алгоритм 8 определение резус-фактора

Определение резус-фактора со стандартной сывороткой анти-резус.

1Вступительное слово: Мы проводим определение группы крови со стандартной сывороткой анти-резус в процедурном кабинете по назначению врача. На мне шапочка, очки, маска, халат, фартук, перчатки. Руки предварительно обработаны гигиеническим способом.

2 Оснащение:

1. Стандартная сыворотка анти-резус

2. Стерильная пробирка

3. Исследуемая кровь ( в пробирке)

4. Физиологический раствор ( в пробирке)

5. Стерильные пипетки 2 шт

6. Ёмкость с 3% раствором хлорамина

3 Техника манипуляции:

1. Внести пипеткой в пробирку две капли сыворотки анти-резус

2. Внести отдельной пипеткой одну каплю крови

3. Вращать между ладонями 5 мин

4. Внести 1 каплю физраствора в случае если наблюдается агглютинация.

5. Встряхнуть пробирку, наблюдать агглютинацию 5 мин.

6. Форма ответа: при определении резус фактора со стандартной сывороткой анти-резус..

1. Агглютинация не наблюдается – резус фактор отрицательный

2. Агглютинация наблюдается – резус фактор положительный

7. После проведения манипуляции все использованные предметы замачиваются в емкости с трехпроцентным раствором хлорамина.

4 Возможные ошибки:

Грубые ошибки:

1. Не использование средств защиты медработника.

2. Нарушение пропорции сыворотки и крови 2:1

3. Не соответствие картины агглютинации заключению о резус пренадлежности.

4. Не продезинфицированы предметы контактировавшие с кровью

Не грубые ошибки:

1. Время ожидания агглютинации менее 5 мин.

2. Не внесен физраствор в случае наблюдаемой агглютинации.

3. Выполнение манипуляции «на весу».

5 Критерии оценивания:

Сдал – отсутствие грубых ошибок, наличие не более двух не грубых ошибок.

Не сдал – наличие грубых ошибок, наличие более двух не грубых ошибок.

При совершении грубой ошибки преподаватель может попросить повторить соответствующий этап манипуляции. Если ошибка повторяется – не сдал. Допускается не более одного повторения.

Методы определения групп крови по системам аво и резус

Определение группы крови по системе АВО

Проводится реакция прямой агглютинации в одном из двух вариантов:

— со стандартными гемагглютинирующими сыворотками.

— реагентами с моноклональными антителами.

Моноклональные антитела ( цоликлоны) – реагенты нового поколения для определения антигенов эритроцитов. Они продуцируются специально сконструированными клеточными линиями мыши или человека. Каждый реагент абсолютно специфичен, так как не содержит примеси других антител.

Этапы определения группы крови по системе АВО:

1. На планшет наносится 0,1мл. ( 1 большая капля) каждого реагента ( анти-А, анти-В, анти АВ в случае применения цоликлонов) или изогемагглютинирующей сыворотки О (I), А (II) или В (III).

2. Рядом с каждой каплей реагента или сыворотки наносится около 0,03мл. (маленькая капля) крови.

3. Реагенты смешиваются с кровью, результат регистрируется не ранее, чем через 3 минуты.

Определение резус-принадлежности крови

Проводится на планшете с применением моноклональных реагентов анти-D(цоликлоны).

Технически проба проводится так же, как по системе АВО. При наличии агглютинации – кровь резус-положительная, при отсутствии – резус-отрицательная.

Обязанности врача, переливающего кровь. Документация переливания крови

При поступлении в стационар больного ему определяется группа крови и ее резус-принадлежность. Бланк с результатом вклеивается в историю болезни. Кроме этого, групповая и резус-принадлежность пациента выносятся на лицевую сторону истории болезни.

Ответственным за выполнение требований по обеспечению совместимости крови донора и реципиента является врач, непосредственно переливающий кровь.

Обязанности врача перед переливанием трансфузионной среды:

1. Обосновать показания к переливанию в истории болезни.

2. Обеспечить правильную транспортировку препаратов крови средним медицинским персоналом со станции переливания крови ( в специальных изотермичных контейнерах) и правильное хранение трансфузионых сред в холодильнике ( кровь в течение 21 дня).

3. Врачом осматривается трансфузионная среда: проверяется герметичность упаковки, правильность паспортизации, визуально оценивается качество среды. Паспорт контейнера с препаратом крови включает : фамилию донора, группу крови по системам АВО и резус, номер контейнера, дату заготовки, название учреждения службы крови). Компоненты крови должны быть исследованы на ВИЧ, гепатиты В и С, сифилис. После окончания трансфузии этикетка контейнера с трансфузионной средой отклеивается от него и вклеивается в историю болезни.

4. Контрольное определение группы крови и резус-принадлежности больного, сопоставление с данными истории болезни.

5. Контрольное определение группы крови и резус-принадлежности донора из пакета с трансфузионной средой, сопоставление с данными, указанными на пакете.

6. Проводится проба на индивидуальную совместимость крови по системам АВО и резус больного и донора.

7. Уточнить у реципиента его паспортные данные и сверить их с историей болезни.

8. Провести биологическую пробу на совместимость.

Абсолютно необходимым условием при переливании компонентов крови является информированное согласие больного на эту операцию.

Переливание гемотрансфузионных сред производится в условиях строгой асептики и антисептики с использованием систем для внутривенного введения, имеющих фильтр.

Во время переливания пациент находится под строгим наблюдением врача. После переливания врач наблюдает пациента не менее 3-х часов с измерением температуры и диуреза. На следующий день больному проводят анализ крови и мочи. Данные о проведенном переливании и изменениях в состоянии больного подробно заносятся в историю болезни.

После окончания переливания трансфузионной среды контейнер с небольшим количеством ее в течение 48 часов хранится в холодильнике.

Тактический алгоритм «Определение групп крови по системе аво с помощью стандартних сывороток»

Оборудование: стандартные сыворотки І, ІІ и ІІІ групп крови двух разных серий, стерильная игла, предметное стекло, или стеклянные палочки, пипетки, спирт, вата, тарелка-планшетка с маркированием групп крови, флакон с физиологическим раствором NaCl.

1 этап. — подготовка к определению групп крови.

На тарелку-планшетку, соответственно меткам, наносят в луночки по 2 капли сывороток О(І), А(ІІ), В(ІІІ) групп двух разных серий. Обрабатывают подушечку ногтевой фаланги ІV пальца 96% спиртом. Прокалывают кончик ногтевой фаланги стерильной иглой.

2 Этап — проведение реакции агглютинации.

Берут 6 капель крови и помещают их на тарелку рядом с каплями сывороток в соотношении 1:10. Перемешивают стеклянной палочкой. Для улучшения реакции необходимо периодически покачивать тарелку на протяжении 3-х минут. Потом в каждую лунку, где наступила агглютинация, добавляют по 1 капле физиологического раствора и периодически покачивают еще на протяжении 2-х минут.

3 Этап — учет реакции.

Реакция в каждой капле может быть положительной (наличие агглютинации) и отрицательной (отсутствие агглютинации). Различные комбинации положительных и отрицательных результатов дают возможность судить о принадлежности исследуемой крови к той или другой группе согласно приведенной таблицы:

Результат реакции с изогемаглютинирующими сыворотками				Исследуемая кровь принадлежит к группе
0 (I) αβ	A (II) β	B(III) α	AB (IV)o (контроль)
—	—	—		0 (I)
+	—	+		A (II)
+	+	—		B(III)
+	+	+	—	AB (IV)

(+) — наличие агглютинации ( — ) — отсутствие агглютинации

При положительной реакции агглютинации в трех лунках необходимо провести реакцию с сывороткой AB (ІV) группы крови (контроль). Только при отрицательной реакции можно говорить о том, что исследуемая кровь группы AB (ІV).

Положительная реакция агглютинации указывает на то, что мы имеем дело или с реакцией панаглютинации (феномен Томпсона), которая наблюдается при разных патологических состояниях, или с гиперслойическим типом крови. Для определения группы крови в таких случаях пользуются перекрестной реакцией (со стандартными эритроцитами), которую, как правило, проводят на станции переливания крови.

Тактический алгоритм «Определение групп крови по системе аво с помощью моноклональных антител (цоликлонов)»

Оборудование:

флаконы с моноклональними антителами (цоликлонами) анти-А и анти-В, стерильная игла, предметное стекло, или стеклянные палочки, пипетки, спирт, вата, тарелка-планшетка с маркированием групп крови, флакон с физиологическим раствором.

1 этап. — подготовка к определению групп крови.

На тарелку-планшетку, соответственно с метками, наносят в луночки по 2 капли диагностикума анти-А и анти-В. Обрабатывают подушечку ногтевой фаланги ІV пальца 96% спиртом. Прокалывают кончик ногтевой фаланги стерильной иглой.

Определение группы крови и резус-фактора Определение групп крови по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам

Для определения групповой принадлежности крови необходимо следующее оснащение: два комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток I(0), II(А), III (В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки IV(АВ) (в каждую ампулу с сывороткой опускают сухую чистую пипетку), флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой, чисто вымытая сухая тарелка, предметные стекла, стерильные копьевидные иглы для прокола кожи пальца, стерильные марлевые шарики, спирт. Определение проводят в помещении с хорошим освещением, при температуре от 15 до 25 ° С.

Каждая ампула стандартной сыворотки должна иметь паспорт-этикетку с указанием группы крови, номера серии, титра, срока годности, места изготовления. Ампулой без этикетки пользоваться запрещается. Стандартные сыворотки для определения группы крови по системе АВ0 выпускают с определённой цветовой маркировкой: I(0) — бесцветная, II (А) — голубая, III (В) — красная, IV(АВ) — жёлтая. Маркировка имеется на этикетке в виде цветных полос: на этикетке сыворотки I(0) полос нет, сыворотки II (А) — две полосы синего цвета, сыворотки III (В) — три полосы красного цвета и сыворотки IV(АВ) — четыре полосы жёлтого цвета. Сыворотки хранят при температуре 4-10 ° С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной, ампула — сохранной. Наличие хлопьев, осадка, помутнения являются признаками непригодности сыворотки. Титр сыворотки должен быть не менее 1:32, активность — высокая: первые признаки агглютинации должны появляться не позднее чем через 30 с. Сыворотки с истекшим сроком хранения к использованию непригодны.

Тарелку делят цветным карандашом на четыре квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты I(0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарелки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий I(0), II (А), III (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой-копьём. Первую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие капли разными уголками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5-10 раз меньше капли сыворотки. Затем путём покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путём покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации (рис. 37, см. цв. вкл.).

При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зёрнышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании. При отрицательной реакции капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зёрен. Возможны следующие четыре комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками I(0), II(А), III(В) групп.

1. Все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь — I(0) группы.

2. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой II(А) группы обеих серий и положительная с сыворотками I(0) и III(В) групп. Исследуемая кровь — II(А) группы.

3. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой III(В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой I(0) и III(А) групп. Исследуемая кровь — III(В) группы.

4. Сыворотки I(0), II(А), III(В) групп дают положительную реакцию в обеих сериях. Кровь принадлежит к IV(АВ) группе. Но прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV(АВ) группы по той же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации позволяет окончательно отнести исследуемую кровь к IV(АВ) группе.

Выявление других комбинаций свидетельствует о неправильном определении групповой принадлежности крови больного.

Сведения о группе крови больного вносят в историю болезни, делают соответствующую отметку на титульном листе за подписью врача, проводившего исследование, с указанием даты исследования.

Ошибки при определении групповой принадлежности крови возможны в ситуациях, когда при фактическом наличии агглютинации она не выявляется или, наоборот, выявляется агглютинация при её фактическом отсутствии. Невыявленная агглютинация может быть обусловлена: 1) слабой активностью стандартной сыворотки или низкой агглютинабельностью эритроцитов; 2) избыточным количеством исследуемой крови, добавляемой к стандартной сыворотке; 3) замедленной реакцией агглютинации при высокой температуре окружающей среды.

Чтобы избежать ошибок, необходимо использовать активные, с достаточно высоким титром сыворотки при соотношении объёма исследуемой крови и стандартной сыворотки 1:5, 1:10. Исследование проводят при температуре не выше 25 ° С, оценивать результаты следует не ранее чем через 5 мин от начала исследования.

Выявление агглютинации при её фактическом отсутствии может быть обусловлено подсыханием капли сыворотки и образованием «монетных» столбиков эритроцитов или проявлением холодовой агглютинации, если исследование проводят при температуре окружающей среды ниже 15 ° С. Добавление капли изотонического раствора хлорида натрия к исследуемой крови и сыворотке и проведение исследований при температуре выше 15 ° С позволяют избежать указанных ошибок. Ошибки в определении группы крови всегда связаны с нарушением методики исследования, поэтому необходимо тщательное соблюдение всех правил исследования.

Во всех сомнительных случаях необходимо повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий или с помощью стандартных эритроцитов.

Определение группы крови по системе АВ0 с помощью моноклональных антител анти-А и анти-В (цоликлоны анти-А и анти-В )

Цоликлоны анти-А и анти-В применяют для определения группы крови человека по системе АВ0 вместо стандартных изогемагглютинирующих сывороток путём выявления антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами, содержащимися в цоликлонах.

Моноклональные антитела анти-А и анти-В продуцируются двумя различными гибридомами, полученными в результате слияния мышечных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Названные цоликлоны представляют собой разведённую асцитическую жидкость мышей-носителей гибридомы, содержащую IgM против антигенов А и В. Цоликлоны дают более быструю и более выраженную реакцию агглютинации, чем стандартные АВ0-сыворотки.

Определяют группу крови при температуре от 15 до 25 °С. На фарфоровую пластину или маркированную тарелку наносят по одной большой капле цоликлонов анти-А и анти-В, рядом наносят каплю исследуемой крови в 10 раз меньшего размера и смешивают отдельными палочками или уголками предметных стекол. Пластинку слегка покачивают и наблюдают за реакцией в течение 2,5 мин. Реакция обычно наступает в первые 3-5 с и проявляется образованием мелких красных агрегатов, а затем хлопьев. Возможны следующие варианты реакции агглютинации.

1. Агглютинация отсутствует с цоликлонами анти-А и анти-В, кровь не содержит агглютиногенов А и В — исследуемая кровь группы I (0) (рис. 38, см. цв. вкл.).

2. Агглютинация наблюдается с цоликлонами анти-А, эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген А — исследуемая кровь группы II(А).

3. Агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-В, эритроциты исследуемой крови содержат агглютиноген В — исследуемая кровь группы III (В).

4. Агглютинация наблюдается с цоликлонами анти-А и анти-В, эритроциты содержат агглютиногены А и В — исследуемая кровь группы IV(АВ) (табл. 2).

Таблица 2.

Реакция агглютинации исследуемых эритроцитов с цоликлонами анти-А и анти-В

При наличии реакции агглютинации с цоликлонами анти-А и анти- В [группа крови IV(АВ)] для исключения неспецифической агглютинации производят дополнительное контрольное исследование с изотоническим раствором хлорида натрия. Большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора смешивают с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. Отсутствие агглютинации подтверждает принадлежность исследуемой крови к IV(АВ) группе. При наличии агглютинации проводят определение группы крови с использованием отмытых стандартных эритроцитов.

Цоликлоны анти-А и анти-В выпускаются в жидком виде в ампулах или флаконах, жидкость окрашена в красный (анти-А) и синий (анти- В) цвета. Хранят в холодильнике при температуре 2-8 °С. Срок хранения 2 года.

Определение группы крови цоликлонами: алгоритм :: SYL.ru

Все в организме человека обусловлено выработкой различных веществ. Не исключением является и группа крови, тип которой зависит от антигенного состава эритроцитов.

Современная медицина быстро развивается, и определение группы крови уже давно не в новинку. Существует множество методов ее определения. Одним из наиболее широко распространенных является определение группы крови цоликлонами.

Что это такое?

Цоликлоном называют специальное антитело, реагирующее с антигенами, расположенными на поверхности мембран эритроцитов. Для их получения используют методы генной инженерии – вначале получают специальные бактерии, которые вводят в организм мышей. После иммунизации организма мыши получают ее асцитную жидкость, из которой впоследствии и выделяют необходимые антитела.

Они представляют собой иммуноглобулины класса М.

Благодаря особой технологии изготовления, цоликлоны безопасны для человека в эпидемиологическом плане.

Вещество выпускается в виде водно-солевого раствора, который добавляют к имеющимся образцам крови. Для каждой группы антигенов имеется собственный раствор цоликлона – анти-А цоликлон имеет розовую окраску, анти-В – голубую, а цоликлон анти-D бесцветен.

Свое название препараты получили от названия места, где они были созданы – Центральный ордена Ленина институт переливания крови в Москве.

Методика определения

Определение группы крови цоликлонами может проводиться в нативной крови с добавлением консерванта или без него, а также при исследовании капиллярной крови, взятой из пальца. Непосредственно определение группы проводится на специальной пластине или планшете.

В первую очередь, на планшет наносится капля раствора цоликлона под соответствующей пометкой. Рядом с раствором цоликлона наносится капля исследуемой крови, и они смешиваются между собой. Определение группы крови цоликлонами проводится при равномерном покачивании пластины из стороны в сторону. Визуально, наблюдается агглютинация эритроцитов (слипание их между собой). Если результат отрицательный, агглютинации не происходит.

Процедура обязательно проводится при соблюдении определенного температурного режима – от 15 до 25 градусов тепла при нормальной освещенности. Перед проведением процедуры следует убедиться, что срок годности цоликлонов не истек.

В некоторых учреждениях с целью контроля за препаратами обязательно следует зафиксировать время открытия средства и срок его годности. Рекомендуется документально отразить срок годности реагента, если проводится определение группы крови цоликлонами. Фото используемых флаконов делают редко, однако подобная фиксация также возможна.

Интерпретация результатов

После проведения теста уже можно узнать, какая же группа крови у пациента.

Каковы же результаты исследования, если проводилось определение группы крови цоликлонами? Таблица сопоставления цоликлона и группы крови позволяет разобраться в полученных результатах.

цоликлон	1. I(Rh+)	2. I(Rh-)	3. II(Rh+)	4. II(Rh-)	5. III(Rh+)	6. III(Rh-)	7. IV(Rh+)	8. IV(Rh-)
Анти-А			+	+			+	+
Анти-В					+	+	+	+
Анти-D	+		+		+		+

Как видно из таблицы, если агглютинация произошла в ячейке пластины под номером 3 или 4, значит, кровь второй группы (агглютинация осуществилась за счет взаимодействия антигена А, расположенного на мембране эритроцита, и специального антитела, присутствующего в растворе анти-А-цоликлона). Соответственно, если агглютинация наблюдается в ячейке номер 5 или 6, то и группа крови – третья. Если агглютинации не произошло ни в одном указанном секторе, значит, исследуемая кровь не имеет антигенов, на что напрашивается вывод, что группа крови – первая.

Возможно, что агглютинация происходит во всех лунках. Обычно, это говорит о некачественном препарате либо нарушении правил проведения исследования.

Для чего проводится определение группы крови цоликлонами?

В настоящее время цоликлоны используются преимущественно для определения группы крови и резус-фактора. Исследование может проводиться как планово, по назначению участкового врача-терапевта, так и по экстренным показаниям, когда требуется переливание крови (в ходе операции произошла массивная кровопотеря или пациент был доставлен с обширной травмой и массивным кровотечением).

В поликлинике определение группы проводится преимущественно за счет использования сывороток. Группа крови по цоликлонам определяется чаще всего в стационаре или специализированных лабораториях.

К использованию цоликлонов прибегают, обычно, при невозможности использования сывороток.

Скорость получения результатов несколько быстрее, чем при исследовании стандартными сыворотками, что делает методику более универсальной. Многие лаборатории стремятся перейти на использование данного метода.

Препараты цоликлонов

Какие же есть разновидности цоликлональных препаратов?

Выделяют эритротест-цоликлон анти-D (есть три разновидности – супер, вызывающая прямую агглютинацию, просто анти-D-цоликлон, при добавлении которого развивается непрямая агглютинация, и анти-D-микс препарат, имеющий в своем составе компоненты первых двух). Они позволяют не только определить группу крови цоликлонами, но и выявить резус-принадлежность.

Другие растворы отличаются сугубо по названию, так как входящие в них антитела – иммуноглобулины классов М и G позволяют только типировать кровь по стандартным, АВ0, антигенам. Различие между ними заключается только в механизме слипания эритроцитов (прямая или непрямая агглютинация).

Каждый из данных препаратов имеет срок годности и особенности использования. Однако наибольшее распространение в клинической лабораторной диагностике получили только три препарата, указанные выше (анти-А, анти –В, анти-D).

Неправильная трактовка результатов

Иногда возможно получение ложных, недостоверных результатов. Например, агглютинация произошла во всех ячейках планшетки или при добавлении крови к препарату, например, изменился их цвет.

Чтобы предотвратить подобные результаты, если проводится определение группы крови цоликлонами, алгоритм процедуры предусматривает некоторые правила. В первую очередь следует обратить внимание на срок годности цоликлонов. Реагенты с истекшим сроком обращения использовать недопустимо.

Обязательно следует соблюдать и условия проведения процедуры. В помещении должно быть оборудовано рабочее место с достаточным освещением и температурным режимом. Если в инструкции к препарату описана и необходимая влажность в помещении, необходимо учитывать и ее.

Немаловажным является и чистота рабочей планшетки, загрязнение которой часто приводит к ошибкам в исследовании и получению неправильных результатов.

Где можно провести исследование?

Определение группы крови цоликлонами получает все большее распространение. Если раньше данная процедура проводилась только в специализированных стационарах (например, сугубо в отделениях хирургии и гематологии), то сейчас данная процедура доступна практически в любой оборудованной лаборатории.

Данная методика начинает распространяться и в поликлинической сети для экспресс-определения группы крови и скорейшего выставления диагноза пациенту.

Многие центры частной медицины и косметологии предлагают проведение данной услуги на платной основе. Бесплатно процедура, как уже было сказано, проводится при наличии направления терапевта.

Если нет возможности обратиться в поликлинику, то как определить группу крови по цоликлонам? При наличии дома специальной планшетки и набора препаратов, исследование можно проводить и самостоятельно, помня, однако, о необходимости соблюдения условий процедуры и особенно – стерильности.

Гемотрансфузии. Как переливать кровь?

Основными методами переливания крови в практической медицине являются:
1. Прямое переливание крови непосредственно от донора к реципиенту
2. Непрямое переливание: донорская кровь консервируется и может храниться некоторое время до переливания

3. Обменное-заменное переливание. При нём из кровеносного русла удаляется гемолизированная, или содержащая яды кровь и вместо неё вводится донорская
4. Аутогемотрансфузия — переливание собственной, заранее заготовленной крови больному для обеспечения плановых операций

Составление наборов и определение групповой принадлежности и резус-фактора крови

Определение группы крови сo стандартными сыворотками
Проводится под руководством врача.
1. Приготовить: тарелки, пипетки, стеклянные палочки, флакон с кровью, шарики, спирт, сыворотки 2 серий.
2. Надеть стерильную одежду.
3. Нанести отдельными пипетками стандартные сыворотки по l-й капле в ячейки специальной тарелки по 2 серии (1, 2, 3 группы).
4. Нанести стеклянной палочкой мазок крови каждой капли сыворотки.
5. Смешать отдельными стеклянными палочками.
6. Добавить в каждую серию по 1 капле физиологического раствора.
7. Наблюдать за реакцией в течение 5 мин.
8. Поставить реакцию с IV группой, если во всех 6 ячейках тарелки произошла реакция агглютинация, для подтверждения результата

Определение группы крови с применением цоликлонов

1. Обработать ампулы с цоликлонами и ампулы с растворителем спиртом.
2. Вскрыть ампулы с цоликлонами анти-А и анти-В и 2 ампулы растворителя
3. Перенести растворитель отдельными пипетками в ампулы с цоликлонами.
4. Встряхнуть несколько раз, закрыть ампулы (полученные реагенты можно хранить до 3 месяцев).
5. Нанести одну большую кашпо цоликлона анти-А и анти-В на чашку.
6. Нанести по одной маленькой капле крови рядом с каплей цоликлона (В 10 раз меньше).
7. Смешать кровь с раствором цоликлона отдельными стеклянными палочками.
8. Наблюдать в течение 2,5 мин и оценить реакцию по следующей схеме:

Определение группы крови с использованием цоликлонов

При наличии агглютинации она может остаться незамеченной:

• вследствие высокой температуры окружающей среды (28 0С и выше) — реакция начинается поздно или слабо выражена
• в случае неверного соотношения объемов сыворотки и крови; капля сыворотки должна быть в
• 8 раз больше капли крови
• при наличии в эритроцитах слабого агглютиногена
• при истечении срока годности сывороток или неправильном их хранении

Агглютинация ошибочно устанавливается при фактическом ее отсутствии:

• эритроциты склеиваются в «монетные столбики». Необходимо добавить в кровь физиологический раствор и смешать
• при низкой температуре окружающей среды (ниже 12°С) — появляются зерна из эритроцитов, напоминащие агютинащию
• при способности эритроцитов давать агглютинации со всеми стандартными сыворотками
• при долгом стоянии на воздухе смесь начинает подсыхать, появляется зернистость, похожая на агглютинацию
• при нечеткой маркировке на флаконах и ампулах, в сомнительных случаях необходимо провести повторную реакцию с гемаглютинирующей сывороткой другой серии

Определение резус-фактора по стандартной сыворотке-антирезус

• приготовить: пипетки, пробирки, физиологический раствор
• внести пипеткой 2 капли сыворотки в конусную пробирку
• добавить пипеткой 1 каплю крови
• встряхнуть пробирку
• добавить в пробирку 2 капли физиологического раствора
• встряхнуть пробирку или вращать между ладонями в течение 5 мин
• посмотреть на стенки пробирки и оценить результат. Если есть реакция, то у пациента резусположительный фактор

Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови

Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови.
Показание: определение годности крови к переливанию.
Оснащение: флакон или контейнер с кровью.
Алгоритм действий:
1. Оценить герметичность упаковки: упаковка должна быть абсолютно целостной: никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличии кровь непригодна для переливания.
2. Оценить правильность паспортизации:

• наличие этикетки с номером
• даты заготовки
• обозначения группы крови и резус принадлежности
• наименование консерванта
• фамилии и инициалов донора
• наименование учреждения-заготовителя
• подпись врача
• штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит

3. Обратить внимание на срок годности крови, сопоставить его с датой переливания.
4. Оценить визуально кровь во флаконе: кровь должна быть разделена на три слоя — внизу — красные эритроциты, выше — узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней жёлтая прозрачная плазма). Плазма должна быть прозрачной: хлопья, пленки, сгустки в плазме свидетельствуют о ее инфицированности и непригодности к переливанию, а розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию.

Примечание. Плазма может быть непрозрачной в случае так называемой хиллёзной крови, т. е. крови, содержащей большое количество нейтральных жиров. При нагревании хиллёзной крови до 37 градусов Цельсия, плазма становится прозрачной, если же кровь инфицирована — остается мутной.

Проведение проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента. Постановка пробы на индивидуальность, совместимость

По группе крови:

• взять у пациента кровь — до 5 мл в пробирку
• отцентрифугировать пробирку с кровью для получения сыворотки
• нанести пипеткой на тарелку 1 каплю сыворотки пациента и мазок крови донора
• смешать стеклянной палочкой сыворотку и кровь
• добавить 1 каплю физиологического раствора;
• наблюдать за реакцией в течение 5 минут
• если нет агглютинации, то гемотрансфузию проводить можно

По резус-фактору на водяной бане:

• взять у больного кровь — до 5 мл в пробирку
• отцевтрифугировать пробирку с кровью больного для получения сыворотки
• нанести пипеткой на чашку Петри 1 каплю сыворотки больного и мазок крови донора
• смешать стеклянной палочкой сыворотку с кровью
• добавить 1 каплю физиологического раствора
• поставить чашку Петри на водяную баню (температура 500 градусов Цельсия)
• ждать результат в течение 10 минут
• если агглютинация отсутствует, можно проводить гемотрансфузию

По резус-фактору с использованuем 33% раствора полиглюкина:

• на дно пробирки внести 2 капли сыворотки больного, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33%-ного полиглюкина
• встряхнуть пробирку
• пробирку наклонить почти горизонтально и медленно поворачивают вокруг оси в течение 5 мин
• долить в пробирку 3-4 мл изотонического раствора хлорида натрия
• перемешать, переворачивая пробирку (не взбалтывать!) 2-3 раза
• просмотреть на свет и оценить результат

Если есть реакция агглютинации на фоне просветленной жидкости, то кровь совмещать нельзя! Если содержимое проб ирки равномерно окрашено, то кровь донора совместима с кровью
реципиента.

Постановка биологической пробы

Биологическая проба проводится всем без исключения больным, даже находящимся под
наркозом, при переливании крови и кровезаменителей. Исключение составляет переливние тромбоцитарной массы.
1. Перелить струй но 10-15 мл крови или кровезаменителей внугривенно.
2. Закрыть систему на 3 мин.
3. Оценить состояние пациента.
4. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно.
5. Закрыть систему на З мин.
6. Оценить состояние пациента.
7. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно.
8. Оценить состояние пациента.
Примечание. При появлении болей в животе, в груди, пояснице, рвоты, головной боли, одышки, тахикардии, сыпи на коже кровь или кровезаменители вводить нельзя!

Оказание первой помощи при осложнении во время проведения биологической пробы

1. Срочно прекратить введение крови или кровезаменителей, пережав систему
2. Снять флакон и систему, иглу оставить в вене
3. Сообщить врачу
4. Подключить иглу к другой системе, с солевым раствором
5. Наблюдать состояние пациента в течение 2 ч после стабилизации

Подготовка пациента к гемотрансфузии

1. Определить группу крови пациента и донора.
2. Определить резус-принадлежность пациента и донора.
3. Взять кровь на общий анализ крови.
4. Взять мочу на общий анализ мочи.
5. Проверить годность крови во флаконе.
6. Не есть за 2 часа до гемотрансфузии.
7. Опорожнить мочевой пузырь перед перели.ванием крови.
8. Подсчитать пульс, измерить артериальное давление и температуру тела.
9. Поставить приборы на индивидуальную совместимость по группе крови и по резус-фактору.
10. Поставить биологическую пробу.

Вам может быть интересно

алгоритм действий, резус фактора, как определить

Веками ученые пытались узнать о человеческом организме как можно больше и научиться исцелять больных от любой болезни. Одним из важных параметров является определение группы крови цоликлонами. Медицина выделяет у людей всего четыре группы крови не зависимо от половой или расовой принадлежности. Иммунологические признаки, которые и составляют основное различие по группе эритроцитарных антигенов, передаются по наследству.

Что такое цоликлон

Определение группы крови с помощью различных лабораторных реагентов стандартный метод исследований. Информация группе крови крайне важна, особенно в тех случаях, когда человеку нужна экстренная помощь. Перед хирургическим вмешательством обязательно определяется тип индивидуальных антигенных характеристик человека. Та же процедура является обязательно для военнослужащих (информация указывается на форме), для женщин перед родами и т.д.

Определение групп крови цоликлонами сравнительно новый метод исследования. Этот анализ может проводиться на любом этапе стационарного лечения пациентов.

Для осуществления лабораторного исследования не требуется много времени, достаточно наличие всех необходимых химических веществ (цоликлонов) и простого оборудования.

Цоликлоны по сути являются одним из видов иммуноглобулинов (тип М). Это моноклональные антитела, которые были образованы с помощью генной инженерии. Цоликлоны получены в результате воздействия сыворотки на стерильных лабораторных мышей. Образовывается скопление жидкости в брюшной полости грызуна, которая содержит эти антитела.

Подготовка к процедуре

Определение групп крови с помощью цоликлонов требует предварительной подготовки и действий согласно установленному алгоритму. Обстановка в помещении, в котором проводится анализ оговорена отдельно. Температура воздуха должна быть не ниже 15 и не выше 25 градусов, иначе результат исследования не может считаться достоверным. В помещении не должно быть пыли, животных, насекомых и других факторов, которые могут физически повлиять на процесс проведения исследования. Также проведение лабораторного анализа требует хорошей освещенности помещения.

При использовании цоликлонов важно держать флаконы плотно зарытыми и не допускать пересыхания реагентов, иначе способность антител к активным действиям заметно снижается. Перед процедурой подготавливается весь необходимый инвентарь. Для проведения анализа потребуется пробирка для биологического образца, планшет для нанесения реагентов, стерильные пипетки и палочки для взаимодействия с биологическими образцами.

Если лаборант проводит не только лабораторное исследование, но и забор крови, то необходимо подготовить одноразовые шприцы или вакуумные пробирки, жгут, медицинский спирт, ватные шарики и стерильные салфетки. Также под рукой должны быть инструменты для маркировки биообразов пациентов.

Проведения анализа

В современной лабораторной диагностике используется три вида стандартных цоликлонов для определения группы крови и резус фактора. Реагент типа «Анти-А» окрашен в красный цвет, также окрашен и флакон, колпачок или этикетка флакона». Тип «Анти-В» окрашивается синим, а «Анти АВ» не помечается цветным маркером. Производители реагентов выпускают упаковки с цоликлонами 5 или 10 мл. Не допускается использование испорченных или некачественных реагентов.

При наличии видимых дефектов упаковки или появлении хлопьев в жидкости, цоликлон не используют.

• Для определения группы крови на специально подготовленную пластину, которая оформлена как таблица, наносят цоликлоны различных типов (А, В и АВ). Каждый из них должен быть подписан. Реагент наносится на специально отмеченную область. Каждый тип цоликлона должен наноситься отдельной стерильной пипеткой.
• Рядом с реагентами помещается по 1 капле крови пациента.
• Стерильной палочкой реагенты смешивают с биологическим образцом.
• Уже спустя несколько секунд можно заметить изменения и происходящую реакцию агглютинации. По правилам наблюдение следует вести в течение 3 минут. После этого можно сделать вывод о результатах исследования.

Как понять результат

• Отсутствие какой-либо реакции склеивания во всех образцах означает, что в клетках эритроцитов пациента нет агглютиногена исследуемого типа. Образец крови причисляется к I группе (тип 0).
• Если эритроцитарные клетки пациента вступили в реакцию с реагентами типа «Анти-а» и «Анти-АВ», то у пациента II группа крови (тип А).
• Заметная агглютинация образца исследуемой крови с цоликлонами тип «Анти-АВ» и «Анти-В» означает, что пациент обладает III группой крови (тип В).
• Если кровь пациента вступила в реакцию со всеми химичсекими реагентами, то исследуемый образец принадлежит к IV группе (тип АВ). При определении группы крови с помощью цоликлонов дополнительной проверки не требуется, так как реагенты не содержат добавок, которые могут спровоцировать спонтанную реакцию.

Определение группы крови и резус фактора проводится в лабораторных учреждениях в медицинских учреждениях. Это достаточно простое исследование, которое дает очень полезную и жизненно важную информацию о человеке.

В будущем информация группы крови и резус фактора позволит быстро оказать помощь и организовать переливание крови после травмы или аварии и может спасти жизнь. Узнать свой номер ГК можно самостоятельно заказав исследование в любой медицинской лаборатории. Полученные данные необходимо внести в карту пациента.

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники