желудочно-кишечного тракта:

Видео с YouTube по теме статьи:

Определение хеликобактера пилори

Хеликобактер пилори представляет собой уникальную вредоносную бактерию, которая вызывает серьезное заболевание хеликобактериоз. Такое опасное заболевание желудка также характерно для двенадцатиперстной кишки. Эта необычная бактерия обитает в особом пилорическом отделе желудка, за счет чего она и стала так называться. Доказано, что она легко противостоит мощному разрушающему действию типичной кислотной среды желудка. С помощью своих жгутиков данная бактерия без труда перемещается в слизистых стенках желудка, а также может на них закрепляться.

Хеликобактер пилори вызывает многочисленные заболевания желудочно-кишечного тракта. При размножении эти микроорганизмы губительно воздействуют на все клетки желудка, что приводит к различным воспалительным процессам. К ним можно отнести не только гастриты и язвы, но и рак. На сегодняшний день уничтожение таких опасных  бактерий позволяет предотвратить неизбежное развитие многих патологий.

Причины хеликобактериоза

Такие необычные бактерии хеликобактер пилори совершенно не могут жить на открытом воздухе. Как правило, они передаются через слюну и слизь человека при контакте. Обычно заражение происходит бытовым путем через посуду и стандартные средства личной гигиены, а также через поцелуи. Известно, что в группу риска всегда попадает семья и друзья, которые часто контактируют с больным.

При попадании через пищевод в желудок человека такая бактерия не погибает, несмотря на действие соляной кислоты. Бактерии легко проникают в слизистые оболочки, разрушая ткани, что вызывает нарушение нормального функционирования. При этом воспаляется слизистая желудка, а затем развиваются эрозии, гастриты и язвы. Считается, что при отсутствии лечения существенно увеличивается риск появления рака желудка.

Симптомы хеликобактериоза

Основными настораживающими симптомами, которые напрямую свидетельствуют о заражении бактерией хеликобактер пилори, считаются часто повторяющиеся сильные боли в области желудка. Зачастую боли локализуются натощак, уменьшаясь после приема пищи. Такие симптомы говорят об образовании язв и эрозий на стенках. Следует упомянуть, что при хеликобактериозе пациенты нередко жалуются на изжогу и тяжесть в желудке, а также можно наблюдать плохую перевариваемость жирной мясной пищи. При запущенных состояниях можно отметить тошноту и в редких случаях — рвоту.

Формы хеликобактер пилори

Хеликобактер пилори представляет собой спиралевидную грамотрицательную бактерию, которая способствует инфицированию различных областей двенадцатиперстной кишки и желудка. Она провоцирует такие заболевания, как гастриты, дуодениты, язвы и рак. Спиральные формы бактерий определяют исключительную способность данного микроорганизма без труда проникать в слизистые оболочки желудка, а также значительно облегчают их движение.

 Диагностика

У некоторых больных при заболевании хеликобактериозом определенные симптомы могут не наблюдаться. Для определения наличия бактерий используют особый тест, который при помощи биохимических реакций определяет содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови. Помимо этого показана эндоскопия и дыхательный тест. Показан гистологический и специальный уреазный анализ для выявления хеликобактер пилори.

Цитологическое исследование основано на получении мазков-отпечатков, которые взяты при эндоскопии, а также для данной процедуры необходимы биоптаты слизистой оболочки особого антрального отдела желудка. Как правило, биоптат берут прицельно из тех участков, где визуально наиболее выражены отклонения от норм. Специалист в таких областях может наблюдать гиперемию и отек. Зачастую спиралевидные хеликобактерии располагаются в центре слизи.

Такое цитологическое исследование определяет три основных степени обсемененности слизистых бактериями. При наличии менее 20 микробных тел диагностируется слабая обсемененность, которая не вызывает тревоги за здоровье человека. Выявляют также клеточную инфильтрацию при обнаружении микроорганизмов в мазках-отпечатках и плазматических клетках.

В зависимости от количества определенных клеточных элементов можно косвенно судить о выраженной степени активности и воспалительном процессе. Помимо этого, такое исследование выявляет пролиферативные процессы в слизистых, дисплазии и метаплазии, а также различные злокачественные образования. Однако цитологический метод не даёт представления о структуре слизистых оболочек.

Специальный уреазный тест считается эффективным экспресс-методом, который, главным образом, основан на активности представленных микроорганизмов. Его делают при помощи особого геля-носителя, содержащего мочевину, специальный бактериостатический агент и особый фенол-рол в качестве необходимого индикатора. Такой pH индикатор позволяет делать точные выводы о конкретном состоянии слизистых оболочек желудка. Биоптат слизистой, полученный в результате эндоскопии, также помещают в этот тест.

В крайне редких случаях тест показывает ложноотрицательные результаты, что возможно при слабости хеликобактерной инфекции. Для повышения достоверности специалисты обычно применяют гистологический и уреазный методы. После проведенного антибактериального лечения их следует повторить. При необходимости может быть назначен повторный курс комбинированной терапии антигеликобактерного типа, что позволит избежать скорых рецидивов болезни.

Специальный дыхательный тест неинвазивен и безопасен. Он позволяет без труда определить уровень колонизации заселенности слизистых данными микроорганизмами. Такой анализ считается оптимальным для полноценного контроля эрадикационной терапии. Это исследование следует проводить натощак. Сначала берут специальные пробы фонового выдыхаемого воздуха, а затем, после легкого завтрака, используют тестовый субстрат.

Различные гистологические методы предназначены для быстрого обнаружения хеликобактерий в биоптатах, позволяя одновременно изучить морфологические изменения. Метод яркой окраски по Гимзе является самым доступным и простым. С помощью данного теста микроорганизмы хорошо заметны на поверхности эпителия и в глубине ямок.

Другой гистологический метод точной гибридизации ДНК чувствителен и высокоспецифичен, он позволяет идентифицировать многочисленные штаммы хеликобактер пилори.

Для диагностики также применяются и другие методики. К ним можно отнести иммунологический и микробиологический методы, полимеразную цепную реакцию, а также определение антигена в кале. Как правило, на анализ берут кровь и результаты эндоскопии, а также исследуют дыхание и кал.

Лечение и профилактика хеликобактериоза

Основное лечение хеликобактериоза, главным образом, предусматривает длительное проведение необходимой комплексной терапии, которая направлена на уничтожение вредоносных микроорганизмов в желудке человека. Именно это условие является необходимым для полноценного заживления всех эрозий и язв на слизистых оболочках. Даже если симптомы заболевания не проявляются, это не является полным излечением. Бактерии способны длительное время не проявлять себя, при этом они сохраняются на стенках желудка в пассивном состоянии.

Следует отметить, что на развитие данного заболевания напрямую влияет образ жизни конкретного человека. При курении и злоупотреблении спиртным, при неправильном питании и постоянном нервном перенапряжении риск инфицирования существенно возрастает.

Для лечения пациента показана комплексная терапия, включающая использование современных антибиотиков и специальные лекарственные средства для восстановления слизистых.

Обязательное лечение показано при мальтоме желудка, атрофических гастритах, резекции желудка при онкологических образованиях, а также при язвенных состояниях желудка и двенадцатиперстной кишки. Оно может применяться не только в период обострения, но и при ремиссии болезни.

Все схемы лечения данной хеликобактерной инфекции обязательно включают не менее трех лекарственных препаратов. Как правило, в их число входят два тщательно подобранных антибиотика и специальный ингибитор протонной помпы.

При двойной схеме лечение, в большинстве случаев, будет неэффективным. Поэтому опытные специалисты всегда подбирают тройную схему эрадикации. Длительность данного лечения составляет семь дней. Одним из наиболее быстродействующих фармакологических препаратов антисекреторного и антибактериального типа считается Париет, его включают в комплексную терапию, назначают не менее двух раз в сутки. Уже в первые сутки такого лечения заметен надежный антисекреторный эффект. Также нет необходимости в применении данного лекарственного средства перед началом приема антибиотиков, что является несомненным плюсом.

Для профилактики заражения данной инфекцией рекомендуют ежедневно принимать сироп шиповника в течение одного месяца. Дозировка должна составлять 1 ч.л. После курса лечения следует сделать двухнедельный перерыв и при необходимости профилактический приём препарата повторить.

Также не менее важным этапом считается соблюдение строгих правил гигиены. Необходимо всегда мыть руки перед каждым приемом пищи, не использовать грязную посуду и полотенца. Не следует применять чужие средства личной гигиены. При обнаружении хеликобактериоза у одного члена семьи, все остальные члены семьи подлежат обязательному обследованию.

Врач лабораторной диагностики ЦДЛ

Новополоцкой городской больницы

Сапронова Н.В.

   

Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод)

array(19) { [«catalog_code»]=> string(6) «049001» [«name»]=> string(206) «Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод)» [«period»]=> string(1) «1» [«period_max»]=> string(1) «0» [«period_unit_name»]=> string(6) «к.д.» [«cito_period»]=> string(1) «3» [«cito_period_max»]=> string(1) «5» [«cito_period_unit_name»]=> string(3) «ч.» [«group_id»]=> string(4) «2543» [«id»]=> string(4) «3565» [«url»]=> string(42) «helicobacter-pilori-opredelenije-antigenov» [«podgotovka»]=> string(628) «

Нельзя собирать кал из памперсов, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов. Небольшое количество кала забирают из разных мест одноразовой лопаточкой (4-5 раз). Следует избегать примеси мочи и выделений из половых органов.

» [«opisanie»]=> string(4258) «

Helicobacter pylori – бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с H.pylori.

Все многообразие методов обнаружения хеликобактерной инфекции основано на определении собственно H. pylori (прямые методы) либо продуктов активной жизнедеятельности бактерии (уреазный дыхательный тест), а также подразделяются на инвазивные (гастроскопия) и неинвазивные. На V Маастрихтской согласительной конференции во Флоренции (2015 г.) одним из основных неинвазивных методов, который рекомендуется для стратегии «test-and-treat» («выявляй и лечи»), признан тест по определению антигенов H.pylori в кале.

Образцы кала лучше исследовать в период обострения болезни, т.к. через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается. Определение антигенов H. pylori в кале в международной практике служит не только методом диагностики инфекции H.pylori, а также широко используется для диагностики успешности эрадикационной терапии (не ранее чем через 4 недели после окончания курса антихеликобактерной терапии, либо после окончания лечения любыми антибиотиками или антисекреторными средствами сопутствующих заболеваний). Отсутствие антигенов возбудителя в кале через 4 недели после окончания лечения свидетельствует об успешности эрадикационной терапии.

Показания к назначению исследования:

  • первичная диагностика хеликобактерной инфекции;
  • оценка эффективности эрадикационной терапии.

Интерпретация результатов

Пример результата (вариант нормы):

Параметр Результат Референсные значения
Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод) Не обнаружено Не обнаружено

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «860» [«cito_price»]=> string(4) «1720» [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) { [0]=> array(3) { [«cito»]=> string(1) «Y» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(6) «Кал» } } }

Методы диагностики инфекции Helicobacter pylori: современное состояние вопроса

Инфекция Helicobacter pylori имеет глобальное значение и широкое распространение в мире, в том числе и в России, где по эпидемиологическим данным инфицированы более 80% взрослого населения. Воспаление слизистой оболочки желудка, вызванное Helicobacter pylori, составляет 90% среди всех форм гастритов. В статье представлены современные методы диагностики хронического Helicobacter pylori-ассоциированного гастрита, основанные на рекомендациях международных консенсусов по диагностике заболеваний, ассоциированных с инфекцией Helicobacter pylori, а также по материалам консенсуса Маастрихт IV (Флоренция, 2010).

Ключевые слова: хронический гастрит, Helicobacter pylori, инвазивные и неинвазивные методы диагностики.

Helicobacter pylori infection is a global concern and widespread in the world, including in Russia, where the epidemiological data are infected with more than 80% of the adult population. Inflammation of the mucous membrane of the stomach caused by Helicobacter pylori, 90% of all forms of gastritis. The paper presents methods of diagnosis of chronic Helicobacter pylori-associated gastritis, based on the recommendations of an international consensus on the diagnosis of diseases associated with infection Helicobacter pylori, as well as based on consensus Maastricht IV (Florence, 2010).

Key words: chronic gastritis, Helicobacter pylori, invasive and non-invasive diagnostic methods.

Хронический Helicobacter pylori (НР)-ассоциированный гастрит — одно из наиболее часто встречающихся гастроэнтерологических заболеваний в связи с тем, что распространенность инфицирования Helicobacter pylori прогрессивно возрастает. В России около 80% случаев хронического гастрита ассоциировано с Helicobacter pylori [1]. Международное агенство по изучению рака классифицировало Helicobacter pylori как канцероген I класса в отношении рака желудка кишечного типа [2]. Хронический НР-ассоциированный гастрит все чаще выявляется у людей молодого трудоспособного возраста, включая их в группу высокого риска развития рака желудка кишечного типа. Неуклонное прогрессирование атрофии слизистой оболочки желудка у пациентов с хроническим НР-ассоциированным гастритом может привести к развитию дисплазии/неоплазии [3]. Разработка алгоритмов ранней и точной диагностики хронического НР-ассоциированного гастрита позволит улучшить качество лечения и диспансерного наблюдения за данной категорией пациентов.

В соответствии со стандартами диагностики и лечения ассоциированных с Helicobacter pylori заболеваний [4], наиболее точный диагноз хронического НР-ассоциированного гастрита может быть установлен после морфологического исследования биоптатов слизистой оболочки желудка. Такой подход позволяет оценить состояние слизистой оболочки желудка, дать характеристику воспалительного процесса и оценить прогноз развития рака желудка на основании выраженности атрофических изменений слизистой оболочки желудка, что дает возможность клиницисту персонифицировать программу наблюдения больного хроническим НР-ассоциированным гастритом [2].

По требованиям Модифицированной Сиднейской системы для того чтобы правильно интерпретировать состояние слизистой оболочки желудка, необходимо минимум пять биоптатов: 2 из антрального отдела на расстоянии 2-3 см от привратника по большой и малой кривизне, 2 из тела желудка на расстоянии 8 см от кардии по большой кривизне и на 4 см проксимальнее угла по малой кривизне, 1 — из угла желудка [2]. Заключение должно содержать сведения об активности и выраженности воспаления, степени атрофии, метаплазии и о наличии Helicobacter pylori [5]. Современный подход для установления уровня выраженности атрофических изменений слизистой оболочки желудка предполагает определение стадии хронического гастрита согласно современной классификации хронического гастрита OLGA — Operative Link for Gastritis Assessment [6]. Модифицированный вариант OLGA system — Российский пересмотр классификации хронического гастрита был утвержден III Съездом Российского общества патологоанатомов (Самара, 2009), где для интегральной оценки атрофии слизистой оболочки использована визуально-аналоговая шкала, разработанная в виде таблицы стадий хронического гастрита [7]. Принципиально важным для практического использования предлагаемой оценки стадии хронического гастрита является прогнозирование риска развития рака желудка, возможное на основании оценки лишь атрофических изменений слизистой оболочки, то есть еще до появления признаков эпителиальной дисплазии/неоплазии [7]. Известно, что с нарастанием стадии атрофии увеличивается риск рака желудка кишечного типа, так как на стадии III-IV риск рака желудка кишечного типа возрастает в 6 раз [7]. Следовательно, врач, наблюдающий больного НР-ассоциированным гастритом, должен проводить эрадикационную терапию с целью предупреждения появления атрофических изменений слизистой оболочки желудка.

На этапе диагностики хронического НР-ассоциированного гастрита принципиальное значение имеет выявление этиологического фактора, а именно – Helicobacter pylori [8]. Все методы верификации Helicobacter pylori подразделяют на прямые и непрямые, инвазивные и неинвазивные (Табл.1).

Таблица 1

Основные методы диагностики Helicobacter pylori

Инвазивные методы

(требуют проведения эндоскопического исследования с прицельной биопсией и дальнейшим изучением гастробиоптатов)

Неинвазивные методы

(эндоскопическое исследование не требуется)

  • прямые: гистологический метод, молекулярно-генетический метод – ПЦР в биоптате, бактериологический метод;
  • непрямые: быстрый уреазный тест (Хелпил-тест).
  • Иммунологические методы: исследование кала на наличие антигенов Helicobacter pylori с применением моноклональных антител; серологический метод (выявление антител IgG к Helicobacter pylori)
  • биохимический метод: уреазный дыхательный тест с 13С-мочевиной.

Основой гистологического метода является микроскопическое морфологическое и морфометрическое исследование парафиновых срезов, окрашенных различными способами: гематоксилин-эозином, по Гимзе, толуидиновым синим, по Вартину-Старри и др. При этом специфичность метода составляет 93-94%, чувствительность — 95% [9].

С использованием метода ПЦР возможно выделение высокопатогенных и низкопатогенных штаммов Helicobacter pylori. Это важно для определения прогноза заболевания и эффективности эрадикации. Специфичность метода — 95%, чувствительность — 94% [8,9].

Культуральное исследование и стандартное определение чувствительности Helicobacter pylori к антибиотикам перед терапией первой линии важно проводить в регионах или популяциях с высокой резистентностью к кларитромицину (более 15-20%), если планируется использовать стандартную трехкомпонентную эрадикационную терапию, одним из компонентов которой является кларитромицин. Бактериологический метод с определением чувствительности к антибиотикам также необходимо применять при неэффективности терапии второй линии [10]. Специфичность метода составляет практически 100%, чувствительность — 76-90% [9].

Основой быстрого уреазного теста является определение Helicobacter pylori по уреазной активности микроорганизма в биоптатах слизистой оболочки желудка. Helicobacter pylori продуцирует уреазу, под влиянием которой происходит гидролиз мочевины с образованием иона аммония. При этом увеличивается рН среды, что можно зафиксировать с помощью изменения цвета индикатора. Биоптаты слизистой оболочки желудка помещают в раствор, содержащий мочевину и индикатор, изменение цвета которого косвенно свидетельствует о наличии Helicobacter pylori [8]. Специфичность — 96%, чувствительность — 95% [9].

В клинической практике для выявления Helicobacter pylori используется несколько неинвазивных диагностических тестов. Уреазный дыхательный тест, основанный на определении 13С-мочевины, является лучшим тестом для диагностики инфекции Helicobacter pylori [10]. Это быстрый и высокоточный метод определения инфицированности Helicobacter pylori слизистой оболочки желудка по уреазной активности микроорганизма: способности уреазы разлагать мочевину до Nh5+ и HCO3- с последующим образованием из HCO3- углекислого газа, который, попадая в кровоток, затем выделяется через легкие и может быть определен спектрометром в выдыхаемом воздухе. Специфичность метода — 93-100%, чувствительность — 95-97% [9].

В последние годы была разработана новая методика определения антигенов Helicobacter pylori в кале, в которой вместо поликлональных антител используются моноклональные [10]. Этот метод является высокоточным методом как для первичной диагностики Helicobacter pylori, так и для контроля лечения. Такой подход позволяет избежать трудностей проведения эндоскопического исследования, включающего психологический и физический дискомфорт для пациентов. Однако в группах пациентов с высоким риском развития рака желудка (возрастной порог или наличие симптомов «тревоги») предпочтительным является проведение эндоскопического исследования [10].

Серологический метод – третий среди неинвазивных диагностических тестов для диагностики инфекции Helicobacter pylori. Учитывая хронический характер инфекции, следует определять только IgG. Предпочтительным методом является иммуноферментный анализ (ИФА). Серологическое определение антител IgG к Helicobacter pylori в сыворотке крови является простым и доступным методом первичного скрининга инфекции [8]. Учитывая, что антитела к Helicobacter pylori сохраняются в течение многих месяцев после эрадикации микроорганизма, использование серологического метода не рекомендуется для оценки эффективности проведения эрадикационной терапии [10].

Врачу, осуществляющему первичную диагностику хеликобактериоза с помощью инвазивных тестов, необходимо помнить, что может быть получен ложноотрицательный результат при низкой плотности обсеменения слизистой оболочки желудка Helicobacter pylori, что часто имеет место на фоне приема ингибиторов протонной помпы (ИПП), антибиотиков и препаратов висмута, а также при выраженном атрофическом гастрите. В таких случаях рекомендуется обязательная комбинация инвазивных методов с определением антител к Helicobacter pylori в сыворотке крови [11].

Из неинвазивных методов наиболее перспективным является тест-система «ГастроПанель», которая позволяет определять в сыворотке крови уровни гастрина-17 (G-17), пепсиногена-I (PGI), пепсиногена-II (PGII), а также специфических иммуноглобулинов класса G (IgG) к Helicobacter pylori (Табл. 2). Тесты основаны на технологии иммуноферментного анализа [12].

Гастрин-17 вырабатывается G-клетками антрального отдела желудка, и при атрофии в этом отделе уровень гастрина снижается. В случае атрофического гастрита тела желудка при отсутствии атрофии в антруме содержание гастрина-17 возрастает (> 10 пмоль/л) в связи с включением механизма отрицательной обратной связи регуляции кислотопродукции через гастрин. При атрофии тела желудка снижается уровень сывороточного пепсиногена-I, который продуцируется главными клетками тела желудка. Пепсиноген-II вырабатывается во всех отделах желудка и в двенадцатиперстной кишке, и при атрофическом гастрите тела желудка снижается отношение пепсиноген-I/пеп­синоген-II. Повышение уровня антител IgG к Helicobacter pylori до 42 ЕIU (EIU — иммуноферментные единицы) и более свидетельствует о наличии хеликобактерной инфекции [12].

Таблица 2

Интерпретация результатов, полученных с помощью «ГастроПанели»

Параметр

Норма

Патология

Пепсиноген-I (PGI)

40 — 130 мг/л

< 25 мг/л – тяжелая атрофия слизистой оболочки тела желудка;

25-40 мг/л – атрофия слизистой оболочки тела желудка средней тяжести;

> 130 мг/л – высокая кислотность, пищевод Барретта, высокий риск развития язвы двенадцатиперстной кишки

Пепсиноген-II (PGII)

15 — 55 мг/л

< 15 мг/л – возможно при резекции желудка, гастрэктомии, болезни Аддиссона, микседеме.

> 55 мг/л – высокий риск развития язвы желудка, синдром Золлингера-Эллисона

Соотношение

(PGI) / (PGII)

> 2,5

Соотношение PGI/PGII линейно уменьшается с увеличением выраженности атрофического гастрита в области тела желудка

Гастрин-17 (G-17) базальный

3 — 20 пмоль/л

< 2,5 пмоль/л – атрофический гастрит антрального отдела желудка

Гастрин-17 (G-17) стимулированный

6 — 45 пмоль/л

< 5 пмоль/л – атрофический гастрит антрального отдела желудка

Антитела класса G (IgG) к Helicobacter pylori

< 34 EIU

отрицательный

> 42 EIU – положительный (наличие хеликобактерной инфекции)

Для первичной диагностики Helicobacter pylori могут быть использованы все указанные методы. Однако отрицательный результат исследования может считаться истинно отрицательным только при условии отсутствия лечения ингибиторами желудочной секреции (ингибиторы протонной помпы, Н2-блокаторы) менее чем за 2 недели и антибактериальными препаратами в течение 1 месяца перед проведением теста. Исключением является метод выявления антител к Нelicobacter pylori в крови, который может быть критерием наличия инфекции на фоне приема антисекреторных препаратов, поскольку титр антител в крови сохраняется длительно. По этой же причине его не следует использовать для оценки эффективности эрадикации. Контрольное исследование для оценки эрадикации любым методом, кроме иммунологических, должно проводиться не ранее, чем через 4 недели после окончания лечения антибиотиками, препаратами висмута и ингибиторами протонной помпы [8, 9].

При выборе метода диагностики хронического HP-ассоциированного гастрита врач, в первую очередь, должен учитывать его диагностическую чувствительность и специфичность. Между тем каждый из применяемых методов имеет свои недостатки. Возможно получение ложноотрицательных результатов при серологическом исследовании сыворотки крови – вследствие перекрестного реагирования антител; при быстром уреазном тесте – из-за контаминации другими уреазопродуцирующими бактериями (протей, псевдомонады, стрептококки, грибы рода Candida) или при наличии уреазонегативных штаммов Нelicobacter pylori; при гистологическом исследовании – из-за схожести морфологии ряда микроорганизмов; при бактериологическом исследовании – из-за сложностей культивирования Нelicobacter pylori или снижение эффективности выделения Нelicobacter pylori в случаях низкой обсемененности [9]. Следовательно, успешность выявления Нelicobacter pylori зависит от правильного сочетания разных методов диагностики.

Литература:

  1. Рапопорт С.И. Гастриты. Пособие для врачей. – М.: «МЕДПРАКТИКА-М», 2010. – 20с.

  2. Ивашкин В.Т., Шептулин А.А., Лапина Т.Л. Хронический гастрит, вызванный инфекцией Helicobacter pylori: диагностика, клиническое значение, прогноз // Пособие для врачей. – М., 2009.

  3. Malfertheiner P, Megraud F, O’Morain C, et al. Current concepts in the management of Helicobacter pylori infection // The Maastricht III Consensus Report. Gut 2007;56:772-81.

  4. Стандарты диагностики и лечения кислотозависимых и ассоциированных с Helicobacter pylori заболеваний (Научное Общество Гастроэнтерологов России, Четвертое Московские соглашение, Х съезд). – Москва 5 марта 2010.

  5. Маев И.В., Самсонов А.А., Андреев Н.Г., Кочетов С.А. Что мы знаем о хроническом гастрите // Фарматека. – 2011. — №10. – С. 10-17.

  6. Rugge M., Correa P., Di Mario F. et al. // Dig. Liver Dis. – 2008. – Vol. 40(8). – P. 650–658

  7. Аруин Л.И., Кононов А.В., Мозговой С.И. Международная классификация хронического гастрита: что следует принять и что вызывает сомнения // Архив патологии. – 2009. – Том 71 – №4 – С. 11–18.

  8. Лазебник Л.Б., Бордин Д.С., Хомерики С.Г., Белоусова Н.Л., Ли И.А. Центральный научно-исследовательский институт гастроэнтерологии Департамента здравоохранения г. Москвы. Хронический гастрит. Методические рекомендации. – М., 2011. – 34с.

  9. Успенский Ю.П., Барышникова Н.В. Helicobacter pylori-ассоциированные заболевания: патогенез, особенности диагностики и дифференцированное лечение. Учебно-методическое пособие. – Санкт-Петербург, 2010. – 64с.

  10. Маев И.В., Самсонов А.А., Андреев Н.Г., Кочетов С.А. Эволюция представлений о диагностике и лечении инфекции Helicobacter pylori (по материалам консенсуса Маастрихт IV, Флоренция 2010) // Вестник практического врача. – 2012. Спецвыпуск 1 – С. 6–30.

  11. Selgrad M, Kandulski A, Malfertheiner P. Helicobacter pylori: Diagnosis and Treatment // Curr Opin Gastroenterol 2009;25:549-56.

  12. Леонтьева Н.И., Щербаков И.Т., Новикова Л.И., Грачева Н.М., Хренников Б.Н., Щербакова Э.Г., Потехин П.П. Оценка инвазивных и неинвазивных методов диагностики хеликобактерной инфекции // Современные технологии в медицине. – 2011. – № 2 – С. 57-60.

Лечение хеликобактер пилори. Современные способы и методы, эффективные схемы

Частые боли в животе, ощущение тяжести и отрыжка после еды, тошнота – типичные признаки заболеваний желудочно-кишечного тракта. Одной из причин плохого самочувствия может стать бактериальная инфекция «хеликобактер пилори», которая поражает желудок и двенадцатиперстную кишку и провоцирует развитие гастрита, язвы и прочих опасных заболеваний ЖКТ.

Бактерии хеликобактер пилори были выявлены сравнительно недавно – около 30 лет назад. И в 2005 году австралийские ученые Робин Уоррен и Барри Маршалл были удостоены за это открытие Нобелевской премии. Тот факт, что гастрит и язва могут иметь инфекционное происхождение, стал новой страницей в истории медицинских исследований.

Причины появления бактерии

Бактерия хеликобактер пилори не может развиваться на открытом воздухе. Передается она бытовым путем: через посуду, средства личной гигиены, а также при поцелуе. Эта бактерия устойчива к кислотной среде, поэтому она легко проникает в слизистые оболочки желудка и разрушает его ткани. Слизистая воспаляется, развиваются эрозии, гастриты, затем – язвы. Если инфекцию вовремя не вылечить, есть риск рака желудка.

Заражению способствует низкий уровень жизни и пренебрежение правилами личной гигиены. Чаще всего болеют люди, живущие в общежитиях, интернатах, детских домах, а также медработники. В странах третьего мира заболевание регистрируется чаще, чем в развитых государствах. Стоит отметить, что в России, как и в других цивилизованных странах мира, в последние годы зафиксированы случаи заболевания среди достаточно обеспеченного населения.

Симптомы хеликобактериоза

Через 6-8 дней после заражения больной начинает отмечать признаки воспаления желудочно-кишечного тракта: боли, тошноту, рвоту, отрыжку. Они являются краткосрочными, и им обычно не придают значения. Болевые ощущения часто возникают натощак и снижаются после приема пищи, что также заставляет больного не воспринимать происходящее всерьез. Тем временем, бактерии остаются в организме и в любой момент могут начать свою разрушительную работу, хотя могут и никак не проявлять свое присутствие годами. Риск начала их болезнетворной активности повышается при неправильном питании, курении, злоупотреблении алкоголем, стрессах, ослаблении общего иммунитета, инфекционных заболеваниях.

Открытие бактерий хеликобактер пилори и изучение их роли в развитии гастрита и язвы дали впечатляющие результаты. Частота рецидивов у больных с язвой двенадцатиперстной кишки снизилась с 67% до 6%, а у больных с язвой желудка – с 59% до 4%. Сейчас ученые не сомневаются в необходимости тестов на хеликобактер пилори при этих заболеваниях.

Диагностика

При подозрении на заражение бактериями хеликобактер пилори проводятся следующие диагностические исследования.

Неинвазивные тесты . Анализы крови и выдыхаемого воздуха. Эти методы отличаются невысокой стоимостью и быстротой получения результатов. Однако неинвазивные тесты дают большое количество ложноположительных результатов. Для повышения надежности дыхательного теста необходимо за 2 недели отказаться от приема антисекреторных средств, антибиотиков, противовоспалительных и антацидных средств. В течение 3 суток перед исследованием нельзя принимать крепкие спиртные напитки и бобовые, а за 3 часа до анализа не курить и не пользоваться жевательной резинкой.

Биопсия . Проводится во время эндоскопического обследования желудка и двенадцатиперстной кишки. На наличие бактерий исследуется образец слизистой. Биопсия дает более точные результаты при условии, что было взято несколько образцов с различных воспаленных участков.

Лечение хеликобактер пилори: современные методы и схемы

Поскольку препараты для лечения хеликобактер пилори относятся к антибиотикам, их назначают исходя из принципа наименьшего вреда для организма. Иногда становится ясно, что лечение хеликобактер пилори антибиотиками нанесет пациенту больший вред, чем сами бактерии, и тогда медикаментозный курс не назначается. Однако при наличии существенных эрозий и язв такое лечение все-таки необходимо – без него заживление не будет окончательным даже при приеме лекарств для восстановления слизистых оболочек. Обязателен курс антибиотиков и в тех случаях, когда в результате хеликобактериоза развились такие заболевания, как мальтома желудка, атрофический гастрит, язва и крайняя степень запущенности заболевания – рак. Антибиотики могут применяться не только в период обострения, но и при ремиссии болезни.

Все схемы лечения хеликобактериоза включают не менее трех лекарственных препаратов. Обычно это два индивидуально подобранных антибиотика и специальный ингибитор протонной помпы, например, париет. Длительность приема лекарств составляет четырнадцать дней. Уже в первый день приема препаратов нередко больной начинает ощущать улучшение своего состояния. Однако принципиально важно довести курс до конца, чтобы бактерии не успели адаптироваться к назначенному антибиотику и не пришлось подбирать новый.

При диагнозе «хеликобактер» курс лечения обязательно предполагает контроль над образом жизни пациента. Предполагается полный отказ от курения и спиртных напитков. Противопоказаны стрессы, неправильное питание. Из рациона исключается кислая, жареная, острая, копченая, жирная пища.

Негативные последствия отсутствия лечения

Самолечение хеликобактериоза недопустимо. Прежде всего, его симптомы сходны с симптомами целого ряда других заболеваний, которые не всегда связаны непосредственно с желудочно-кишечным трактом. Лекарства, их дозировку и длительность лечения необходимо подбирать по результатам анализов. Поэтому лечением хеликобактер пилори может заниматься только квалифицированный врач. Однако даже самая высокая квалификация может оказаться бессильна перед запущенными случаями, когда речь идет о развитии онкологических заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки. Поэтому при малейших симптомах желудочно-кишечной патологии необходимо пройти обследование в авторитетной клинике, где при необходимости вам предложат современное лечение хеликобактер пилори.

Профилактика

Что необходимо делать, чтобы вас не настигла эта болезнь? Лечение кого-либо из ваших близких означает, что вам тоже следует срочно обследоваться.

Доказано, что если заболел хотя бы один член семьи, вероятность инфицирования остальных составляет 95%. Хеликобактериоз – это болезнь социальная, она требует жесткого соблюдения правил личной гигиены. Кроме того, необходимы меры по оздоровлению рациона и повышению иммунитета.

Чтобы хеликобактер после лечения не вернулся и не начал свою разрушительную деятельность с новой силой, через 2-6 недель по окончании курса приема медикаментов назначаются контрольные анализы. Особенного внимания требуют пациенты, у которых в результате инфекции были осложнения в виде кровотечения или перфорации слизистой оболочки желудка. Для них рецидив болезни крайне опасен и даже может привести к летальному исходу.


Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *