Гемоглобин человека отличается от гемоглобина собаки — Про сосуды
Почти всегда, когда мы обращаемся к врачу с недомоганием, тот рекомендует сдать кровь на гемоглобин. Ведь зачастую именно он влияет на наше общее самочувствие.
Гемостазиолог, ведущий специалист Международной клиники гемостаза, доктор медицинских наук Седа Баймурадова говорит, что при колебаниях вверх или вниз уровень гемоглобина надо обязательно корректировать:
– Гемоглобин – это комплекс белка и железа в крови, который содержится внутри эритроцитов и выполняет в организме важнейшую функцию – обеспечивает его ткани и органы кислородом. Некоторые заболевания напрямую связаны с недостатком или переизбытком гемоглобина. Поэтому очень важно вовремя обнаружить этот сбой и принять меры.
Нормы гемоглобина в крови:
- для женщин 18–65 лет – от 120 до 140 г/литр
- для мужчин 18–65 лет – от 130 до 150 г/литр
Седа Баймурадова
Низкий гемоглобин
В большинстве случаев он связан с дефицитом в организме железа или витаминов группы В.
Причины:
• Неправильное питание или соблюдение жестких диет. Если, к примеру, полностью исключить из рациона мясо (основной источник гемового железа), гемоглобин понизится наверняка.
• Недостаточная физическая активность.
• Кровопотеря при операциях, травмах, обильных месячных.
• Хронические заболевания желудочно-кишечного тракта: колит, гастрит, язва.
• Беременность. У женщин, вынашивающих ребенка, потребность организма в железе возрастает, и если его не пополнять, то гемоглобин падает.
Симптомы:
• Слабость, постоянная усталость, шум в ушах, иногда даже обморочное состояние.
• Кожа бледнее обычного.
• Одышка при небольшой физической нагрузке.
• Бессонница.
• Нарушение менструального цикла.
• Снижение аппетита и изменение вкусовых рецепторов.
• Появление заед в уголках рта.
Чем опасен:
Анемией чаще всего страдают молодые женщины, беременные, дети и пожилые люди. Низкий гемоглобин опасен тем, что может развиваться в сочетании с серьезными заболеваниями, к которым относятся воспаления, инфекции, опухоли.
Что делать:
1. В первую очередь обратите внимание на рацион питания. Суточная потребность в железе для взрослых – 10–20 мг, для детей (в зависимости от возраста) – 4–18 мг. Обязательно ешьте красное мясо (говядина, свинина, баранина), субпродукты (печень, почки, кровяная колбаса), рыбу. В них содержится гемовое железо, которое организмом усваивается полностью. В продуктах растительного происхождения (бобовые и зерновые культуры, хлеб, овощи, фрукты, зелень), яйцах тоже много железа, но оно усваивается лишь частично. Если у вас недостаток витамина В12 и фолиевой кислоты, то нужно налегать на молочные и морепродукты, а также мясо и бобовые.
2. Параллельно с диетой необходимо принимать железосодержащие препараты или витамины группы В. При железодефицитной анемии довольно быстро дает эффект сорбифер дурулес в комплексе с аскорбиновой кислотой.
3. Не занимайтесь самолечением, а обратитесь к терапевту, который проведет необходимое обследование, выпишет направление на анализы и поможет разобраться в причинах проблемы. Именно врач должен назначить вам препараты, и чем быстрее вы начнете их принимать, тем лучше. Потому что организм восполняет запасы железа долго – если это дело запустить, может потребоваться от 3 до 6 месяцев.
Высокий гемоглобин
Причины:
• Заболевания легких, сердца, почек, сосудов.
• Чрезмерные физические нагрузки – у спортсменов зачастую повышенный гемоглобин.
• Курение.
Симптомы:
• Сильная утомляемость, вялость, упадок сил.
• Повышение артериального давления.
• Покраснение кожи или зуд после водных процедур.
• Головные боли и головокружение.
Но внешние проявления недомогания могут отсутствовать!
Чем опасен:
С повышением уровня гемоглобина увеличивается количество эритроцитов, кровь становится более вязкой, густой. Ее циркуляция замедляется, сердце и внутренние органы недополучают кислород, что может привести к развитию инфаркта, инсульта, тромбоза. С особым вниманием надо следить за «поведением» гемоглобина, если есть проблемы с сосудами или сахарный диабет.
Что делать:
1. Если у вас гемоглобин выше нормы, специалист (терапевт, гематолог, флеболог) должен сделать гемостазиограмму и УЗИ сосудов конечностей. Только тщательно изучив свойства крови и состояние сосудов, врач может назначать активные препараты, разжижающие кровь – антикоагулянты и дезагреганты.
2. Постарайтесь ограничить в своем рационе жареную и жирную пищу, газировку, сладости.
3. Воздержитесь от курения и алкоголя.
Не забывайте, что многие болезни передаются по наследству. Если у ваших родственников возникали проблемы со снижением или повышением уровня гемоглобина, были тромбозы, инфаркты, инсульты, вам надо внимательнее следить за «поведением» гемоглобина – делать анализ крови хотя бы раз в полгода.
Источник: sobesednik.ru
ps://paste.ee/p/gPF7W http://textsnip.com/my/osxfqzparsjydyiuf-nufilm.live http://notes.io/8jis http://writeskills.ning.com/profiles/blogs/myyughplxfoaqlckw-nufilm-live https://www.1upfun.com/post/779631/fsbcsekehstrpkikc-nufilm-live https://pasteio.com/xS2NjOSA5zh7 https://ideone.com/h9PdCS http://notes.io/8hYv https://paste.ee/p/svc6a http://hiphopmulher.ning.com/profiles/blogs/jxkgliqokslcsfitd-nufilm-live https://bpaste.net/show/22ALE https://pasteio.com/xh0g1IYoiyHP https://authors.curseforge.com/paste/538fee1c http://www.jkgwc.com/blog/nufilmlive/jaaguzwcyoltgmsph-nufilmlive http://hiphopmulher.ning.com/profiles/blogs/qnnpiwkewulfgiqhq-nufilm-live http://notes.io/8jsw http://www.kweeper.com/moviespro123/image/6488768 https://vidodoo.com/article_read.php?a=111549 https://paste.firnsy.com/paste/Fhsy1k3qHer/raw http://facebookhitlist.com/profiles/blogs/hquhztzftlucfxzpj-nufilm-live https://paste2.org/Bm2ns5GJ https://paste.firnsy.com/paste/Qf8LGE8qs1P/raw http://paste.
ircnet.su/v.cnet.su/view/a5c1fca7 https://paste.ee/p/ngVw9 https://paste.co.id/cXReCvvRHY https://0paste.com/44753.txt https://rift.curseforge.com/paste/3ee2adf2 https://blog.goo.ne.jp/movie-upcoming-tv/e/8b2f152365212b253665a790517c5814 http://www.kweeper.com/moviespro123/image/6487637 https://bpaste.net/show/XASIA https://rift.curseforge.com/paste/bd730aac https://vidodoo.com/article_read.php?a=111865 http://thehiphophub.ning.com/profiles/blogs/booxomtzsncglpbsq-nufilm-live http://cityads.kukooo.com/free-ad/tifdkcpyhaynnqgxc-nufilm-live/ http://facebookhitlist.com/profiles/blogs/tmfkpxlqhaypdbejb-nufilm-live http://www.mpaste.com/p/aDO8 http://recampus.ning.com/profiles/blogs/xxlggbjfohnkkckqs-nufilm-live http://recampus.ning.com/profiles/blogs/xssbulqoeqyczkupp-nufilm-live http://hiphopmulher.ning.com/profiles/blogs/agqdsxlgyumqrwstf-nufilm-live http://notes.io/8j6G http://textsnip.com/my/tjjwagazucfbueeau-nufilm.live http://notes.io/8jsf https://www.wowace.com/paste/48b85a51 https://bpaste.
/nhpqwppjakudeikol-nufilm-live https://authors.curseforge.com/paste/31b8d078 http://facebookhitlist.com/profiles/blogs/znunaaycrzfisgdbh-nufilm-live http://hiphopmulher.ning.com/profiles/blogs/zytbkxshysiwddrnr-nufilm-live http://thehiphophub.ning.com/profiles/blogs/wqznesbalxuigrogy-nufilm-live http://www.kweeper.com/moviespro123/image/6487950 https://www.peeranswer.com/question/5df3b2db1abdb56364d704bb https://www.wowace.com/paste/3dcabe03 http://notes.io/8jiu https://paste.ee/p/PEvwB https://bpaste.net/show/4U4GS https://pastelink.net/ykogmnuebdkttgxhinufilmlive http://www.kweeper.com/moviespro123/image/6488757 https://rift.curseforge.com/paste/ce031036 https://paste.ee/p/7xtQU http://thehiphophub.ning.com/profiles/blogs/brxgccfoeymqaajqw-nufilm-live https://vidodoo.com/article_read.php?a=111543 https://pasteio.com/xhmq0jF1JQBu https://bpaste.net/show/5ZYYM https://bpaste.net/show/N6PTI http://www.mpaste.com/p/sOe https://paste.firnsy.com/paste/3FTqS0E6cl0/raw http://www.
Источник: znanija.com
Что такое гемоглобин и какую роль он выполняет в крови
Дыхание — это естественный автоматический процесс, поэтому редко кто без причины задумывается о сложных механизмах, которые ему сопутствуют. А если причины есть, то приходится разбираться. Гемоглобин образуется в красных кровяных тельцах крови, или по-другому эритроцитах, на ранней стадии их развития. Каждый вдох насыщает эти мельчайшие клетки нашей крови кислородом. Но эритроциты в процессе дыхания выполняют всего лишь роль «транспорта» для гемоглобина. Именно он способен соединиться с молекулами кислорода и «передать» их нуждающимся тканям, а также забрать из точки назначения (ткани) углекислый газ и проследовать по обратному маршруту в легкие.
Стоит отметить, что любые отклонения от нормы показателей гемоглобина в крови — это не причина заболеваний, а их следствие. А поводов для нарушений существует множество: от неправильного питания до серьезных болезней. Последствием в частности является анемия (низкий уровень гемоглобина). Для того чтобы узнать, каковы показатели гемоглобина в крови у конкретного человека, назначают простейшие анализы.
Диагностика уровня гемоглобина в крови
Общий анализ крови — это один из самых распространенных видов диагностики множества заболеваний. Помимо прочего, в него входит определение уровня гемоглобина. Такая популярность обусловлена высокой степенью информативности и простотой самой процедуры. Для того чтобы сдать кровь необходима лишь минимальная подготовка пациента — перед анализом нельзя употреблять пищу в течение 8–12 часов. Именно поэтому его часто назначают на утро. Результат пациент может получить уже на следующий день, а в некоторых диагностических компаниях можно заказать экспресс-исследование за несколько часов.
После проведения анализа пациент получает на руки бланк с основными показателями крови. Уровень гемоглобина часто указан в первой или второй строчке, единицами измерения являются граммы на литр (г/л) или граммы на децилитр (г/дл). Несомненно, постановкой диагноза на основе полученных данных должен заниматься врач. К тому же для выявления болезни одного анализа крови недостаточно.
Норма содержания гемоглобина в крови
Показатели гемоглобина нельзя назвать индивидуальными, тем не менее определенные различия в нормах существуют. Они зависят от пола, возраста и физиологических состояний. Последнее характерно для женщин — во время беременности нормальные показатели гемоглобина меняются. В среднем речь идет о цифрах в 110–160 г/л.
Наиболее распространенным типом отклонения уровня гемоглобина является снижение количества этого белка в крови. Повышенные значения — это скорее редкость, возникающая на фоне влияния определенных внешних факторов или серьезных, но редко встречающихся заболеваний.
Причины повышенного гемоглобина в крови
Увеличение количества этого белка может быть связно с некоторыми естественными причинами, например с длительными физическими нагрузками, стрессом, приемом специфических лекарств или проживанием в высокогорных районах. Курильщики со стажем также могут обнаружить в анализе крови высокие значения гемоглобина, впрочем, как и жители мегаполисов с загрязненным воздухом. Патологическое увеличение показателей может быть связано со следующими заболеваниями[1]:
- хроническая сердечная и дыхательная недостаточность;
- поликистоз почек;
- эритремия;
- обезвоживание.
Повышение гемоглобина не связано с какими-либо характерными симптомами. В основном они свидетельствуют о болезнях, следствием которых и стало увеличение количества этого компонента в крови.
Причины пониженного гемоглобина в крови
Научное название данного состояния — анемия. Не стоит считать его болезнью, это всего лишь синдром, то есть группа симптомов, вызванных различными патологиями. Но неспецифические признаки снижения гемоглобина в крови выделить можно. В первую очередь они связаны с кислородным голоданием тканей. К основным признакам анемии относят:
- бледные кожные покровы и слизистые;
- слабость и повышенную утомляемость;
- головные боли и головокружение;
- одышку;
- нарушения сна.
Существует несколько причин для развития анемии:
- Дефицит витаминов или микроэлементов, в частности железа, — железодефицитная анемия. Она может быть следствием несбалансированного питания, повышенной потребности в железе, нарушений в работе ЖКТ, хронических кровопотерь или скрытых кровотечений.
- Нарушения, связанные с работой кроветворных органов, — дисгемопоэтическая анемия. Возникает вследствие врожденных патологий, влияния неблагоприятных факторов окружающей среды (радиация, промышленные яды), травм, воздействия инфекций, генетических причин и серьезной нехватки питательных веществ.
- Постгеморрагическая анемия возникает вследствие серьезных кровопотерь.
- Чрезмерно быстрое разрушение эритроцитов — гемолитическая анемия.
Лечение заболеваний, связанных с серьезными нарушениями работы кроветворных органов, а также наследственных или хронических патологий, вызывающих дефицит эритроцитов в крови, — это работа для опытного врача. Но забота о собственном здоровье, призванная не допустить дефицита железа в организме, ложится на плечи любого здравомыслящего человека.
Профилактика
Прежде всего — контроль. Всем известно, что заболевания на ранней стадии гораздо легче поддаются лечению. Поэтому необходимо регулярно сдавать анализ крови (хотя бы 1 раз в год) — так вы сможете заметить первые признаки нарушения баланса гемоглобина.
Также следует отказаться от курения. Вдыхая табачный дым, человек провоцирует связывание гемоглобина с угарным газом, а это значительно снижает способность белка переносить кислород к клеткам.
Полноценное питание помогает сохранять хорошее самочувствие и предотвращать появление болезней, ведь от баланса поступающих в кровь витаминов зависит качество функционирования органов. Для того чтобы избежать развития анемии, следует регулярно есть продукты с высоким содержанием белка (такие как яйца, сыр, творог, рыба, говядина). Крупы, богатые железом, также рекомендованы к употреблению, например, пшено, овсянка, гречка. И, конечно же, фрукты — предупредить железодефицитную анемию помогают яблоки, абрикосы, хурма и другие. Улучшить усвоение железа в организме позволит прием витаминов — C, B12, B9, B6.
Нельзя допускать развития заболеваний ЖКТ, ведь они могут спровоцировать регулярные кровотечения, снижающие уровень гемоглобина в крови. Также патологии кишечника приводят к нарушению всасывания витаминов и микроэлементов, необходимых для поддержания правильной работы кроветворных органов.
Поддерживать нормальный уровень гемоглобина в крови очень важно для хорошего самочувствия. Возможно, стоит лишь скорректировать рацион, и появятся новые силы, улучшится цвет лица, а головные боли уйдут в прошлое. В любом случае, если вы заподозрили у себя признаки анемии, следует обратиться к врачу и начать лечение.
Источник: www.kp.ru
Отклонения от нормы
У здоровых кошек концентрация гемоглобина в крови составляет 100-140 г/л, у собак – 110-170 г/л, а отклонения в меньшую или большую сторону могут свидетельствовать о каких-либо нарушениях в организме животного. Так, например, увеличение количества гемоглобина в крови наблюдается при обезвоживании вследствие рвоты, диареи, потливости, при образовании жидкостей (транссудат – отёчная жидкость, скапливающаяся в полостях тела; экссудат – жидкость, выделяющаяся в ткани или полости организма из мелких кровеносных сосудов при воспалении). Снижение возникает при анемиях, вследствие кровотечений, в том числе внутренних, ряда инфекционных болезней, истощения, гемолиза эритроцитов, дефицита железа, витаминов В12 и фолиевой кислоты.
Заподозрить изменение уровня гемоглобина в крови животного позволяет наблюдение за питомцем. Об увеличении концентрации свидетельствует потеря аппетита, повышенная утомляемость, вялость и апатия, бледность или покраснение кожных покровов, расстройства в работе ЖКТ. Кровь животного становится темной и густой. Важно, что незначительный рост уровня гемоглобина может быть вызван физиологическими причинами, если при повторном анализе наблюдается норма – причин для беспокойства нет.
В случае понижения уровня гемоглобина у животного может наблюдаться синюшность или бледность слизистых оболочек, слабость и сонливость, учащение пульса и частоты дыхания, озноб и понижение базовой температуры тела (как следствие замедления обменных процессов). В связи с тем, что разрушение эритроцитов происходит по причине нехватки в организме железа, у питомца может отмечаться металлический запах из пасти.
Меньше — хуже
Низкий уровень гемоглобина встречается чаще и вызывает большую озабоченность, так как пониженные показатели указывают на наличие серьезных нарушений в функционировании организма животного. Недостаток гемоглобина при беременности, способен привести к серьёзным неблагоприятным последствиям – плод может недополучить кислород, необходимый для нормального развития головного мозга; возникает риск преждевременных родов.
При проявлении у животного каких-либо симптомов изменения концентрации гемоглобина, необходимо незамедлительно обращаться в ветеринарную клинику для прохождения обследования. Кровь на анализ можно доставить в биохимический отдел ФГБУ «Челябинская МВЛ», подведомственного Россельхознадзору, где опытные специалисты проведут исследования по определению содержания гемоглобина.
На правах рекламы
Источник: chel.aif.ru
Аутоиммунные гемолитические анемии у собак и кошек — Зооинформ
Ж-Л. Пеллерен, К. Фурнель, Л. Шабан
Аутоиммунные гемолитические анемии относятся к наиболее распространенным заболеваниям аутоиммунной природы у собак и кошек. Эта статья предлагает очень подробную информацию в отношении диагностики, прогноза и лечения данной патологии.
Аутоиммунные гемолитические анемии (АГА) — наиболее часто выявляемая разновидность аутоиммунных заболеваний у собак и кошек (Person J.M., Almosni F., Quintin-Colonna F. , Boulouvis H.J., 1988). У собак первичная АГА возникает вследствие аутоиммунного заболевания. Часто обнаруживается и тяжело протекающая вторичная АГА нетравматической природы (Squires R., 1993).
АГА является одним из наиболее характерных классических примеров аутоиммунных заболеваний. Следовательно, в патогенезе АГА принимают участие аутоантитела (Miller G., Firth F.W., Swisher S.N., Young L.E., 1957). У человека идентифицирована специфичность антигенов-мишеней: имеются аутоантитела для антигена группы крови (Person J.M. et al., 1988). АГА у человека была впервые открыта в 1945 году с помощью антиглобулинового теста, получившего название метода Кумбса. Miller G. et al. (1957) впервые сообщили об АГА у собаки.
АГА была также выявлена у мышей, морских свинок, лошадей (Miller G. et al., 1957; Taylor F.G.R., Cooke B.J., 1990), крупного рогатого скота (Dixon P.M. et al. 1978; Fenger C.K., et al., 1992), овец, свиней, собак и кошек (Halliwel R.E.W., 1982).
Определение
Под термином «анемия» подразумевают снижение концентрации гемоглобина в циркулирующей крови ниже 12 г на 100 мл у собак и ниже 8 г на 100 мл у кошек, что сопровождается уменьшением транспорта кислорода.
АГА определяют как приобретенный выраженный гемолиз, связанный с присутствием иммуноглобулинов на поверхности эритроцитов и иногда в сыворотке крови, действие которых направлено по отношению к антигенным детерминантам мембраны эритроцитов больного (приложение 1).
Приложение 1. Анемии
- Анемия — это не заболевание, а лишь синдром, этиология которого должна служить предметом исследований.
- Термин «анемия» означает снижение концентрации циркулирующего в крови гемоглобина. Чаще всего при этом наблюдают уменьшение количества эритроцитов, однако это вовсе не обязательно. Нормальное содержание общего гемоглобина в крови собак колеблется в пределах 12-18 г на 100 мл крови. Мы говорим об анемии, если этот показатель падает ниже 12 г на 100 мл. У кошек порог концентрации гемоглобина в норме ниже — 10 г/100 мл крови.
- Обычно анемии подразделяют на регенеративные и арегенеративные. Это зависит от способности костного мозга поддерживать численность циркулирующих в периферической крови эритроцитов.
- Регенеративная анемия
Регенеративная анемия характеризуется появлением в периферической крови ретикулоцитов, дающих картину полихроматофилии, ассоциирующуюся в мазках с анизоцитозом. Регенеративные анемии, в свою очередь, подразделяются на регенеративные анемии вследствие кровопотери и анемии в результате гемолиза. - Гемолитическая анемия
Гемолитические анемии характеризуются уменьшением продолжительности жизни эритроцитов. О наличии подобной анемии можно судить по продуктам деградации гемоглобина. Гемолиз может быть как внутри-, так и внесосудистым. По происхождению гемолитические анемии могут быть различными. Интракорпускулярные вызваны аномалией по типу интрансек собственно эритроцитов (как правило, имеют наследственный характер). Экстракорпускулярные: инфекционной или паразитарной природы (эрлихиоз собак, гемобартонеллез кошек, бабезиоз), вследствие интоксикации (например, отравление свинцом), нарушения иммунитета, в силу других причин (синдром ДВС — диссеминированной внутрисосудистой коагуляции).
АГА характеризуется двумя основными критериями:
- диагностируется с помощью анализа крови;
- аутоантитела выявляют с помощью прямого метода Кумбса.
Среди гемолитических анемий иммунной природы различают вторичные анемии, развивающиеся после аллогенной иммунизации, вследствие инфекционного процесса или медикаментозной сенсибилизации, а также — собственно АГА, sensu stricto (в строгом смысле слова). Аллоиммунизация очень редко встречается у собак и кошек.
Классификация
АГА классифицируют по иммунологическим и клиническим признакам
Критерии
Клиническая картина, результаты лабораторных исследований, патогенез, прогноз и лечение АГА во многом зависят от типа иммунопатологического процесса.
Иммунологическая классификация АГА основывается на классе антител (IgG или IgM) и их функциях — агглютинирующих или иногда гемолитических.
Классификация АГА включает пять основных классов (табл. 1). Холодовые агглютинины определяются как агглютинирующие антитела, выявляемые при температуре +4°С. Они всегда относятся к классу IgM.
Таблица 1. Классификация АГА (ПМК = прямой метод Кумбса)
Класс | I | II | III | IV | V |
Антитела | аутоагглютинины | гемолизины | неполные антитела | холодовые агглютинины | холодовые гемолизины |
Класс Ас | IgG (IgM) | IgM (IgG) | IgM (IgG) | IgM | IgM (IgG) |
Комплемент | — | C1>C9 | C1>C3b | C1>C3b | C>C9 |
Диагностика | спонтанная агглютинация при 37°С | ПМК при 37°С | ПМК при 37°С | спонтанная агглютинация при 37°С | ПМК при 37°С |
Основной участок повреждения | внутри сосудов | внутри сосудов | вне сосудов | внутри сосудов | вне сосудов |
Комментарии | — острое или сверхострое течение — прогноз сомнительный | — острое или cверхострое течение — тяжелая анемия — гемоглобинемия — гемоглобинурия | — острое или сверхострое течение — наиболее частая | — хроническое течение — цианоз — некроз пальцев, носа, ушей | — хроническое течение — гемолиз на холоде |
Влияние на прогноз и терапию
АГА встречается чаще всего у собак и вызывается действием аутоиммунных IgG как вместе с комплементом, так и отдельно (Cotter S.M., 1992).
- Если IgG экспрессированы на поверхности эритроцитов в ассоциации с комплементом или без его участия (класс I и III), то это заболевание в основном имеет идиопатическую природу с острым и транзиторным течением. Клиническая картина заболевания характеризуется последовательным развитием гемолиза, иногда протекающим тяжело и с ремиссиями. Эта первичная АГА, ассоциирующаяся с IgG, хорошо поддается лечению кортикостероидами и, как правило, не связана с вторичной АГА, возникающей вследствие каких-либо сопутствующих заболеваний. По данным Klag et col. (1993), среди 42 собак, подверженных обследованию, 74% дали позитивную реакцию на IgG и негативную на комплемент. Подобные АГА в основном относят к классу III.
- Если речь идет об антителах IgM (классы II, IV и V), то заболевание хуже поддается кортикостероидной терапии, чаще имеет вторичную природу (онкологическое, инфекционное или какое-либо другое аутоиммунное заболевание). Такие АГА могут быть выявлены непосредственно или опосредованно через присутствие C3b и IgM при элюировании или смыве.
Прогноз АГА, ассоциирующейся с C3b и IgM, более сомнительный по сравнению с IgG.
Распространенные иммунологические расстройства
У одного и того же пациента часто приходится наблюдать большое количество различных антител в сочетании с антиэритроцитарными аутоантителами. Особенно часто АГА собак сочетается с системной красной волчанкой (СКВ) или аутоиммунной тромбоцитопенией. В последнем случае речь идет о синдроме Эванса*.
* Синдром Эванса (E. Robert, амер., 1951) [англ. Evans’ syndrome]. Син. syndrome de Ficher-Evans. Ассоциация аутоиммунного заболевания с тромбоцитопенической пурпурой. Редко встречается у человека, имеет сомнительный прогноз.
Иногда наблюдают АГА в ассоциации с аутоиммунным дерматозом, характеризующимся наличием депо IgG и комплемента на уровне дермо-эпидермального сочленения (Hasegawa T. et al., 1990). Антиэритроцитарные аутоантитела являются фактором обширного иммунологического расстройства даже при отсутствии клинической картины заболевания.
Клиническая классификация
Иммунологическая классификация должна вступать в противоречие со строгой клинической, так как противопоставляет идиопатическую АГА вторичной АГА. Аутоиммунная гемолитическая анемия, характеризующаяся присутствием тепловых антител (IgG), соответствует «идиопатической», в то время как АГА, связанная с персистенцией холодовых антител (IgМ) — «вторичной».
Идиопатическая АГА
При первичной или так называемой идиоптической АГА не отмечают сопутствующих заболеваний. У собак частота АГА идиопатической природы составляет 60-75% случаев. У кошек это заболевания встречается редко, так как у них преобладает вторичная АГА по причине инфекционного заболевании, вызываемого вирусом лейкоза (FeLV) (Jackon M.L. et al., 1969).
Вторичная АГА
В 25-40% случаев у собак и в 50-75% у кошек АГА ассоциируются с другими заболеваниями. АГА предшествует, сопровождает или следует за другим заболеванием, иногда протекающим без особых клинических симптомов (табл. 2). Прогноз и эффективность лечения зависит от первопричины АГА.
Таблица 2. Болезни собак и кошек, ассоциирующиеся с АГА (по Werner L)
Неоплазии | — лимфосаркома — лимфолейкоз — миелолейкоз — миелома — гемангиосаркома — карцинома |
Другие аутоиммунные болезни | — системная красная волчанка — ревматоидный полиартрит |
Паразитарные заболевания | — дирофиляриоз — бабезиоз (пироплазмоз*) — лейшманиоз |
Инфекционные заболевания | — инфекция, вызванная FeLV, вирусом FIP — бронхопневмония — гемобартонеллез* — эрлихиоз |
* Болезни, вызванные пери- или интраэритроцитарными агентами, могут быть ответственными за развитие гемолитической анемии, опосредованной иммунитетом, без участия аутоантител, которые могут возникать вторично и осложняться развитием настоящей АГА. |
Вторичные АГА у кошек в основном ассоциируются с инфекцией FeLV или с гемобартонеллезом (Haemobartonella felis).
Частота обнаружения IgM на эритроцитах у кошек значительно превышает IgG, в то время как у собак преобладают аутоантитела класса IgG. Более высокое содержание антител класса IgM у кошки в сравнении с собаками объясняет преобладание реакции аутоагглютинации.
Симптомы клинической картины заболевания и результаты лабораторного исследования
У человека выявлена высокая положительная корреляция между признаками клинического, гематологического, иммунологического проявлений АГА (Stevart A.F., Feldman B.F., 1993).
Клинические симптомы
АГА проявляются в любом возрасте, однако наиболее часто их наблюдают с 2 до 7 лет. Также влияет время года (Klag A.R., 1992), поскольку 40% случаев АГА выявляют в мае-июне. У человека также обнаружено увеличение частоты заболевания АГА в весенний период (Stevart A.F., Feldman B.F., 1993).
Пол и порода не являются факторами, предрасполагающими к данному заболеванию.
Начало заболевания может быть прогрессирующим или внезапным. Для АГА свойственно сочетание пяти патогномоничных симптомов:
- упадок сил, вялость (86%),
- бледность слизистых (76%),
- гипертермия,
- тахипноэ (70%),
- тахикардия (33%).
Тремя основными причинами обращения к ветеринарному врачу являются: коричневый цвет мочи, анорексия (90%) и упадок сил (Desnoyers M., 1992). Гепатомегалия и спленомегалия выявляются не всегда (25% случаев), аналогичную тенденцию отмечают и в отношении лимфаденопатии (Stewart A.F., Feldman B.F., 1993).
Также наблюдают прострацию и иногда летаргию. Желтушность, незначительна или отсутствует (50% случаев).
Петехии и экхимозы (кровоподтеки) наблюдают лишь в тех случаях, когда имеет место тромбоцитопения. По данным Klag A.R. et al. (1993) средняя или тяжелая тромбоцитопения наблюдалась у 28 собак из 42 (67%).
Интенсивность анемии может варьировать и зависит от 2 факторов:
- степени гемолиза,
- компенсаторной способности костного мозга.
Интенсивность анемии при первичной АГА по сравнению с вторичной более выражена.
Довольно редко при выявлении холодовых агглютининов (IgM), чаще при идиопатической АГА анемия в целом выражена умеренно, с отдельными эпизодами усиления.
Цианоз и некроз концевых частей тела (уши, пальцы, хвост, нос) способные эволюционировать в гангрену, иногда с летальным исходом, являются наиболее патогномоничными признаками при данном заболевании (Vandenbusshe P. еt al., 1991).
Все эти повреждения у собак и кошек связаны с нарушением кровообращения, порождаемым агглютинацией эритроцитов в периферических капиллярах, где температура тела значительно ниже таковой его висцеральной части.
Клинический анализ крови
При наличии АГА число эритроцитов падает ниже 5 000 000/мл. Гематокрит сильно снижен (до 8-10%), аналогичную картину наблюдают в отношении гемоглобина (до 4 г/100 мл). Отмечают нормоцитарную, нормохромную и иногда макроцитарную анемию (Jones D.R.E. et al., 1992, 1991, 1990).
Таблица 3. Нормы общего клинического анализа у домашних плотоядных (по Crespeau)
Анализ | Собака | Кошка |
Гематокрит | 35-55% | 24-45% |
Число эритроцитов | 6-7,7 млн/мм3 | 5,5-10 млн/мм3 |
Уровень гемоглобина | 12-16 г/100 мл | 8-14 г/100 мл |
Содержание ретикулоцитов | 0-1,5% | 0-1% |
Количество лейкоцитов | 6-12 тыс /мм3 | 5,5-13 тыс /мм3 |
Количество тромбоцитов | 250-700 тыс/мм3 | 300-700 тыс/мм3 |
Обращает на себя внимание наличие мелких окрашенных сфероцитов, а также иногда отмечают нейтрофилию (Desnoyers M., 1992).
Порой мы констатируем фагоцитоз эритроцитов моноцитами. АГА у собак чаще имеет регенеративную форму (приложение 2). Общее количество ретикулоцитов варьирует от 20 до 60%. У 30% собак отмечают слабо выраженный ретикулоцитоз (1-3% ретикулоцитов), у 60% он умеренный или тяжелый (больше 3% ретикулоцитов). У собак были описаны слабо регенеративная и арегенеративная АГА (Jonas L.D., 1987). В настоящее время эти формы заболевания выявляются все чаще.
Приложение 2. Висцеральные иммунологически опосредованные анемии у собак
Начиная с 1980 г. появилось несколько публикаций по поводу висцеральных (но не периферических) анемий, опосредованных иммунологически (подобны аутоиммунной эритробластопении у человека). Этот феномен в настоящее время подтверждается. Клэг и соавторы в своих недавних ретроспективных исследованиях 42 пациентов: у одной трети из них выявили иммуноопосредованную арегенеративную анемию. Судя по всему, это характерно для висцеральной анемии. Ниже представлены данные клинического, гематологического и биохимического исследований, а также предположение о патогенезе этого заболевания.
Клиника
— Классическая картина анемии: утомляемость, анорексия, бледность слизистых, тахипное, тахикардия, которые часто прогрессируют.
— Наличие или отсутствие признаков гемолиза, в особенности — урологических.
• Гемограмма
— Анемия, часто тяжелая.
— Тромбоцитопения (иногда тромбоцитоз).
— Гемограмма по лейкоцитам соответствует норме, либо отмечается нейтрофилия.
— Ретикулез отсутствует.
— Сфероцитоз, аутоагглютинация и положительный прямой тест Кумбса при нормальной температуре — непостоянно.
• Миелограмма
— Признаки эритрофагоцитоза.
— Признаки эритробластопении или дисэритропоэза.
• Другие дополнительные методы исследования
— Холодовой тест Кумбса — часто резко положительный и длительно персистирующий.
• Дифференциальная диагностика:
— Дисэритропоэз или вторичная эритробластопения, лейшманиоз или эрлихиоз, либо нарушение метаболизма железа.
— Первичная миелодисплазия.
• Терапия
— кортикостероидная терапия: преднизолон в/м, в/в, затем перорально (от 2 до 1 мг/кг в сутки) до нормализации гемограммы и получения отрицательного теста Кумбса.
— даназол: 10 мг/кг в день три раза в сутки.
Предположения о патогенезе
Существует особая форма иммуноопосредованной висцеральной анемии. Вероятно, она связанна с наличием антител против антигенов, экспрессированных на предшественниках эритробластов, а также, хотя и не всегда — на зрелых эритроцитах. По-видимому, эти антитела по температурным характеристикам чаще относятся к холодовым.
Диагностика основана на следующих анализах:
— полная гемограмма,
— миелограмма свидетельствует о наличии эритробластопении или дисэритропоэза с наличием или нет дисмиелопоэза,
— прямой или непрямой метод Кумбса с тепловыми или холодовыми аутоантителами,
— исключение сопутствующей первопричины заболевания, в частности лейшманиоза или эрлихиоза,
— исключение первичной миелодисплазии.
Биохимический анализ крови
У всех собак отмечают выраженную билирубинурию (коричневая окраска мочи) с уробилинурией, а также гипербилирубинемию (не коньюгированную). Желтушность присутствует приблизительно в 50% случаев. Возросшая гемоглобинемия иногда сопровождается гемоглобинурией, но симптом гемолиза внутри сосудов проявляется не так часто (10% из 42 собак) (Klag A.R. et al., 1993). При этом заметно снижение гаптоглобина и сывороточного железа, тогда как урикемия (мочевая кислота в крови) возрастает в 50% случаев. При развитии заболевания показатели варьируют, иногда изменения продолжительны или прерываются с последующими рецидивами.
Методы иммунологической диагностики
Прямой тест Кумбса
Этот метод в диагностике АГА является приоритетным (Person et al., 1980).
Принцип
Тест Кумбса — это иммунологический метод, с помощью которого определяют наличие не агглютинирующих антител благодаря действию ксеногенной (от другого вида) антииммуноглобулиновой сыворотки, провоцирующей агглютинацию. С помощью одного лишь прямого теста Кумбса ставят диагноз на данное заболевание. В клинической практике этот метод используют для человека, собаки и кошки.
Принцип работы прямого теста Кумбса, или так называемого специального видового антиглобулинового теста, основан на эффекте сенсибилизации эритроцитов с помощью иммуноглобулина или комплемента, фиксирующихся на их мембране, либо за счет и одного и другого совместно (Stewart A.F., 1993).
Механизм предлагаемого метода заключается в том, чтобы с помощью видоспецифических «анти-антител» или специфических антиглобулинов создать мостики между антителами, которые покрывают поверхность эритроцитов (рис.1).
Рисунок. 1. Метод Кумбса: реакция агглютинации. |
На первом этапе используют поливалентные антиглобулины, направленные против всех сывороточных глобулинов.
Классификация
Для человека разработаны следующие реактивы: анти-IgG, антиIgM, анти-IgA и анти-С3.
Для собак в рутинной диагностике используют один поливалентный антиглобулин, иногда три антиглобулина: один поливалентный и два специфических — анти-IgG и антиС3 (Jones D.R.E., 1990).
- С помощью специфических реагентов установлено, что чаще всего эритроциты сенсибилизируются только одними IgG (АГА типа IgG), либо IgG в сочетании с комплементом (АГА смешанного типа), в частности с C3d, экспрессированным (присутствующим) на мембране эритроцитов.
- Иногда причиной сенсибилизации эритроцитов служит один лишь комплемент (АГА комплементного типа). Этот тип анемии связан исключительно с действием IgM, поскольку IgM при постановке теста Кумбса обычно элюируется спонтанно в процессе промывки. В данном случае после промывки при 37°С на поверхности эритроцитов остается только C3d.
IgM можно выявить через антикомплемент при использовании метода Кумбса, либо с помощью этого же метода, но проводимого на холоде, при котором элюирование IgM в процессе промывки не происходит. При этом мы говорим о холодовых агглютининах IgM, когда при +4°С у собак можно наблюдать спонтанную агглютинацию. - Антитела класса IgА встречаются крайне редко.
Каждый антиглобулин обладает видоспецифическими свойствами. Постановка реакции Кумбса с кошачьими эритроцитами означает необходимость своевременного приготовления или приобретения антиглобулинового реагента для этого вида животного. Наборы, предназначенные для проведения данного теста у человека или собаки, для кошек непригодны.
У домашних плотоядных АГА, выявляемые с холодовыми антителами, встречаются гораздо реже, чем с тепловыми.
Техника выполнения
Кровь для анализа (приложение 3) необходимо брать с антикоагулянтом (цитрат или ЭДТА — этилендиаминотетрауксусная кислота). Крайне важно, чтобы в среде, находящейся пробирке, содержался агент, вызывающий хелатирование кальция. В образце крови он провоцирует неспецифическую фиксацию комплемента на эритроцитах в условиях in vitro и приводит к ложно позитивной реакции. Именно поэтому гепарин не используют в качестве антикоагулянта.
Приложение 3. Диагностика иммунопатологии на практике
- Взятие крови: цельная кровь с антикоагулянтом, обязательно с цитратом, ЭДТА (Complexon), ACD, CPD. Объем — 1 мл (минимум) — 5 мл.
- Доставка: быстрая, оптимальное время транспортировки 2-6 часов. Ни в коем случае не превышать 48 часов.
- Анализ: прямой тест Кумбса.
- Постановка метода: сразу после получения образца крови.
- Срок предоставления результатов: в течение одного дня с момента получения материала для анализа
После тщательной отмывки (трех или пятикратное центрифугирование от 5 мин при 800g до 5 мин при 1500g) тестируемый образец суспензии доводят до 2%-ой концентрации. Прямую реакцию Кумбса рекомендуется проводить как можно раньше с момента взятия материала, желательно в течение 2 часов. Образец крови следует хранить при температуре 37°С. После инкубации в течение одного часа при 37°С с разными серийными разведениями трех антисывороток образец выдерживают в условиях комнатной температуры (1-1,5 часа). Результаты реакции учитывать визуально в лунках микроплашек, помещенных на зеркало Кана, либо с помощью микроскопа (×100).
Параллельно необходимо проводить негативные контроли:
- 2%-ная суспензия эритроцитов больного в присутствии изотонического раствора NaCl с целью проверки способности тестируемых эритроцитов на спонтанную агглютинацию в отсутствие антиглобулинов. По данным Desnoyers M. (1992), аутоагглютинины отвечают за спонтанную аутоагглютинацию как при 37°С (класс I), так и при 4°С (класс IV). У кошек аутоагглютинация эритроцитов встречается часто (Shabre B., 1990). Разведение крови в эквивалентном объеме изотонического раствора NaCl позволяет исключить указанный артефакт за счет диссоциации эритроцитов, имеющих форму трубочек, не оказывая при этом негативного эффекта на настоящие аутоагглютинины (Squire R., 1993).
- Смешивание 2%-ной суспензии эритроцитов здоровой собаки (контрольное животное) с видоспецифическим сывороточным антиглобулином позволяет проверить качество антисыворотки.
Если клинические симптомы указывают на АГА, опосредованную IgM, то клиницист может затребовать проведение обычной пробы Кумбса при 37°С, а также холодовой пробы Кумбса при 4°С, чтобы выявить антитела, активные на холоде (типы IV и V) (Vandenbussche P., et al., 1991).
Этот тест не приемлем для кошек. Дело в том, что у многих нормальных кошек есть неагглютинирующие антитела, которые становятся активными в условиях более низкой температуры и выявляются с помощью прямого теста Кумбса при 4°С. У данного вида животных следует использовать метод непрямой гемагглютинации при 4°С.
Обсуждение
Лабораторная диагностика АГА почти полностью основана на прямом методе Кумбса в сочетании с общим анализом крови. Интерпретация положительной реакции в тесте Кумбса не вызывает сложности.
- Если обнаруженные антитела относятся к классу IgG, то весьма вероятно, что выявленная анемия имеет аутоиммунное происхождение.
- Значимость выявления положительного результата в пробе Кумбса типа «IgG+комплемент» при АГА смешанного типа требует обсуждения, поскольку нет полной уверенности в том, что комплемент фиксируется на комплексе, образованном IgG с антигенами мембраны эритроцитов.
- Оказалось, что еще сложнее установить достоверность сенсибилизации эритроцитов при АГА, выявляемой с помощью позитивного теста Кумбса в постановке реакции на «чистый комплемент».
Возможно, часть тестов Кумбса типа «комплемент» соответствует временной фиксации комплексов антиген-антитело, которые быстро элюируются с поверхности эритроцитов.
Дифференцируют АГА от истинного гипергемолиза по следующим признакам: повышенный ретикулоцитоз, неконьюгированная гипербилирубинемия и т.д. Иногда тест Кумбса дает ложно-позитивный или ложно-негативный результат (табл. 4). Это бывает довольно редко (примерно в 2% случаев), но негативная реакция на тест Кумбса может проявляться при истинной АГА, особенно если количество фиксированных иммуноглобулинов недостаточно (менее 500 на один эритроцит).
Таблица 4. Интерпретация результатов прямого метода Кумбса (по Cotter)
Ложно-позитивные реакции | 1. Антитела, фиксированные на эритроцитах и специфичные к бактериям, паразитам. (Haemobartonella, Babesia) или лекарственным препаратам. 2. Неспецифическая адсорбция сывороточных белков поврежденными эритроцитами. 3. Неоплазии (адсорбированные иммунные комплексы). 4. Антисыворотки с антитрансферриновой активностью 5. Переливания крови (посттрансфузионные аллоантитела). 6. Присутствие свободных ионов Са++ в пробирке с образцом взятой крови (гепарин): не иммунная (неспецифическая) фиксация комплемента на эритроцитах. |
Ложно-негативные реакции | |
| 1. Спонтанное элюирование антител при отмывании или слишком долгая задержка с доставкой образца крови. 2. Антисыворотки, не адаптированные по титру или специфичности (отсутствие видовой специфичности). 3. Антисыворотки со слишком высоким титром: повышать разведение. 4. Температура тестирования отличается от температуры активизирующей антитела — холодовые агглютинины (IgM) выявляют исключительно при 37°С. |
| 5. Пациент находится в фазе ремиссии. 6. Слишком малое количество антител фиксирующихся на эритроцитах (ниже порога чувствительности используемого метода): 100-500 IgM/эритроцит. 7. Подавление антител в процессе лечения. |
Клинические симптомы АГА во многом сходны с пироплазмозом, очень распространенным во Франции. Это требует от клинициста систематического проведения теста Кумбса в случае гемолитической анемии при отсутствии положительного ответа на классическое лечение, при заболевании животного пироплазмозом, даже если установлена персистенция пироплазм в крови, потому что это заболевание может одновременно сопровождаться АГА.
Элюирование
Если с помощью метода Кумбса можно определить, к какому классу относятся сенсибилизированные антитела, то элюирование позволяет определить их специфичность. Элюирование при высокой температуре с помощью эфира или кислоты позволяет собрать пул антител и протестировать их на панели с эритроцитами соответствующего вида с помощью непрямого метода Кумбса (Person J.M., 1988).
Это в основном проводят в гуманитарной медицине, где имеются панели с типированными эритроцитами.
У животных элюирование кислотой имеет особенное значение при подозрении на ложно-позитивную реакцию специфических антител к антигену, искусственно фиксированному на поверхности эритроцитов. Если элюат, полученный от эритроцитов собаки, подозреваемой на заболевание, не дает реакции агглютинации с пулом эритроцитов, полученных от собак с различными группами крови, то речь идет об АГА (Tsuchida et al., 1991).
Непрямой метод Кумбса
Принцип его заключается в том, чтобы выявить наличие свободных аутоантител в сыворотке крови против эритроцитов.
Кровь больной собаки нужно собрать в чистую сухую пробирку и отцентрифугировать. Тестируемую сыворотку инкубируют в присутствии эритроцитов, трижды отмытых и полученных от здоровой собаки той же группы крови, что и больное животное. Уровень количества свободных аутоантител в сыворотке часто бывает очень низким, поскольку все присутствующие антитела плотно зафиксированы на поверхности эритроцитов. В 40% случаев количество свободных антител бывает недостаточным, чтобы получить позитивную реакцию в непрямом методе Кумбса (Stevart A.F., 1993).
Механизмы разрушения эритроцитов
АГА входит в группу аутоиммунных заболеваний, для которых роль аутоантител в патогенезе продемонстрирована четко и убедительно.
Именно связывание аутоантител со специфическими антигенами на мембране эритроцитов ответственно за уменьшение продолжительности их жизни, что опосредовано тремя цитотоксическими механизмами: 1) фагоцитоз; 2) прямой гемолиз при участии комплемента; 3) антителозависимая клеточная цитотоксичность.
Внесосудистый эритрофагоцитоз
В большинстве случаев наблюдается фагоцитоз эритроцитов макрофагами.
Эритроциты, сенсибилизированные аутоантителами, разрушаются после опсонизации макрофагами селезенки, печени, в меньшей степени костного мозга. Билирубинемия, а также наличие в моче уробилина и билирубина подсказывают клиницисту о том, что происходит внесосудистый гемолиз (Chabre B., 1990).
Незначительные различия в патогенезе присутствуют между двумя «кладбищами эритроцитов» (приложение 4).
Внесосудистый эритрофагоцитоз может сочетаться с внутрисосудистым гемолизом.
Приложение 4. Интерпретация прямых тестов Кумбса (по Cotter)
МЕХАНИЗМЫ ЭРИТРОФАГОЦИТОЗА
Эритроцитарный фагоцитоз в селезенке и печени
- В селезенке (IgG=тепловые агглютинины)
Это IgG-зависимый эритрофагоцитоз, соответствующий классу наиболее распространенных АГА (III). Молекула аутоантитела IgG, связанная с эритроцитом через свой Fab-фрагмент, фиксируются на рецепторе для Fc фрагмента, экспрессированного на цитоплазматической мембране макрофагов селезенки, что обеспечивает опсонарную адгезию. Активность этого рецептора может дополняться рецептором для комплемента C3b. Между этими двумя рецепторами, экспрессированными на мембране макрофагов, существует полный синергизм.
Данный вид эритрофагоцитоза может быть полным или частичным. Во втором случае не фагоцитировавшиеся фрагменты эритроцитов приобретают вследствие повреждения мембран форму циркулирующих сфероцитов, которые, в свою очередь, подвергаются фагоцитозу.
Элиминация в данном случае происходит быстрее, чем с обычными эритроцитами. При этом часто наблюдается спленомегалия. - В печени (IgМ=холодовые агглютинины)
Этот вид эритрофагоцитоза является комплемент-зависимым и происходит в отсутствие аутоантител IgG (класс IV и, значительно реже, класс I).
Когда эритроциты покрываются антителами IgМ, фиксирующими комплемент, не полностью активированный классический путь до С3, который также покрывает поверхность эритроцитов. В самой печени Купферовские клетки располагают рецепторами к C3b, что способствует адгезии и эритрофагоцитозу. Тем не менее, некоторым эритроцитам удается избежать фагоцитоза благодаря дезинтеграции C3b на их поверхности под действием специфического C3b-инактиватора на два фрагмента: C3с и C3d. Фрагмент С3с остается в контакте с макрофагами, тогда как фрагмент C3d остается на поверхности эритроцитов.
После кратковременной секвестрации в печени эритроциты снова поступают в циркуляцию, где частично защищены от фиксации к ним новых молекул С3 благодаря насыщению соответствующих участков мембраны. Часто отмечают гепатомегалию.
Помимо прямой деструкции, которую мы наблюдаем, также отмечают снижение средней продолжительности жизни эритроцитов.
Внутрисосудистый гемолиз, опосредованный комплементом
Деструкция эритроцитов в системе циркуляции довольно редкое явление (у 15% собак), которое наблюдается исключительно при острой гемолитической анемии, либо при острых осложнениях, развившихся при хроническом течении заболевания (классы II и V).
Это объясняется полной активацией комплемента по классическому пути от С1 до С9 на поверхности одних и тех же эритроцитов. В результате происходит разрушение мембраны эритроцитов и высвобождение их составляющих (главным образом, гемоглобина) в циркулирующую кровь, что и приводит к гемоглобинемии и гемоглобинурии.
Это наблюдается только при фиксации аутоантител к комплементу с выраженным гемолитическим эффектом: роль в гемолизе в настоящее время четко установлена для IgG и IgM. Только эти формы аутоиммунного заболевания могут сопровождаться иктеричностью или субиктеричностью.
Цитотоксичность клеток, вызываемая антителами
К-клетки (клетки-киллеры или клетки-убийцы) имеют рецепторы к фрагменту Fc молекулы IgG, с помощью которых фиксируются на поверхности сенсибилизированных эритроцитов и вызывают их гибель посредством прямого цитотоксического воздействия.
Недавно точно установлена, но еще не совсем точно определена роль этого третьего механизма в развитии АГА.
Прогноз
Как и при остальных аутоиммунных заболеваниях, степень аутоиммунных нарушений не всегда прямо пропорциональна тяжести проявления процесса.
Краткосрочный прогноз
Краткосрочный прогноз неблагоприятный лишь в 15-35% случаев. Клиническое улучшение после адекватной терапии наблюдается, по данным разных авторов, у 65-85% пациентов.
Увеличение гематокрита и ретикулоцитоза на фоне снижения сфероцитоза — положительные прогностические критерии.
Смертность собак значительно повышается при следующих обстоятельствах: слабая регенерация (умеренный или недостаточный ретикулоцитоз), низкий гематокрит (ниже 15%), концентрация билирубина в крови выше 100 мг/л.
Долгосрочный прогноз
Долгосрочный прогноз менее благоприятен в плане возможных осложнений. Обычно приходится довольствоваться тем, что выздоровление достигается лишь в 30-50% случаев.
Прогноз при вторичной АГА зависит главным образом от сопутствующего заболевания и его возможных осложнений.
Чаще всего наблюдается легочная тромбоэмболия и диссеминированная внутрисосудистая коагуляция (Cotter S.M., 1992). В редких случаях отмечают осложнения в виде лимфаденита, эндокардита, гепатита или гломерулонефрита, которые могут привести к летальному исходу (Stewart A.F., Feldman B.F., 1993).
При заболевании класса III прогноз чаще всего благоприятный. У кошек прогноз сдержанный, поскольку заболевание нередко ассоциируется с инфекцией, вызванной тем или иным ретровирусом (вирус кошачьей лейкемии, FeLV; вирус кошачьего иммунодефицита, VIF) (Chabre B., 1990).
Более осторожный прогноз при заболеваниях классов II и V, сопровождающихся внутрисосудистым гемолизом.
Прогноз сомнительный при заболеваниях, относящихся к классам I и IV и сопровождающихся аутоагглютинацией (Hagedorn J.E., 1988). Они чаще остальных заканчиваются летальным исходом.
По данным Klag et col. (1992, 1993) общий уровень смертности составляет около 29%.
В любом случае прогноз должен быть всегда сдержанным и зависеть от адекватности фармакологической коррекции состояния.
Лечение
Терапия АГА может осуществляться различным образом. Наиболее общий подход лечения основан на устранении иммунологической реакции путем назначения иммунодепрессантов, которые подавляют образование аутоантител и активность макрофагов, ответственных за эритрофагоцитоз.
Иммунодепрессанты
Кортикостероиды — главная составляющая терапии. Они применяются как в виде монотерапии, так и в ассоциации с даназолом, циклофосфамидом или азатиоприном (Cotter S.M., 1992; Squires R., 1993).
Кортикостероиды
В высокой терапевтической дозе и при длительном применении кортикостероиды являются основными препаратами, обеспечивающими эффект иммунодепрессии. С точки зрения клинициста преднизон (Cortancyl N.D. per os), преднизолон, метилпреднизолон (гемисукцинат метилпреднизолона: Solumedrol N.D., в/в), назначаемые в ударных дозах от 2 до 4 мг/кг через каждые 12 часов, дают наилучший результат. Также можно использовать дексаметазон или бетаметазон в дозах 0,3-0.9 мг/кг в сутки (Stewart A.F., Feldman B.F., 1993).
Если кортикостероидная терапия эффективна при АГА с тепловыми аутоантителами (IgG) в 80-90% случаев, то при АГА с холодовыми аутоантителами (IgM) её результативность неоднозначна. Тем не менее, полученные данные следует оценивать самым тщательным образом. Если кортикостероидная терапия неэффективна, необходимо прибегнуть к цитотоксической химиотерапии.
- Ударная кортикостероидная терапия должна быть начата как можно раньше с момента подтверждения диагноза на АГА с помощью прямого метода Кумбса. Лечение не должно быть длительным: продолжительность варьирует в среднем от трех до восьми недель. Больший курс кортикостероидной терапии имеет незначительные преимущества, но сопряжен с риском тяжелых осложнений (ятрогенный синдром Кушинга).
- При поддерживающей терапии кортикостероиды назначают через день в дозах, равных половине, четверти или одной восьмой от ударной. Постепенную отмену препаратов осуществляют в течение двух-четырех месяцев после клинической ремиссии. Некоторым животным отменяют кортикостероиды полностью. Других продолжают лечить с применением низких доз в течение всей жизни для исключения рецидивов (Squires R., 1993).
У собак с идиопатической АГА (IgG) тест Кумбса остается положительным на всем протяжении заболевания, в том числе во время кортикостероидной терапии и клинической ремиссии. Когда же в прямом методе Кумбса реакция негативная, то рецидив заболевания бывает довольно редко. Речь идет об очень благоприятном прогностическом критерии (Slappendel R.J., 1979).
У кошек кортикостероидную терапию сочетают с назначением антибиотиков тетрациклинового ряда, если при гематологическом исследовании выявлен гемобартенеллез (Haemobartenella felis), либо для профилактики бактериальных осложнений на фоне иммуносупрессии.
Кортикостероидную терапию у кошек не следует проводить длительно, особенно при инфекции, вызванной FeLV. Иммунодепрессивное действие кортикостероидов может усилить и без того выраженный иммунодепрессивный эффект вируса. У кошек с латентной вирусной инфекцией кортикостероидная терапия может обострить патологию и вызвать виремию.
Если в первые 48-72 часов после начала кортикостероидной терапии не удается достигнуть стабилизации или улучшения показателя гематокрита, то терапию следует продолжить. Заметное увеличение гематокрита может произойти через 3-9 дней после начала терапии. Если улучшения не произошло и по истечении 9 дней, то следует использовать более мощные иммунодепрессивные препараты.
Мощные иммунодепрессанты
Циклофосфамид и азатиоприн — два цитотоксических препарата (цитостатики), являющиеся более мощными, чем кортикостероиды иммунодепрессантами (табл. 5). Они подавляют выработку антител В-лимфоцитами (Squires R., 1993).
Таблица 5. Дозы используемых цитотоксических иммунодепрессивных препаратов
и возможные токсические эффекты
N.D. | Циклофосфамид Эндоксан | Азатиоприн Имуран | Даназол Данатрол |
Доза | 50 мг/м2 (или 2 мг/кг перорально) 1 раз в день, 4 дня подряд в неделю или 2 мг/кг перорально 1 раз в сутки | 5 мк/кг перорально | 3 раза в день |
Вторичные токсические эффекты | • миелотоксичность • повышенная чувствительность к инфекциям • алопеция • геморрагический цистит | • миелотоксичность • повышенная чувствительность к инфекциям • алопеция | • увеличение мышечной массы |
Применять эти препараты следует лишь в самых тяжелых случаях заболевания АГА: пациентам с аутоагглютинацией (классы I и IV) или с внутрисосудистым гемолизом (классы II и V) (Hagedorn J.E., 1988). В тяжелых случаях требуются меры энергичного терапевтического воздействия. Обязательно следует информировать владельцев животных о побочных эффектах препаратов.
Циклоспорин (10 мг/кг, в/м, затем перорально в течение 10 дней) успешно применяют для лечения сложных рецидивирующих случаев АГА, не поддающихся классической кортикостероидной терапии (Jenkins T.S. et al., 1986; Preloud P., Daffos L., 1989). Пациентам с аутоагглютинацией (классы I и IV) для профилактики рецидивов и достижения ремиссии требуется сочетанная терапия (кортикостероиды + цитостатики). Однако для лучшего понимания того, насколько такое сочетание эффективно при терапии АГА, требуются более масштабные испытания.
Даназол
Даназол (производное этистерона), синтетический гормон группы андрогенов, все чаще и чаще применяют для лечения аутоиммунных заболеваний (Stewart A.F., 1945). Даназол снижает продукцию IgG, а так же количество IgG и комплемента, фиксированных на клетках (Holloway S.A. et al., 1990).
Основной механизм действия даназола заключается в ингибировании активации комплемента и в подавлении фиксации комплемента на клеточных мембранах (Bloom J.C., 1989). Даназол модулирует соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров, которое нарушается при аутоиммунной тромбоцитопении (Bloom J.C., 1989). Он также может снижать количество рецепторов к Fc фрагменту иммуноглобулинов, находящихся на поверхности макрофагов (Schreiber A.D., 1987).
Терапевтическая доза для собак составляет 5 мг/кг, 3 раза в день перорально (Stewart A.F., Feldman B.F., 1993). Действие даназола (Danocrine N.D., Danatrol M.D.) нарастает медленно в течение одной или трех недель и проявляется в улучшении гематологических показателей (Bloom J.C., 1989; Schreiber A.D., 1987). Рекомендуется сочетать даназол с каким-либо кортикостероидом (Stewart A.F., Feldman B.F., 1993). Когда состояние пациента стабилизируется, дозы кортикостероидов уменьшают, а лечение даназолом продолжают в течение двух-трех месяцев (Schreiber A.D., 1987). Даназол может вызвать заметное увеличение мышечной массы, если его использовать более полугода.
Спленэктомия
Цель спленэктомии заключается в удалении селезенки, которая является основным органом деструкции эритроцитов в случае АГА, связанной с IgG. Она также является главным органом лимфоидной системы, продуцирующим циркулирующие антитела, в конкретном случае аутоантитела. Успешно применяемая в гуманитарной медицине, эта операция, вероятно, не может быть столь же благоприятной для собаки и кошки (Feldman B.F. et al., 1985). Она совершенно бесполезна при АГА, связанной с IgМ, где деструкция эритроцитов в основном происходит в печени. Более того, выполнение данной операции может вызвать обострение латентного течения бабезиоза или гемобартонеллеза. Таким образом, мы предлагаем рассматривать спленэктомию лишь как крайний вариант (Feldman B.F. et al., 1985).
Переливание крови
Гемотрансфузия в основном противопоказана из-за возможности возникновения гемолиза. Переливаемые эритроциты быстро покрываются аутоантителами, что приводит к их массовому разрыву, и, следовательно, усугублению криза гемолиза. С другой стороны, гемотрансфузия снижает нормальный гемопоэз костного мозга. Поэтому её следует назначать по следующим показаниям: гемолитический криз, гематокрит ниже 10% или нарушение дыхания.
На практике показанием для гемотрансфузии считается падение числа эритроцитов ниже 2×106 /мл у собак и 1,5×106/мл у кошек. Очень кратковременное улучшение отмечают при внутривенном введении кортикостероидов. Плазмаферез дает положительные результаты у человека, но у животных его применение осложняется малой доступностью приборной техники для собак и кошек (Matus R.E. et al., 1985).
Адъювантная терапия
Как и при всех анемиях используют адъювантную терапию: сульфат железа из расчета 60-300 мг в сутки (Squires R., 1993), витамин В12, спокойная обстановка, тепло, а затем внутривенная инфузия, иногда принудительное дыхание. Особенно важно, чтобы пациентов с холодовыми агглютининами оберегали от воздействия слишком низких температур. Профилактика тромбоэмболии и ДВС синдрома у собак группы риска (повышенный уровень общего билирубина, состояние после гемотрансфузии) заключается в раннем введении антикоагулянтов: 100 ЕД/кг гепарина п/к каждые 6 часов на протяжении периода обострения (Klein M.K. et al., 1989).
Наблюдение за пациентами
Это имеет большое значение. Контроль над состоянием пациентов можно осуществлять с помощью теста Кумбса: через два месяца с момента вхождения больного в острую фазу течения заболевания, затем через каждые 2-3 месяца при переходе в хроническое течение. Если критерии клинической и гематологической оценки свидетельствуют о норме, тест Кумбса дает отрицательную реакцию, можно считать, что собака или кошка выздоровели. Однако трудно говорить об истинном выздоровлении или простой ремиссии.
В этом случае следует быть крайне осторожным, поскольку с вероятностью 50% возможен любой из выше указанных вариантов. Для выяснения истинной обстановки необходимо продолжать контроль за состоянием животного, систематически проводить анализы крови (например, один раз в месяц в течение полугода, а потом один раз в три месяца) и при малейшей угрозе рецидива возобновлять кортикостероидную терапию. Как правило, этого бывает достаточно для нормализации клинического состояния. Минимальная доза кортикостероидов (0,05-1 мг/кг в день) через день способствует восстановлению показателей крови до физиологической нормы. При хроническом или рецидивирующем течении АГА рекомендуется перманентное назначение кортикостероидов по мере возможности в минимальной терапевтической дозе.
Заключение
Когда клиническая картина достаточно показательна, то с помощью только одного прямого метода Кумбса можно поставить диагноз на АГА. Но это относится только к позитивной реакции теста Кумбса в присутствии IgG (как вместе с комплементом, так и без него). В целом, позитивные реакции с одним лишь комплементом часто встречаются у собак и редко ассоциируются с выраженным гемолизом. Если поставлен предварительный диагноз, то необходимо проведение дополнительных исследований. Как и при всех аутоиммунных заболеваниях, неспецифические нарушения в иммунной системе могут быть вызваны самыми разными причинами.
И, наконец, все аутоиммунные заболевания имеют сходства, причем каждое представляет группу нарушений, которые в той или иной степени наслаиваются друг на друга. Нередко, можно наблюдать одновременное или последовательное проявление АГА и системной красной волчанки, и АГА и ревматоидного полиартрита, либо АГА и аутоиммунной тромбоцитопении. Если с помощью постановки иммунологического диагноза выявлено наличие одного из этих аутоиммунных заболеваний, то нужно обязательно искать и другие даже при отсутствии характерных клинических симптомов. При ассоциации АГА с СКВ или тромбоцитопенией у собаки, или с инфекцией FeLV у кошки прогноз более сомнительный по сравнению с изолированной идиопатической АГА.
СВМ № 2/2003
Оценить материал
НравитсяНравится Поздравляю Сочувствую Возмутительно Смешно Задумался Нет слов
Гемоглобин НЬ у разных видов
Гемоглобин разных видов млекопитающих 65 000 15 000—16 000 4 С, D/M, ЕА. F. S. X Обычно молекулы гемоглобина состоят из двух пар идентичных полипептидных цепей 4, 16, 35 [c.392]Скорость денатурации одних и тех же белков, выделенных из крови различных видов животных, может резко различаться. Это было показано на примере денатурации гемоглобинов разных видов животных едким натром. Так, например, гемоглобин человека денатурируется на 50% 0,05 н. раствором едкого натра в течение 20—30 сек., между тем денатурация на 50% гемоглобина быка происходит лишь в течение нескольких часов [180]. Интересно отметить, что скорость денатурации обоих гемоглобинов при нагревании или при действии соляной кислоты одинакова [181]. Эти данные могут быть объяснены тем, что разные денатурирующие агенты действуют на различные группировки белков, образуя отличающиеся друг от друга конечные продукты [182]. [c.155]
Исследователи — как химики, так и биологи—называют поразительным тот факт, что из такого узкого круга отобранных природой органических веществ составлен труднообозримый мир животных и растений. Полагают, что, когда период химической подготовки — период интенсивных и разнообразных превращений — сменился периодом биологической эволюции, химическая эволюция словно застыла. Теперь находят массу доказательств тому, что аминокислотный состав гемоглобина самых низших позвоночных животных и человека практически один и тот же более нли менее одинаковыми остаются у разных видов растений состав ферментативных средств, состав веществ, накапливаемых впрок, и т. д. [c.196]
Гомологичные белки. Белки с одинаковой функцией и сходными свойствами у разных видов организмов, например гемоглобины. [c.1010]
Гемоглобин и цитохром с представляют собой белки, характерные для животных разных видов. Рентгенографическое исследование и изучение аминокислотных последовательностей этих белков для различных-организмов позволяют проследить пу -ти их эволюции. [c.262]
Приведу другой пример. Гемоглобины различных видов позвоночных разнятся аминокислотным составом. Поскольку эти гемоглобины связаны эволюционно, можно считать, что различия в аминокислотной структуре цепей — мутационные различия, закрепленные естественным отбором. Сопоставим структуры активных центров [c.291]
Гемоглобины различных видов животных денатурируются 0,25 н. едким натром с разной скоростью. Гемоглобин человека [c.251]
Идея о связи пигментов с белками и липидами получила в настоящее время полное подтверждение, но вопрос о характере этой связи изучен еще недостаточно. Можно, однако считать установленным, что связь эта не отличается прочностью, поскольку она легко разрушается уже в результате повышения концентрации растворителя. Отсутствуют также строго постоянные соотношения в комплексах пигмент — белок, которые характерны, например, для гемоглобина. В последнем, как известно, на каждую молекулу белка с молекулярным весом 66 ООО приходится четыре группы гемина. Соотношения между белками и хлорофиллом не укладываются в эту схему. Кроме того, эти соотношения непостоянны они изменяются в ходе развития растения и различны у разных видов. В среднем на I молекулу белка (молекулярный вес—17 ООО) приходится от 3 до 10 молекул хлорофилла и 15—25 молекул липидов. [c.127]
Транспорт кислорода по кровяному руслу-основная жизненная функция в царстве животных-кодируется древним семейством генов. Основной компонент эритроцита клетки-белок-тетрамер глобин, который при связывании с (железосодержащим) гемом образует гемоглобин. Для ряда организмов были исследованы гены, кодирующие полипептидные цепи глобина. Все функционально активные гены глобина имеют сходную в общих чертах структуру и включают три экзона, как было показано ранее на рис. 20.16. Мы пришли к выводу о том, что все гены глобина произошли от общего гена-предка (гл. 20). Поэтому, проследив за развитием индивидуальных генов глобина в пределах одного вида и у представителей разных видов, можно многое узнать об общих механизмах эволюции систем генов. [c.268]
Гомологичными называют белки, выполняющие у разных видов одинаковые функции, например гемоглобин у всех позвоночных осуществляет транспорт [c.25]
У некоторых групп животных имеются свойственные только им соединения — специфические ферменты, дыхательные пигменты, переносчики электронов и др. Даже гемоглобин у разных млекопитающих имеет свою специфику (меняются форма кристаллов, изоэлектрическая точка, соотношение метионина и цистина и др.). Отмечена направленная эволюция ряда биохимических систем, которая совершается с одинаковой последовательностью в разных филогенетических ветвях. Виды и роды по ряду биохимических параметров различаются между собой. [c.189]
Строением белков объясняются их весьма разнообразные. свойства. Они имеют разную растворимость некоторые растворяются в воде, другие — в разбавленных растворах нейтральных солей, а некоторые совсем не обладают свойством растворимости (например, белки покровных тканей). При растворении белков в воде образуется своеобразная молекулярно-дисперсная система (раствор высокомолекулярного вещества). Некоторые белки могут быть выделены в виде кристаллов (белок куриного яйца, гемоглобина крови). [c.353]
Многие химические реакции протекают при приготовлении пищи. Если бисквит делают с применением кислого молока и питьевой соды, то между молоком и содой происходит химическая реакция, при которой содержащееся в кислом молоке вещество — молочная кислота взаимодействует с содой, в результате чего образуется газ — двуокись углерода, который выделяется в виде мелких пузырьков и поднимает тесто. И, конечно же, огромное число химических реакций протекает в человеческом организме. Пища, которую ест человек, переваривается в желудке и в кишечнике. Кислород, содержащийся во вдыхаемом воздухе, соединяется с веществом — гемоглобином, входящим в состав эритроцитов, а затем освобождается в тканях, где происходит множество разных реакций. Биохимики и физиологи заняты изучением химических реакций, происходящих в человеческом организме. [c.20]
Наряду с различиями в гемоглобине между семействами, родами, видами или даже подвидами могут также существовать различия в гемоглобине у какого-либо индивида в разные периоды жизни или даже в одно и то же время. Как упоминалось выше, человек имеет различные тины гемоглобина в крови в разные периоды жизни. Та же ситуация встречается и у других видов например, гемоглобины цыпленка и курицы или головастика и лягушки различны, причем во всех случаях пигмент молодого организма имеет более высокое сродство к кислороду. [c.175]
Можно сделать еще другое общее заключение, состоящее в, том, что структуры этих белковых молекул относительно устойчивые, т. е. молекулы не могут легко изменять свою конформацию. Это подтверждается, например, данными Брэгга и Перутца- , которые показали, что в некоторых химических модификациях гемоглобина, различающихся степенью окисления атома железа и биологическими источниками их получения (гемоглобины человека и лошади) и кристаллизующихся в структурах с совершенно различной симметрией и размерами элементарной ячейки (некоторые из этих данных приведены в табл. 1), размеры молекул тем не менее должны быть близкими к какой-то общей для всех модификаций величине. Для любой элементарной ячейки подходящим является продолговатый эллипсоид вращения с осями 53x53x71 А. Возможные отклонения от этих размеров составляют всего несколько процентов. Из этих наблюдений ясно видно., что для всех молекул гемоглобинов общей является определенная, довольно жесткая структура, на которую не влияют ни слабые химические вариации, включая химические различия между гемоглобинами разных видов, ни способ кристаллизации. [c.77]
Основной белок эритроцитов — гемоглобин (его нет в плазме крови). Белковым компонентом его служит глобин, соединенный с простетической группой — гемом. Гем имеет сложное строение, содержит железо. Гемоглобины разных видов животных различаются своим белковым компонентом, хотя все содержат гем [c.163]
Еще один тип мутации, затрагивающей активный центр, выражается в том, что в щели, занимаемой гемом, на место неполярной группы становится полярная. Между гемом и полипептидной цепью существует 60 меж-атомньпс контактов, причем эти контакты по своей природе неполярны. Поскольку эти неполярные взаимодействия устойчиво сохраняются в нормальных гемоглобинах разных видов животных, можно думать, что большинство из них имеет существенное значение для функционирования молекулы гемоглобина. В самом деле, мутации в участках связывания гема почти всегда приводят к неблагоприятным последствиям. Рассмотрим для примера гемогло- [c.99]
Как индивидуальное развитие организма, так и эволюционное развитие в целом, в конечном счете определяются сложными нелинейными молекулярными процессами. Мы вправе говорить о молекулярных основах эволюции. С одной стороны, эволюционные взаимосвязи между биологическими структурами прослеживаются вплоть до молекулярного уровня — устанавливаюг-ея закономерные гомологии в первичной структуре однотипных белков разных видов (цитохром с, гемоглобин и т. д.). С другой стороны, сделаны первые шаги в построении молекулярной теории эволюции. Эйген предложил теорию эволюции и самоорганизации макромолекул, дающую принципиальное модельцое истолкование естественного отбора в добиологической системе. Исходное понятие этой теории, имеющее, как уже сказано, фун- [c.610]
При изучении аминокислотных последовательностей гомологичных белков, вьщеленных из разных видов, было сделано несколько важных выводов. К гомологичным белкам относятся те белки, которые у разных видов вьшолняют одинаковые функции. Примером может служить гемоглобин у всех позвоночных он осуществляет одну и ту же функцию, связанную с транспортом кислорода. Гомо-логичные белки разных вцдов обычно имеют полипептидные цепи, идентичные или почти идентичные по длине. Более того, в аминокислотных последовательностях гомологичных белков во многих положениях всегда находятся одни и те же аминокислоты-их называют инва-1 риантными остатками. Вместе с т хь в других положениях таких белков наблюдаются значительные различия в этих положениях аминокислоты варьируют от вида к виду такие аминокислотные остатки называются вариабельными. Всю совокупность сходных черт в аминокислотных последовательностях гомологичных белков объединяют в понятие гомология последовательностей наличие такой гомологии предполагает, что животные, из которых [c.155]
ГЕМОГЛОБИНЫ — красные пигменты эритроцитов крови человека и позвоночных животных, являющиеся сложными бел1 ами группы хромопротеидов (хромопротеинов) и осуществляющие перенос моле-1 улярного кислорода от легких или др. органов дыхания к тканям. В крови человека в среднем содержится 14,5% Г., его общее количество ок. 750 е в крови млекопитающих— ок. 12,7 г на 1 кг веса животного. Концентрация Г. в крови животных разных видов различна напр, в крови овцы 9% Г., лошади 16%. Г. различных видов позвоночных животных имеют близкие мол. веса (порядка 66 ООО—68 ООО) отличаются химич. составом и строением белкового компонента глобина. Г. содержат одну и ту же простетич. (небелковую) rpynnj, на долю к-рой приходится ок. 4% от веса Г. Простетич. группа в молекуле Г. представлена 4 одинаковыми железонорфирино- [c.418]
В гл. 1П указывалось, что первичная структура некоторых полипептид-ных гормонов (в частности, вазопрессина и меланоцитстимулирующего гормона) у разных биологических видов не вполне одинакова. Такая же видовая специфичность наблюдается и у белков. Сэнгер и его сотрудники, работая с препаратами инсулина, выделенными от разных видов млекопитающих, во всех случаях обнаружили те или иные вариации либо в А-цепи (на участке, ограниченном дисульфидным мостиком), либо в В-цепи (на ее карбоксильном конце). В препаратах цитохрома с, выделенных от разных видов, также были обнаружены индивидуальные различия, определяющиеся природой аминокислот в ключевом пептидном сегменте. Помимо этих вариаций, обусловленных видовой специфичностью, встречаются также и различия в белках одного и того же вида, возникшие в результате мутаций. Большинство сведений о влиянии мутаций на структуру белка почерпнуто нами из прекрасных работ Ингрэма. Ингрэм и его сотрудники показали, что нормальный гемоглобин взрослого человека и гемоглобин больных таким наследственным заболеванием, как серповидноклеточная анемия, отличаются только тем, что в определенном положении р-цепи остаток глутаминовой кислоты в аномальном гемоглобине заменен валином. (Напомним, что молекула гемоглобина состоит из двух пар идентичных цепей а- и Р-цепей в гемоглобине взрослого человека или а- и у-цепей в гемоглобине плода.) [c.96]
Биохимия животных одного класса практически одинакова так, например, все млекопитающие имеют гемоглобин, однако существуют некоторые различия в аминокислотном составе для разных видов (например, в случпе инсулина см.2 ). Более того, может с щегтвовать небольшое различие (например, в отдельных аминокислотных остатках) для отдельных индивидуумов одного вида, вызванное индивидуальным генетическим кодом. Наконец, у данной особи могут быть два или больше типа слегка различных белковых молекул. Эти различия не сказываются сколько-нибудь существенным образом на большинстве физико-химических свойств, поэтому обычно нет необходн- [c.19]
Между тяжестью отравления и метгемоглобинообразованием у разных видов животных параллелизма нет у лягушек, кур, белых мышей, а обычно — и кроликов, даже при смертельном отравлении метгемоглобин спектроскопически не обнаруживается, напротив, метгемоглобин найден в крови морских свинок, кошек и собак. У собак доза в 200 мг/кг вызывает превращение в метгемоглобин 70—75% гемоглобина. При увеличении дозы до 1DOO мг/кг процентное содержание метгемоглобина не увеличивается. Доза в 100 мг/кг не дает стойкой метгемоглобииемии и животное оправляется (Кларк и соавторы). Острое отравление приводит к стойкой [c.433]
В обмене белков участвуют чрезвычайно сложные молекулы их сложность заключается не только в том, что они построены приблизительно из двадцати разных аминокислот, но также и в том, что содержание этих аминокислот, а также последовательность их расположения в молекулах различны. Это приводит к образованию самых разнообразных белков. Все тканевые белки животных, принадлежащих к разным видам, а также белки разных органов и желез имеют специфическое строение и состав. Белки иного типа — это белки ферментов и гормонов, плазменные белки, белок гемоглобина, а также белки различных нуклеонротеидов. Проблема анаболизма, т. е. синтеза белков, необходимых для роста и развития организма, еще далека от разрешения. Процесс катаболизма, или расщепления белков, при котором осво- [c.378]
Белки организмов разных видов, проявляющие одинаковую биологическую функцию (эволюционно родственные), могут иметь схожее пространственное строение (третичные структуры), но при этом существенно отличаться по первичной структуре. Например, к таким белкам относятся миоглобины и гемоглобины, а также трипсин, химотрипсин, эластаза и другие протеолитические ферменты животных. Вероятно, существует еще нерасшифрованный стереохимический код, определяющий способ [c.68]
Некоторые из белковых веществ имеют простое строение, так как они при расщеплении дают почти исключительно какую-нибудь одну аминокислоту. К таким белкам относится сальмин и клупеин, вещества, которые были получены Косселем из тестикул лосося и сельди, они дают 89 /о аргинина. Гистоны также содержат много аргинина, именно около 27 /о- Однако и преобладающем большинстве случаев белковые вещества при расщеплении превращаются в целый ряд аминокислот, причем относительные количества этих кислот различны для разных видов белка. Лейцин почти всегда количественно преобладает, напр., в гемоглобине, кератине и эластине только в фиброине и в клее его находится меньше в них встречается зато в большом количестве гликокол. Из двухосновных аминокислот большей частью в незначительных количествах встречается аспарагин в казеине довольно много глютамина. Тирозин представляет главный продукт распада фиброина наряду с аланином и гликоколом, Цистин важная составная часть кератина он может быть получен в количестве 8 /д из коровьей шерсти. Следующая таблица дает общий обзор продуктов распада белковых веществ цифры означают проценты [c.332]
У разных видов по аминокислотной последовательности. Аналогично последовательность а-цепи гемоглобина человека отличается 1, 18 и 50-м остатками от а-цепей гемоглобина гориллы, кролика и карпа соответственно. Тем не менее все эти гемоглобиньг позвоночных представляют собой переносчики кислорода с субъ-единичной структурой агрг н имеют сходную конфцэмацию п одинаковую биологическую функцию. [c.101]
Сходства и различия в последовательностях аминокислот в полипептидных цепях гомологичных белков, принадлежащих разным видам, могут служить определенной и количественной мерой степени молекулярной дифференциации. Сейчас уже собрано множество данных о гомологичности молекул гемоглобина, миоглобина, цитохрома с, иммуноглобулина и других белков (см. интересные обзоры Dayhoff, 1968, 1969, 1972, 1978). Здесь мы рассмотрим лишь несколько типичных примеров. [c.357]
Нас здесь больше интересует степень дифференциации гемо глобиновых цепей у разных видов. Возьмем в качестве эталона гемоглобин здорового взрослого человека. Число различий по аминокислотам меж,ду человеком и разными другими видами млекопитающих представлено в табл. 32,1. Как показывает эта таблица, у человека и у шимпанзе последоаате ышсти амйиокис- [c.357]
Нас здесь больше интересует степень дифференцировки гемо-глобиновых цепей у разных видов. Возьмем в качестве эталона темоглобин здорового взрослого человека. Число различий по аминокислотам между человеком и разными другими видами млекопитающих представлено в табл. 29.1. Как показывает эта таблица, у человека и у обезьяны последовательности аминокислот и в а-, и в р-цепях идентичны. Гемоглобины человека и гориллы различаются лишь по двум аминокислотам. Человек и широконосые обезьяны довольно близки друг к другу по строению гемоглобина (рис. 29.1, Б, и 29.2, Б). Различия в строении темоглобина между человеком и представителями других отрядов [c.282]
Как видно из табл. 29.4, разные виды белков изменяются с различной средней скоростью. Гистоны крайне консервативны. Цитохром с, инсулин и некоторые другие белки очень консервативны. В отличие от этих белков фибринопептиды и гормоны роста изменяются быстро. А у гемоглобинов наблюдается промежуточная скорость изменения. [c.290]
Как известно, участок ДНК, несущий информацию о синтезе индивидуального белка, называется геном, а участок, контролирующий синтез единственной полипептидной цепи и ответственный за него,— цистроном. Следовательно, если белок состоит из нескольких (более одного) полипептидов, то естественно предположить, что в синтезе такого белка должны участвовать несколько (более одного) цистронов. Это не всегда соответствует действительности, особенно если полипептидные цепи идентичны (например, а,- и р -цепи гемоглобина). Если, например, пептидные цепи какой-либо одной белковой молекулы являются неидентичными, то это не всегда означает, что они синтезируются как результат действия разных цистронов. Подобный белок может синтезироваться в виде единственной полипептидной цепи с последующими протеолитическими разрывами в одном или нескольких местах и отщеплением неактивных участков. Типичным примером подобной модификации является гормон инсулин, синтезирующийся в виде единого полипептида препроинсулина, который после ферментативного гидролиза превращается сначала в неактивный предшественник проинсулин, а затем в активный гормон инсулин, содержащий две разных размеров и последовательности полипептидные цепи (см. рис. 1.14). [c.532]Биологические функции белков исключительно разнооб разны. Некоторые из них обладают свойствами гормонов, ре гулирующих различные процессы обмена веществ (например инсулин поддерживает уровень сахара в крови) другие белкв действуют как катализаторы (ферменты) биологических про цессов, и, наконец, ряд белков является биологическим стро ительным материалом (например, коллаген соединительны тканей и кератин волос). Выше уже были упомянуты свойств гемоглобина млекопитающих как переносчика кислорода Функция некоторых белков крови заключается в обраЕэваниЕ антител, обусловливающих сопротивляемость к заболеваниям а так называемые нуклеопротеиды входят в качестве важной составной части в гены, которые несут наследственную инфор мадию и передают ее в процессе деления клетки. Вирусы, на пример вирус табачной мозаики, состоят из нуклеопротеидов заключенных в белковую оболочку. Структура многих вирусо настолько регулярна, что они могут быть получены в виде хо рошо образованных кристаллов. [c.512]
Явления микромеркуриализма нередко выявляются среди сотрудников научно-исследовательских учреждений работавших в условиях воздействия малых концентраций Р. (на уровне ПДК или выше) на протяжении 8—10 лет (в отдельных случаях и при стаже 3 года). Основные проявления микромеркуриализма выражались у них в виде неврастенического синдрома с явлениями вегетативной дисфункции при выраженных в разной степени нарушениях со стороны психической сферы (повышенная раздражительность, эмоциональная неустойчивость, повышенная утомляемость, пониженная умственная работоспособность с ослаблением внимания, ухудшение памяти и др.). Почти во всех случаях отмечался характерный мелкий и частый тремор пальцев вытянутых рук, у многих выявлен тремор век и языка. В ряде случаев указанные расстройства сочетались с увеличением щитовидной железы. Имели место также кровоточивость десен, гиперсаливация, гингивиты. Выявлялись снижение гемоглобина и числа эритроцитов, лейкопения, реже — лейкоцитоз, сдвиг в лейкоцитарной формуле, увеличение или уменьшение содержания SH-rpynn крови. [c.180]
Универсальность кода. Было показано, что почти все 64 триплета при их испытании в бесклеточных системах несут какую-то смысловую нагрузку. Это делает естественным предположение, согласно которому какие-то черты генетического кода носят универсальный характер. Более того, гетерологич-ные бесклеточные системы (т. е. системы, содержащие рибосомы из организма одного вида, а транспортные РНК и активирующие ферменты — из организма другого вида) способны синтезировать полипептиды так же эффективно, как и соответствующие гомологичные системы, что опять-таки свидетельствует об универсальности кода. Имеются также косвенные данные, говорящие о том, что смысл данного кодона сохраняется неизменным для разных систем. Наконец,, было показано, что белоксинтезирующая система из Е. olt способна транслировать информацию, содержащуюся в РНК из вируса растений. Данные, полученные в опытах на Е. oli и других бактериях, на вирусах, дролоках, проростках растений, ретикулоцитах кролика, печени крысы, гемоглобине человека и т. д., убедительно подтверждают предполо- [c.499]
Что нужно знать об анемии?
Причиной анемии — самого распространенного заболевания крови, является пониженное содержание гемоглобина в крови. Практически всегда при этом заболевании в крови снижается и содержание эритроцитов.
Часто анемия –результат того, что другие болезни препятствуют способности организма производить здоровые эритроциты или аномальным образом увеличивают потерю или распад эритроцитов.
Согласно оценкам врачей, сегодня эта болезнь затрагивает более 1,6 миллиардов человек во всем мире – примерно четверть населения земного шара.
- Наибольший риск заболевания анемией – у детей в дошкольном возрасте. По оценкам ВОЗ в этой группе населения распространенность анемии составляет 47,4%, то есть анемией больны 293 миллионов детей во всем мире.
- Выявлено более 400 видов анемии.
- Анемия не ограничивается людьми, ею могут болеть кошки и собаки.
Наиболее распространенными симптомами всех типов анемии является чувство усталости, слабость и повышенная утомляемость.
Также характерными симптомами являются:
- бледность кожи
- учащенное и сбивчивое сердцебиение
- прерывистое дыхание и одышка
- боли в груди
- головная боль
- обмороки
- шум в ушах
При легкой анемии симптомы могут проявляться в слабой форме или вовсе отсутствовать.
Некоторые формы анемии могут иметь специфические симптомы:
Апластическая анемия — повышенная температура, частые инфекции и кожные высыпания
Фолиеводефицитная анемия — раздражительность, диарея и «лакированный» язык
Гемолитическая анемия — желтуха, темная моча, повышенная температура и боли в животе
Серповидноклеточная анемия — болезненные отеки рук и ног, усталость и желтуха
Чтобы жить организму нужны эритроциты, которые переносят гемоглобин — комплексный белок, содержащий молекулы железа. Эти молекулы, в свою очередь, распространяют кислород из легких по всему организму.
Низкий уровень эритроцитов может быть вызван целым рядом заболеваний.
Существует множество типов анемии, но единой причины у этого заболевания нет. Точную причину иногда бывает трудно установить.
Ниже приведены причины трех основных групп анемии.
1. Анемия, вызванная потерей крови
Наиболее распространенный тип анемии – железодефицитную анемию — часто включают в эту категорию из-за того, что нехватка железа вызвана потерей крови.
Вследствие потери крови вода из тканей быстро поступает в кровеносное русло – таким способом организм пытается поддержать объем крови в кровеносных сосудах. В результате кровь разбавляется, а процентное содержание эритроцитов, соответственно, уменьшается.
Потеря крови может быть быстрой и острой или хронической.
Острая потеря крови может являться следствием хирургической операции, родов, травм или разорванного кровеносного сосуда..
В случаях анемии чаще встречается хроническая потеря крови, которая может быть вызвана язвами желудка или двенадцатиперстной кишки, раковыми заболеваниями, опухолями.
Анемия из-за потери крови также может быть вызвана в т.ч.:
- геморроем,
- гастритом,
- использованием нестероидных противовоспалительных препаратов (аспирин, ибупрофен и т.п.),
- менструальными кровотечениями.
2. Анемия, вызванная снижением выработки эритроцитов или выработкой дефектных эритроцитов.
Эта анемия характеризуется угнетением или прекращением роста и созревания в костном мозге всех клеток крови — костный мозг вырабатывает стволовые клетки, которые развиваются в эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.
Причинами такого влияния на костный мозг может быть целый ряд заболеваний, включая лейкемию – при этой болезни производится слишком много аномальных лейкоцитов, что в свою очередь препятствует нормальной выработке эритроцитов.
Анемия, вызванная снижением выработки эритроцитов, может развиться под воздействием: химических веществ (мышьяк, соли тяжелых металлов), ионизирующего излучения, лекарственных препаратов, вирусов (например, вирусы гепатита, вирус Эпштайна-Барра) и в результате аутоиммунных процессов.
К числу анемий, вызванных низкой продукцией эритроцитов или дефектными эритроцитами также относятся:
- Серповидноклеточная анемия. Из-за генетического дефекта нарушается образование нормальных цепей гемоглобина в эритроцитах. Образующийся при этом аномальный гемоглобин отличается по своим электрофизиологическим свойствам от гемоглобина здорового человека, в результате чего изменяются и сами эритроциты, приобретая удлиненную форму, под микроскопом напоминающую полумесяц. Такие деформированные клетки могут закупоривать мелкие кровеносные сосуды, вызывая боль, тяжелые осложнения и даже смерть.
- Железодефицитная анемия — нехватка железа, необходимого для нормального синтеза гемоглобина. Причиной может быть плохое питание, менструации, частое донорство крови, заболевания желудочно-кишечного тракта (гастриты, колиты, болезнь Крона, хирургическое удаление части кишечника). Дисбаланс расхода и поступления железа может быть вызван повышенной потребностью организма из-за беременности, хронических заболеваний, провоцирующих гипоксию или сопровождающихся гнойно-некротическими процессами.
- Витаминно-дефицитная анемия. Вызвана дефицитом в организме необходимых для выработки эритроцитов таких витаминов, как фолиевая кислота и В12. Дефицит этих витаминов возникает при нарушении их всасывания в желудочно-кишечном тракте, что может быть обусловлено глистной инвазией, воспалительными заболеваниями желудка и кишечника, дисбактериозом.
Витаминно-дефицитная анемия может быть вызвана и генетическими аномалиями, которые обуславливают нарушение метаболизма витаминов, необходимых для кроветворения.
3. Анемия, вызванная разрушением эритроцитов (гемолитическая анемия)
Обычно эритроциты в кровотоке имеют продолжительность существования в 120 дней, однако их можно уничтожить или удалить раньше срока.
Одним из видов анемии, которая относится к этой категории, является аутоиммунная гемолитическая анемия — когда иммунная система организма ошибочно идентифицирует свои собственные эритроциты как чужеродное вещество и атакует их.
Чрезмерный гемолиз (распад эритроцитов) может возникать по многим причинам, в том числе из-за:
- инфекций
- лекарств (например, некоторых антибиотиков)
- яда змей или пауков
- токсинов, выработанных почками или печенью вследствие заболеваний
- аутоиммунной агрессии (например, вызванной гемолитической болезнью)
- тяжелой гипертензии
- сосудистых трансплантатов, протеза сердечного клапана
- нарушений свертывания крови
- увеличения селезенки
Лечение
Имеется целый ряд методов лечения анемии и все они связаны с увеличением количества эритроцитов. Лечение также зависит от типа анемии.
- Железодефицитная анемия: железосодержащие пищевые добавки или изменение диеты. Если анемия связана с потерей крови, необходимо найти и остановить кровотечение.
- Витаминно-дефицитные анемии: диетические добавки и инъекции витамина B12.
- Талассемия: пищевые добавки с фолиевой кислотой, удаление селезенки, в некоторых случаях — переливание крови и трансплантация костного мозга.
- Анемия, вызванная хроническим заболеванием: конкретного лечения нет, основное внимание уделяется основному заболеванию.
- Апластическая анемия: переливание крови или трансплантация костного мозга.
- Серповидноклеточная анемия: кислородная терапия, обезболивание и внутривенные препараты. Лечение может также включать антибиотики, пищевые добавки с фолиевой кислотой и переливание крови. В западной медицине также используется противоопухолевый препарат – гидроксикарбамид (торговые наименования «Droxia», «Hydrea»).
- Гемолитические анемии: пациенты должны избегать приема некоторых лекарств, им назначают иммунодепрессанты и лечение инфекций. В некоторых случаях может потребоваться плазмаферез.
Факторы риска
Анемия может возникать у любого человека вне зависимости от пола и возраста. Однако некоторые факторы повышают риск заболевания. К таким факторам относятся:
- менструация
- беременность и роды
- преждевременные роды
- возраст от 1 до 2 лет
- питание с низким содержанием витаминов, минералов и железа
- потеря крови из-за операции или травмы
- такие заболевания, как СПИД, диабет, заболевания почек, рак, ревматоидный артрит, сердечная недостаточность и заболевания печени
- наличие в семейной истории наследственных анемий, таких как серповидноклеточная анемия
- кишечные расстройства
Прогноз заболевания
Прогноз зависит от причины анемии — многие случаи анемии можно предотвратить или вылечить всего лишь изменив диету.
Некоторые виды анемии могут тянуться длительное время, а некоторые, без лечения, могут быть опасными для жизни.
Любой человек, который постоянно чувствует себя слабым и усталым, должен обратиться к врачу на предмет наличия анемии.
Диагностика
Наиболее распространенным методом диагностики анемии является общий (клинический) анализ крови (ОАК).
ОАК, как правило, включает в себя от 8 до 30 пунктов: подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов в 1 микролитре или литре крови, а также ряд других показателей, описывающих форму, объем и другие характеристики этих клеток.
ОАК применяют для общей оценки состояния здоровья, он может указать на наличие таких заболеваний лейкемия или болезни почек.
Если уровни эритроцитов, гемоглобина и гематокрита ниже нормы, то вероятна анемия. Тем не менее ОАК — не гарантия окончательного диагноза. В таком случае назначаются дополнительные исследования.
Помните: поставить точный диагноз, назначить лечение может только квалифицированный специалист!
По поводу анемии вы можете обратиться в Профессорскую клинику: по адресу ул. Дружбы, 15а прием пациентов ведет врач-гематолог, кандидат медицинских наук Миронова Алла Владимировна. Лаборатория, помимо клинического анализа крови, также выполняет дополнительные лабораторные тесты необходимые для точной постановки диагноза.
Уточнить информацию, записаться на прием к специалисту можно по единому телефону в Перми 206-07-67, или воспользовавшись сервисом «Запись на прием» на нашем сайте.
Центр Микрохирургии Глаза «Я ВИЖУ»
Получено: 10.10.2020
Хочу выразить благодарность хирургу, Григорьеву Игорю Александровичу, за его квалификацию и золотые руки, профессиональные качества.
В прошлом месяце, делала у Игоря Александровича 2 операции по замене хрусталиков на оба глаза в связи с высокой степенью дальнозоркости. Я не интересовалась темой болезни глаз до этого. Но мое зрение ухудшалось в течение многих лет и с нарастающей прогрессией. Попав в клинику «Я вижу» и только после подробной и качественной консультации Игоря Александровича, я приняла решение делать операцию. Да, до этого я прочитала и даже проконсультировалась в нескольких клиниках и у врачей. Выбор остановился здесь. В моем случае, очень важно выбрать было хирурга и клинику с соответствующим оборудованием.
Я не пожалела. Все сделано отлично, без лишних не реальных обещаний. Т.е., как мне было сказано до операции, какое зрение будет в случае выбора таких-то линз, или таких-то, ровно так все и получилось. Это говорит о профессионализме.
Операции прошли без всяких осложнений, никаких болевых ощущений. Все отлично! В послеоперационном режиме, я так же получала подробные консультации.
Игорь Александрович — профессионал своего дела, и кроме того, доброжелательный доктор (несмотря на то, что кто-то оставил отзыв, что он резкий доктор и грубый, я с этим абсолютно не согласна. В данной работе очень важно концентрироваться, и в нужный момент объяснить пациенту как скорректировать свою позу при операции. И учитывая многие факторы, этот способ объяснения может быть разный, но профессиональный. Именно так себя Игорь Александрович и ведет и на операции и на консультации).
Рекомендую Григорьева И.А., если вы сталкиваетесь с такими же проблемами, как у меня или с другими, где потребуется оперативное вмешательство!
Сама клиника и персонал тоже заслуживает благодарности. Клиника — чистая. большая, удобная, со всем необходимым оборудованием и сертификатами.
Не зря там достаточно много пациентов лечатся.
Спасибо Вам, Игорь Александрович и персоналу клиники «Я вижу»
Гематологические и биохимические показатели крови собак породы «американский бульдог»
Библиографическое описание:Гречкина, В. В. Гематологические и биохимические показатели крови собак породы «американский бульдог» / В. В. Гречкина, М. А. Капралова, А. А. Плеханова. — Текст : непосредственный // Молодой ученый. — 2018. — № 26 (212). — С. 74-77. — URL: https://moluch.ru/archive/212/51806/ (дата обращения: 18.04.2021).
Ключевые слова: животные, гематология, кровь.
Актуальность темы. Исследование крови является важнейшим диагностическим методом. Кроветворные органы чрезвычайно чувствительны к различным физиологическим, и особенно патологическим, воздействиям на организм, поэтому картина крови является отражением этих воздействий. Состав и свойства крови зависят от физиологического состояния организма, возраста, пола, кормления, условий содержания, параметров микроклимата, характера эксплуатации и других факторов. По ее данным можно судить об уровне обменных процессов и состояния здоровья организма. В последнее время все большее распространение получает автоматический анализ крови, который дает дополнительную информацию о состоянии организма. Внедрение в клинику автоматического исследования крови позволило минимизировать ошибки и стандартизировать исследования крови [1].
Целью работы является изучить гематологические и биохимические показатели крови у собак в зависимости от возраста.
На гематологическом анализаторе РСЕ90Vet исследовали основные гематологические параметры: WBC, 109/L — количество лейкоцитов; RBC, 1012 /L — количество эритроцитов; HGB, g/L — гемоглобин; HCT, % — гематокрит; MCV, fL — средний эритроцитарный объем; PLT, ×109/L — количество тромбоцитов. Биохимические исследования проводились на приборе «Стат-Факс».
Результаты исследований. Любой организм в соответствии с генотипом даже при наличии экстремальных условий обладает способностью сохранять постоянство гомеостаза. Очевидно, поэтому гематологические, биохимические и другие показатели различных систем отличаются стабильностью, подвергаясь под воздействием внешней среда лишь модификационной изменчивости, проявляющейся в незначительных отклонениях от нормы. На гематологические, биохимические и другие показатели существенное влияние оказывает не только физиологическое состояние животного (возраст, беременность, продуктивность), но и условия кормления, содержания, эксплуатации, а также среда обитания. Вместе с тем картина крови сохраняет свои индивидуальные и видовые особенности [2].
Собака имеет нейтрофильный профиль крови. В норме в небольших количествах даже у взрослых особей, встречаются полихроматофилы и ретикулоциты, а иногда эритроциты с тельцами Жоли и даже нормобласты. У данного вида выражены, как и у лошади, породные различия в составе красной крови. Гончие собаки имеют более высокое содержание эритроцитов и уровень гемоглобина.
Таблица 1
Гематологические показатели крови собак породы Американский бульдог
Показатели | Тори | Овация | Моника | Норма |
WBC, 109/L | 6,8 | 9,4 | 12,3 | 6–17 |
RBC, 10¹²/L | 6,47 | 7,55 | 8,54 | 5,5–8,5 |
HGB, g/L | 145 | 182 | 186 | 120–200 |
HCT, % | 45,1 | 62,2 | 60,5 | 37–55 |
PLT, 109/L | 266 | 384 | 255 | 200–460 |
Характеризуя полученные анализы по гематологии можно сказать, что у собаки по имени Тори показатели в рамках нормы. У Овации идет увеличение гематокрита на 7,2 %, а у Монике также повышен гематокрит на 5,5 %.
Рис. 1. Концентрация общего белка в сыворотке крови, г/л
Сравнивая полученные результаты по биохимическим показателям с нормой можно сказать, что у собаки по имени Овация общий белок повышен на 31,7 г/л, при этом у Моники был выше на 34,4 г/л. Повышение белка может наблюдаться при: острых и хронических инфекционных заболеваниях, онкологических заболеваниях, обезвоживание организма.
Рис. 2. Концентрация глюкозы в сыворотке крови, ммоль/л
Характеризуя полученные данные можно сказать, что у собаки по имени Тори идет не хватка глюкозы в сыворотки крови на 3,7 ммоль/л, у Овации так же понижены показатели по глюкозе на 5,9 ммоль/л.
Рис. 3. Содержание кальция в сыворотки крови собак, ммоль/л
Рис. 4. Содержание фосфора в сыворотке крови собак, ммоль/л
По результатам исследования сыворотки крови, содержание фосфора и кальция можно сделать вывод, что показатели находились в пределах нормы.
Вывод. Таким образом, анализ крови у собак такой же показательный, как и у человека. Его расшифровка способна показать скрытые заболевания, нарушения режима кормления и содержания животного. Именно при помощи этого вида диагностики можно обнаружить тяжелейшие заболевания на ранней стадии.
Литература:
- Методологические основы оценки клинико-морфологических показателей крови домашних животных: Учебное пособие / Е. Бажибина, А. Коробов, С. Середа, В. Сапрыкин // — М.: Аквариум, 2004. 126 с.
- Биохимические показатели у кошек и собак: Книга / Ю. В. Конопатое, В. В. Рудаков // Санкт-Петербургская государственная Академия ветеринарной медицины. 2000.
- Б. В. Уша, Г. М. Крюковская, Т. Б. Горовая, С.Э..Жавнис. Биохимические показатели крови у собак при гастрите. МГУПБ Журнал «Ветеринария» № 12. 2006 г.
Основные термины (генерируются автоматически): HCT, HGB, PLT, RBC, WBC, сыворотка крови, MCV, картина крови, общий белок, содержание фосфора.
У человека нашли только три гена, отличающие его от шимпанзе: Наука и техника: Lenta.ru
Люди любят рассматривать фотографии животных. Кошки, собаки, лошади, ламы — все они, особенно детеныши, кажутся нам очень симпатичным. Однако мало кто называет симпатичными или милыми обезьян, особенно высших приматов. Эти звери выглядят как пародия на человека. Явные черты сходства, перемешанные с отчетливо животными признаками, вызывают смешанные чувства.
Человек и обезьяна действительно похожи. На уровне ДНК сходство между Homo sapiens и Pan troglodytes — шимпанзе — превышает 98 процентов. В цифрах эта разница кажется не такой маленькой: из трех миллиардов «букв» человеческого генома целых 60 миллионов являются уникальными для H. sapiens. В данном случае цифры создают ложное представление о пропасти, отделяющей человека от обезьяны. Практически все гены этих двух групп организмов отличаются лишь незначительными вариациями последовательности ДНК.
Ученые до сих пор не могут объяснить, как эти небольшие генетические отличия смогли обеспечить колоссальный эволюционный прыжок от обезьяны к человеку. Первый ответ, который приходит в голову, — последовательности, характерные для H. sapiens, составили в его геноме в особые «гены человечности». Однако на практике эта теория не подтверждается: исследователи не обнаружили у человека уникальных генов. Все гены H. sapiens эволюционировали из генов общего с шимпанзе предка. Авторы нового исследования впервые обнаружили целых три исключения из этого правила.
Эволюция на генном уровне
Прежде чем описывать новое открытие, стоит чуть подробнее рассказать, как именно происходит эволюция генетических последовательностей. Геномы самых первых живых организмов, появившихся на нашей планете, содержали всего несколько сотен генов. Чтобы размножаться, первые жители Земли делили свое тело, состоящее из единственной клетки, надвое. Каждый из потомков получал по одной копии родительского генома. Копирование ДНК «папы» (или «мамы») происходило с ошибками — некоторые гены терялись, а другие, напротив, появлялись в удвоенном варианте. В некоторых случаях «лишние» гены не приводили к смерти хозяина. Они сохранялись в цепочке поколений и постепенно мутировали. Через несколько десятков сотен копирований последовательность таких генов изменялась до неузнаваемости. Соответственно, менялась и последовательность кодируемых генами белков. Постепенно строение живых существ усложнялось, но механизмы образования новых генов оставались неизменными.
В некоторых случая новые гены появлялись без удвоения старых — мутации появлялись и в генах, представленных в единственной копии. Если изменения не ухудшали жизнеспособность организма, они могли сохраняться в череде поколений. В конце концов в гене накапливалось критическое число таких нейтральных или положительных мутаций, и у кодируемого белка появлялись новые функции.
Еще один способ образования новых генов — это потеря части последовательности. Укороченный ген иногда продолжал работать не хуже полноценной копии, кроме того, место утраченных «букв» могли занимать соседние последовательности ДНК. Еще один вариант рождения новых генов — «сращивание» старых друг с другом или их расщепление.
Во всех описанных случаях гены не создаются de novo: основой для них всегда служат уже существующие у организма варианты. Биологи были уверены в этом факте вплоть до 2006 года, когда в журнале Proceedings of the National Academy of Sciences появилась статья группы исследователей, работавших с плодовой мушкой Drosophila melanogaster.
Авторы обнаружили в геноме дрозофилы целых пять генов, которых нет у ее ближайших родственников. Все они образовались из так называемой «мусорной» ДНК (junk DNA). Этим нелицеприятным эпитетом ученые обозначают не кодирующие белки последовательности ДНК, функция которых неизвестна. Термин был предложен в 1972 году американским генетиком японского происхождения Сусуму Оно (Susumu Ohno) и с тех пор прижился. У развитых организмов «мусорная» ДНК составляет более 95 процентов генома.
После выхода «мушиной» работы биологи бросились искать уникальные гены у других организмов. Однако к настоящему моменту их удалось обнаружить только у дрожжей. Тем не менее, авторы нового исследования под руководством Ифы Маклайсэт (Aoife McLysaght) из Тринити колледжа в Дублине задались целью найти новые гены у человека.
Ключи к человечности
Маклайсэт и ее коллеги сравнили геномы H. sapiens и P. troglodytes. Используя специальные программы, они сопоставляли последовательности известных на сегодняшний день генов человека и шимпанзе. Авторы обнаружили в геноме человека 644 гена, не имеющих аналогов у шимпанзе.
Порядок расположения генов у шимпанзе и человека практически не отличается. Исследователи пристально изучили области обезьяньего генома, где могли бы располагаться подозрительные последовательности. В существующих базах данных ДНК P. troglodytes в некоторых из этих мест отсутствовали большие куски кода, поэтому исследователям пришлось исключить из рассмотрения 425 из найденных 644 генов.
На следующей стадии работы ученые провели повторный поиск оставшихся 219 последовательностей в геноме шимпанзе, используя немного иной алгоритм. У 150 предположительно уникальных человеческих генов в геноме P. troglodytes обнаружились аналоги. Таким образом, «круг подозреваемых» сузился до 69 генов. Ученые вычеркнули из этого списка последовательности, которые были обнаружены в геномах других видов, кроме шимпанзе. Наконец, Маклайсэт и ее соавторы отказались от генов, которые были представлены только в одной базе данных человеческой ДНК и могли попасть туда по ошибке.
Все стадии отбора прошли только три гена — CLLU1, C22orf45 и DNAh20OS. Чтобы еще раз убедиться в их уникальности для человека, исследователи проверили геномы макаки, гиббона и гориллы. Последовательности, напоминающие CLLU1, C22orf45 и DNAh20OS, были обнаружены у всех изученных приматов, однако являться полноценными генами они не могли и присутствовали в «мусорной» ДНК.
Для того чтобы считаться геном, последовательность должна содержать определенные сочетания «букв», в частности, отмечающих конец и начало гена. Такие характерные «буквосочетания» узнаются ферментами, отвечающими за синтез белка с этого гена. У макаки, шимпанзе, гиббона и гориллы характерных для генов отличительных признаков не было. Более того, у них имелись участки, мешающие полноценной работе ферментов. Причем у всех приматов (кроме человека) эти участки были одинаковыми.
Исследователи предположили, что в ходе эволюции человека в некоторых регионах «мусорной» ДНК, присутствующих у приматов, накопились необходимые изменения, которые позволили им стать настоящими генами. Именно работа этих генов привела к появлению рода Homo.
Из-за пробелов в генетических базах данных и очень строгих критериев отбора ученые смогли полноценно изучить только 20 процентов из исходно отобранных генов. Соответственно, в будущем, когда дыры будут заполнены, авторы рассчитывают обнаружить еще как минимум 15 уникальных генов. Пока же авторы сосредоточились на поиске белков, кодируемых «человеческими» генами. В работах других исследовательских групп было показано, что белки с этих последовательностей синтезируются, однако какова может быть их функция, на данный момент не совсем ясно. Если Маклайсэт и коллегам удастся это узнать, то человечество, возможно, чуть-чуть приблизится к ответу на вопрос, чем же отличается человек от обезьяны.
О мусоре и РНК
На самом деле, частичный ответ на этот вопрос ученые знают. Результаты множества исследований, посвященных поискам разницы между человеком и обезьяной, указывают, что секрет кроется не в последовательности белков, а в регуляции их работы. Причем контролировать работу человеческого генома и белков могут не только регуляторные белки, но также особые молекулы РНК. Кодирующие эти молекулы гены также расположены в «мусорной» ДНК. Так что и мусор иногда бывает полезен.
Искусственная кровь для собак | Научные отчеты
Японская ассоциация кормов для домашних животных. Результаты исследования популяции собак и кошек в Японии, 2015 г. http://www.petfood.or.jp/data/chart2015/01.html (2016) (дата обращения: 07.11.2016).
Статистическое управление Министерства внутренних дел и коммуникаций. Оценка населения (май 2016 г.). www.stat.go.jp/english/data/jinsui/tsuki/index.htm (2016) (дата обращения: 07.11.2016).
Петерс младший Т.Все об альбумине, биохимии, генетике и медицинском применении (Academic Press, 2006).
Fanali, G. et al. Сывороточный альбумин человека: от скамейки к постели. Мол. Asp. Med. 2012. Т. 33. С. 209–290.
Артикул CAS Google Scholar
Pandjaitan, B. et al. Escherichia coli Экспрессия и очистка рекомбинантного собачьего альбумина, перекрестно-реактивного аллергена животных. J. Allergy Clin. Иммунол.105, 279–285 (2000).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Гигер, У., Геленс, К. Дж., Каллан, М. Б. и Окли, Д. А. Острая гемолитическая трансфузионная реакция, вызванная несовместимостью эритроцитарного антигена-1.1 собаки у ранее сенсибилизированной собаки. Варенье. Вет. Med. Доц. 206, 1358–1362 (1995).
CAS PubMed Google Scholar
Сквайрс, Дж.E. Искусственная кровь. Science 295, 1002–1005 (2002).
Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ CAS PubMed Google Scholar
Ким, Х. В. и Гринбург, А. Г. Искусственные переносчики кислорода в качестве заменителей эритроцитов: избранный обзор и текущее состояние. Изобразительное искусство. Органы 28, 813–827 (2004).
Артикул CAS Google Scholar
Яр, Дж. Х., Садыги, А., Доэрти, Л., Ли, А. и Ким, Х.У. Переносчики кислорода на основе гемоглобина: история, ограничения, краткое изложение современного состояния, включая клинические испытания в области химии и биохимии кислородной терапии: от переливания до искусственной крови (ред. Беттати, С. И Моцарелли А.) стр. 301–316 (John Wiley & Sons, 2011).
Kluger, R. & Lui, F. E. HBOCs от химической модификации Hb в переносчиках кислорода на основе гемоглобина в качестве заменителей эритроцитов и кислородных терапевтических средств (под редакцией Kim, H.W. & Greenburg, A.G.) с. 159–183 (Springer-Verlag, 2013).
Vandegriff, K. D., Malavalli, A., Wooldridge, J., Lohman, W. & Winslow, R. M. MP4, новый невазоактивный конъюгат PEG-Hb. Переливание крови 43, 509–516 (2003).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Manjula, B. N. et al. Сайт-специфическое ПЭГилирование гемоглобина по Cys-93 (β): корреляция между коллигативными свойствами ПЭГилированного белка и длиной конъюгированной цепи ПЭГ.Bioconjugate Chem. 14, 464–472 (2003).
Артикул CAS Google Scholar
Li, D., Hu, T., Manjula, BN & Acharya, SA Плечи-удлинители способствовали пегилированию αα-гемоглобина с модификациями, нацеленными исключительно на аминогруппы: функциональные и структурные преимущества свободного Cys-93 (β) в аддукт PEG-Hb. Bioconjugate Chem. 20, 2062–2070 (2009).
Артикул CAS Google Scholar
Бюлер, П.W. et al. Структурно-функциональная характеристика бычьего гемоглобина, полимеризованного глутаральдегидом, и его выделенных фракций. Анальный. Chem. 77, 3466–3478 (2005).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Chatterjee, R. et al. Выделение и характеристика нового производного гемоглобина, поперечно сшитого между α-цепями (лизин 99α1 → лизин 99α2). J. Biol. Chem. 261, 9929–9937 (1986).
CAS PubMed Google Scholar
Ху, Д.И Клугер, Р. А. Функциональные сшитые бис-тетрамеры гемоглобина: геометрия и кооперативность. Биохимия 47, 12551–12561 (2008).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Пирс, Л. Б., Гаврил. М. С., Рентко, В. Т., Мун-Массат, П. Ф. и Рауш, К. В. HBOC-201 (гемоглобин глутамер-250) (бычий), Hemopure ® : клинические исследования кровезаменителей (Эд Уинслоу, Р. М.) с. 437–450 (Elsevier, 2006).
Уинслоу, Р. М. Бесклеточные переносчики кислорода: научные основы, клинические разработки и новые направления. Биохим. Биофиз. Acta 1784, 1382–1386 (2008).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Chen, J. Y., Scerbo, M. & Kramer, G. Обзор кровезаменителей: изучение истории, результатов клинических испытаний и этики переносчиков кислорода на основе гемоглобина. Clinics 64, 803–813 (2009).
PubMed PubMed Central Статья Google Scholar
Натансон, К., Керн, С. Дж., Лурье, П., Бэнкс, С. М. и Вулф, С. М. Бесклеточные кровезаменители на основе гемоглобина и риск инфаркта миокарда и смерти. Варенье. Med. Доц. 299, 2304–2312 (2008).
Артикул CAS Google Scholar
Доэрти, Д. Х. и др. Скорость реакции с оксидом азота определяет гипертонический эффект бесклеточного гемоглобина.Nat. Biotechnol. 16. С. 672–676 (1998).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Ю. Б., Блох, К. Д. и Запол, В. М. Заменители эритроцитов на основе гемоглобина и оксид азота. Тенденции Кардиоваск. Med. 19, 103–107 (2009).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Клюгер Р. Заменители красных кровяных телец из гемоглобина — мы начинаем все сначала? Curr.Opin. Chem. Биол. 14. С. 538–543 (2010).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Алаяш А.И. Кровезаменители: почему мы не добились большего успеха? Trends Biotechnol. 2014. Т. 32. С. 177–185.
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Дриссен, Б., Яр, Дж. Х., Лурье, Ф., Гриффери, С. М. и Гюнтер, Р. А. Влияние гемоглобина-переносчика кислорода глутамера-200 на основе гемоглобина на кишечную перфузию и оксигенацию на модели гиповолемии у собак.Br. J. Anaesth. 86, 683–692 (2001).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Buehler, P. W. et al. Структурно-функциональная характеристика бычьего гемоглобина, полимеризованного глутаральдегидом, и его выделенных фракций. Анальный. Chem. 77, 3466–3478 (2007).
Артикул CAS Google Scholar
Европейское агентство по лекарственным средствам. Оксиглобин. http: // www.ema.europa.eu/docs/en_ GB / document_library / EPAR _-_ Summary_for_the_public / veterinary / 000045 / WC500068122.pdf # search = ‘oxyglobin + side + effects’ (2007) (Дата обращения: 11.07.2016).
Tomita, D. et al. Ковалентная структура ядра и оболочки гемоглобина и сывороточного альбумина человека как искусственного носителя O2. Биомакромолекулы 14, 1816–1825 (2013).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Хосака, Х., Харуки, Р., Yamada, K., Böttcher, C. & Komatsu, T. Кластер гемоглобина-альбумина, включающий наночастицу Pt: искусственный носитель O2 с антиоксидантной активностью. PLoS One 9, e110541 (2014).
PubMed PubMed Central Статья ОБЪЯВЛЕНИЯ CAS Google Scholar
Кимура, Т., Шинохара, Р., Бёттчер, К. и Комацу, Т. Кластеры ядро-оболочка человеческого гемоглобина А и человеческого сывороточного альбумина: искусственные носители O2, имеющие различное сродство к O2.J. Mater. Chem. В 3, 6157–6164 (2015).
Артикул CAS Google Scholar
Haruki, R. et al. Оценка безопасности гемоглобин-альбуминового кластера «ГемоАкт» как заменителя эритроцитов. Sci. Отчет 9, 12778 (2015).
Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ CAS Google Scholar
Кон, Л. А., Керл, М. Е., Ленокс, К. Э., Ливингстон, Р. С. и Додам, Дж. Р. Ответ здоровых собак на инфузию сывороточного альбумина человека.Являюсь. J. Vet. Res. 68, 657–663 (2007).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
UniProt KB-P49822 (ALBU_CANLF) для CSA и UniProt KB-P02768 (ALBU_HUMAN) для HSA.
He, X. & Carter, D. C. Атомная структура и химия сывороточного альбумина человека. Nature 358, 209–215 (1992).
Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ CAS PubMed Google Scholar
Карри, С., Mandelkow, H., Brick, P. & Franks, N. Кристаллическая структура человеческого сывороточного альбумина в комплексе с жирной кислотой показывает асимметричное распределение сайтов связывания. Nat. Struct. Биол. 5, 827–835 (1997).
Артикул CAS Google Scholar
Бхаттачарья, А. А., Карри, С. и Фрэнкс, Н. П. Связывание общих анестетиков пропофола и галотана с сывороточным альбумином человека. J. Biol. Chem. 275, 38731–38738 (2000).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Sugio, S., Кашима, А., Мочизуки, С., Нода, М., Кобаяши, К. Кристаллическая структура человеческого сывороточного альбумина при разрешении 2,5 Å. Protein Eng. 12. С. 439–446 (1999).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Ghuman, J. et al. Структурные основы лекарственной специфичности сывороточного альбумина человека. J. Mol. Биол. 353, 38–52 (2005).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Майорек, К.A. et al. Структурная и иммунологическая характеристика альбуминов сыворотки крупного рогатого скота, лошади и кролика. Мол. Иммунол. 2012. Т. 52. С. 174–182.
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Антонини, Э. и Брунори, М. Гемоглобин и миоглобин в их реакциях с лигандами. Исследовательские монографии Северной Голландии. Границы биологии, т. 21 (редакторы Neuberger, A. & Tatum, E. L.) п. 13–39 (North-Holland Pub. Co., 1971).
Google Scholar
Муэзер, Т. К., Роджерс, П. Х. и Арноне, С. Скольжение границы раздела, как показано на множественных четвертичных структурах лигандированного гемоглобина. Biochemistry 39, 15353–15364 (2000).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Чжан, Ю., Бхатт, В. С., Сун, Г., Ван, П. Г., Палмер, А.F. Сайт-селективное гликозилирование гемоглобина по Cys 93. Bioconjugate Chem. 19, 2221–2230 (2008).
Артикул CAS Google Scholar
Клугер, Р. и Чжан, Дж. Дендримеры гемоглобина: функциональные белковые кластеры. Варенье. Chem. Soc. 125, 6070–6071 (2003).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Ху, Д. и Клугер, Р. А. Функциональные сшитые бис-тетрамеры гемоглобина: геометрия и кооперативность.Биохимия 47, 12551–12561 (2008).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Коса Т., Маруяма Т. и Отагири М. Видовые различия сывороточных альбуминов: I. Сайты связывания лекарств. Фармацевтика. Res. 14, 1607–1612 (1997).
Артикул CAS Google Scholar
Rohlfs, R.J. et al. Реакция артериального давления на растворы бесклеточного гемоглобина и реакция с оксидом азота.J. Biol. Chem. 273, 12128–12134 (1998).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Интаглиетта М. Факторы микрососудистого транспорта в разработке эффективных кровезаменителей при микроциркуляторном эффекте растворов гемоглобина (ред. Мессмер К., Бурхоп К. Э. и Хаттер Дж.) С. 8–15 (Karger AG, 2004).
Ямада, К. и др. Влияние молекулярной структуры на O2-связывающие свойства и кровообращение кластеров гемоглобин-альбумин.PLoS One 11, e0149526, 1–15 (2016).
Google Scholar
Реннен, Х. Дж. Дж. И др. Влияние молекулярной массы на неспецифическое накопление 99m Т-меченых белков в очагах воспаления. Nucl. Med. Биол. 28. С. 401–408 (2001).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Grassetti, D. R. & Murry, Jr. J. F. Определение сульфгидрильной группы с помощью 2,2′- или 4,4′-дитиопиридина.Arch. Biochem. Биофиз. 119, 41–49 (1967).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Otwinowski, Z. & Minor, W. Обработка данных дифракции рентгеновских лучей, собранных в режиме колебаний. Методы Энзимол. 276, 307–326 (1997).
Артикул CAS PubMed Google Scholar
Adams, P. D. et al. PHENIX : комплексная система на основе Python для решения макромолекулярных структур.Acta Cryst. Д 66, 2010. С. 213–221.
Артикул CAS Google Scholar
Sivertsen, A. et al. Синтетические катионные антимикробные пептиды связываются своими гидрофобными частями с участком II лекарственного средства сывороточного альбумина человека. BMC Struct. Биол. 14, 4 (2014).
PubMed PubMed Central Статья CAS Google Scholar
Эмсли, П., Локамп, Б., Скотт, В.G. & Cowtan, K. Особенности и развитие Coot. Acta Cryst. Д 66, 486–501 (2010).
Артикул CAS Google Scholar
Различие между кровью человека и животного путем ослабленного полного отражения с помощью инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье
В этом исследовании ATR FT-IR спектроскопия была объединена с расширенным статистическим анализом, чтобы отличить кровь человека от крови ряда видов животных. Это исследование является продолжением ранее опубликованной работы, в которой было проведено различие между образцами крови человека, кошки и собаки 23 .Чтобы расширить ранее опубликованную работу, мы расширили библиотеку, включив в нее дополнительные виды (кролик, лошадь, корова, свинья, опоссум и енот) и добавили внешние виды (олень, лось и хорек) для прогнозов.
Спектральный анализ
ATR FT-IR спектры крови (рис. 1), полученные от разных видов, были очень похожи и содержали одинаковое количество полос в одних и тех же положениях. Использовались спектральные диапазоны 4000–2800 и 1800–600 см. –1 , поскольку они показали вклад в биохимический состав биологических образцов 25,26 .Для биологических образцов наблюдались следующие характерные спектральные особенности FT-IR: липиды (3000–2800 см, –1 ), белки (1700–1500 см, –1 ), нуклеиновые кислоты (1250–1000 см, –1 ). ) и углеводы (1000–800 см –1 ) 27,28 . Таблица 1 содержит характерные распределения полос молекулярных колебаний для ИК-Фурье спектров крови. Поскольку различие между спектрами при визуальном осмотре было невозможно, использовался расширенный статистический анализ.
Рис. 1: Усредненные необработанные ИК-Фурье спектры НПВО крови для разных видов.Спектральные диапазоны: 4000–2800 и 1800–600 см –1 .
Таблица 1 Распределение инфракрасных диапазонов в крови человека.GA был использован для выбора наиболее информативных спектральных областей (рис. 2 и дополнительная таблица 1) для различения спектров ATR FT-IR крови человека и животных. В выбранных регионах наибольший вклад в дифференциацию вносили белки, в основном амид I при 1650 см -1 , липиды и белки при 1390 см -1 , нуклеиновые кислоты и углеводы, такие как глюкоза при 1082 см −1 .
Рис. 2: Усредненные необработанные спектры НПВО и ИК-Фурье крови человека (красный) и крови животных (зеленый).Избранные спектральные области были выбраны с помощью генетического алгоритма.
К сожалению, различия в составе крови у разных видов малоизвестны. Некоторые из изученных видов имеют разную концентрацию гемоглобина, углеводов (в основном глюкозы), различных гормонов и ферментов 29 . Кроме того, группы крови у разных видов различаются 30 .Морфометрия эритроцитов, включая диаметр, окружность и поверхность эритроцитов, также варьируется у разных видов 31 . Однако каких-либо специфических различий между изученными видами не обнаружено.
Дифференциация крови человека и животного с использованием ATR FT-IR спектроскопии
После предварительной обработки спектров была построена бинарная модель PLSDA с использованием шести латентных переменных (LV) для классификации ATR FT-IR спектров крови человека и животных. Результаты прогнозирования перекрестной проверки (CV) для образцов человеческого класса можно найти на рис.3. Классу людей присвоено значение 1, и все спектры крови человека должны располагаться на графике близко к 1 и выше порогового значения (красная пунктирная линия). Спектры в классе животных должны быть расположены ниже порога и близки к 0 на графике. График прогнозирования CV показал только один спектр крови человека, ошибочно отнесенный к классу животных. Прогнозы на уровне доноров не указывают на неправильную классификацию. Когда вторая модель была построена с использованием пяти LV, график прогнозирования CV продемонстрировал полное разделение между спектрами ATR FT-IR крови человека и животных, и никаких ошибочных классификаций не наблюдалось (дополнительный рис.1). Модель показала 100% точность различения классов людей и животных с использованием спектров крови ATR FT-IR.
Рис. 3: Результаты перекрестно подтвержденного прогноза для класса людей с использованием модели PLSDA человек-животное с шестью скрытыми переменными из образцов крови.Каждый символ соответствует индивидуальному спектру НПВО ИК-Фурье с 10 спектрами на донор. Спектры крови человека показаны красными ромбами, а спектры крови животных показаны зелеными квадратами. Красная пунктирная линия — порог для классификации спектров по классу людей.Неправильно классифицирован только один спектр из человеческой выборки.
Внешняя проверка на дискриминацию человека и животных
После того, как модели PLSDA были созданы и показали хорошие внутренние предсказательные способности, они были проверены на внешнем уровне с использованием новых доноров тех же видов, которые использовались в калибровочном наборе, и внешних видов, которые не были включены в Обучающий набор. График строгого прогнозирования класса для внешних образцов с использованием модели PLSDA с шестью LV показан на рис. 4. Классу человека было присвоено значение 1, что означало, что все спектры крови человека должны быть выровнены с 1 на графике.Классу животных было присвоено значение 2, что означало, что все спектры крови животных должны быть выровнены с 2 на графике. Спектры внешних предсказаний показаны по видам (несколько видов в классе животных). По результатам прогнозирования модели PLSDA человек-животное с шестью LV, все 50 спектров крови человека были правильно классифицированы во внешней проверке. Глядя на внешнюю валидацию класса животных с видами, использованными в наборе обучающих данных, 239 из 240 спектров крови животных были правильно классифицированы.Один спектр, который был ошибочно классифицирован в классе людей, принадлежал еноту. Однако, когда прогнозы были сделаны на уровне донора, все образцы животных были предсказаны правильно. Результаты внешних проверок приведены в таблице 2. Результаты прогноза для второй модели PLSDA с пятью LV показаны на дополнительном рисунке 2 и в дополнительной таблице 2. Согласно результатам прогнозирования модели PLSDA человека и животного с пятью LV, 49 из 50 спектров крови человека были правильно классифицированы при внешней валидации.Один спектр внешнего образца человека был классифицирован неправильно. Однако, когда классификации были сделаны на уровне доноров, все человеческие образцы были классифицированы правильно. Глядя на внешнюю валидацию класса животных с видами, использованными в наборе обучающих данных, 237 из 240 спектров крови животных были правильно классифицированы. Три спектра, которые на самом деле были получены от енотов, были ошибочно отнесены к человеческому классу. Однако, когда классификации были сделаны на уровне доноров, все образцы животных были классифицированы правильно.
Рис. 4: Результаты строгого предсказания класса с помощью модели PLSDA человек-животное с шестью скрытыми переменными для образцов крови.Спектрам крови человека (красные ромбы) присваивается значение 1, а спектрам крови животных (зеленые квадраты) присваивается значение 2. Все спектры внешних образцов находятся в правой части графика (номера спектров 661–1040) .
Таблица 2 Результаты прогнозирования внешних выборок с помощью модели PLSDA человек-животное с использованием шести скрытых переменных.Кроме того, для прогнозов с помощью обеих моделей PLSDA использовались три внешних вида из-за пределов обучающего набора данных, с тремя донорами каждый.Ни один из спектров крови оленей, лосей или хорьков не был классифицирован как образцы крови человека (рис. 4 и дополнительный рис. 2). Эти образцы новых видов не были отменены, потому что биохимические различия между видами все еще недостаточно хорошо известны. Однако наиболее важным моментом для криминалистических целей является то, что ни один из спектров не был отнесен к человеческому классу. Результаты внешних проверок приведены в Таблице 2 и Дополнительной Таблице 2. Здесь очень важно отметить, что кровь хорька может привести к ложноположительной идентификации как кровь человека с использованием некоторых текущих судебно-медицинских тестов для идентификации крови человека 8 .Наш метод не дал ложноположительных результатов для этого вида. Эти результаты показывают, что этот подход обладает отличной способностью различать образцы крови человека и животных с использованием спектров ATR FT-IR крови.
Две построенные здесь модели показали отличные результаты как для внутренних, так и для внешних методов проверки. Хотя модель с пятью LV показала идеальные внутренние результаты CV (100% чувствительность и специфичность), она привела к четырем ошибочно классифицированным спектрам, включая один спектр крови человека, из общего количества 290 спектров для первой части внешней проверки, когда использовались новые образцы. .Когда модель была построена с использованием шести LV, результаты внутреннего CV показали один неправильно классифицированный спектр крови из 660 спектров. Однако только один спектр крови животного был ошибочно классифицирован из общего количества 290 спектров, использованных в первой части внешней проверки. Что наиболее важно, все спектры из внешних образцов крови человека были предсказаны правильно. Кроме того, обе модели не показали неправильной классификации внешних видов животных из-за пределов набора обучающих данных к человеческому классу.
Благодаря выдающимся характеристикам этого метода и неразрушающему характеру, этот метод перспективен для применения в практической криминалистике для идентификации крови человека.Еще одним преимуществом этого метода является возможность анализа на месте с использованием портативных инструментов. Эти аспекты делают этот метод перспективным для судебно-медицинской экспертизы следов биологических жидкостей на местах преступления. В этом исследовании сухую кровь соскребали со предметного стекла и наносили на кристалл НПВО для анализа. Это позволило исключить интерференцию стеклянной подложки. Аналогичный подход можно использовать для пятен крови на других субстратах при условии, что присутствует достаточное количество крови. Кроме того, мы планируем работать над альтернативным подходом в будущем, который будет включать прямые измерения ATR FT-IR по следам пятен крови на различных подложках.Доступны коммерческие ИК-Фурье спектрометры НПВО, которые позволяют проводить такие прямые измерения. Кроме того, аналогичные спектральные характеристики пятен крови могут быть получены с использованием других спектроскопических методов, включая инфракрасную спектроскопию диффузного отражения и ИК-Фурье-спектроскопию внешнего отражения 32,33 . Однако сигнал от подложки влияет на измеряемые спектры, и это необходимо учитывать. Подобная проблема была решена, когда спектроскопия комбинационного рассеяния использовалась для идентификации биологических пятен на различных мешающих субстратах 34,35 .Совсем недавно был разработан многомерный статистический подход для обнаружения следовых количеств спермы на сильно мешающих субстратах с использованием рамановской спектроскопии 36 .
Общие сведения об анализах крови для собак
Общие сведения о анализах крови собак
Анализ крови или лабораторный анализ позволяют нам узнать информацию о здоровье вашей собаки, которую можно получить, только взяв образец крови и проанализировав его. Это включает в себя общий анализ крови (общий анализ крови) и биохимический анализ крови, в котором анализируются химические компоненты в крови.
Общий анализ крови для собак определяет и количественно определяет лейкоциты, эритроциты и тромбоциты в заданном количестве крови. Это включает в себя анализ формы и состояния клеток на предмет их здоровья и функциональности. Эта информация поможет узнать больше об иммунной системе вашей собаки (лейкоциты) и способности переносить кислород (количество красных кровяных телец).
Кроме того, анализы крови собак также могут определить:
- Глюкоза
- Белки
- Электролиты
- Холестерин
- Уровни эндокринной системы
- Пищеварительные ферменты
Поскольку химические вещества, обнаруженные в кровотоке, также могут коррелировать с конкретными органами, лабораторные работы с собаками могут помочь определить не только анализ крови.Например, если анализы крови собаки показывают недостаточность уровня альбумина, то ветеринар знает, что нужно исследовать печень собаки, потому что в печени вырабатывается альбумин
Лабораторная работа для собак также может помочь выявить сложные проблемы с системами организма. Например, анализы крови у собак могут выявить аномальные гормонально-химические реакции на внешние и внутренние раздражители, что предупреждает ветеринара о потенциальной проблеме с эндокринной системой пациента
Итак, при таком понимании анализы крови собак служат очень ценными инструментами в наборе инструментов ветеринара, помогающими обнаруживать, идентифицировать, диагностировать и даже лечить болезнь или заболевание.
Когда ветеринар порекомендует анализы крови собак?
В следующих ситуациях может потребоваться анализ крови собаки:
- При первом посещении ветеринара: Мы рекомендуем щенкам сдать анализ крови, чтобы исключить врожденные заболевания, получить исходную информацию и пройти предварительное анестезиологическое обследование перед стерилизацией или кастрацией
- Во время полугодовых оздоровительных осмотров: Это рекомендуется, если ваш ветеринар предлагает это как часть тщательного медицинского осмотра, потому что анализ крови собаки, наряду с другими биологическими жидкостями, такими как моча, может помочь определить условия, при которых обследуемая часть физического лица не может
- Если собака кажется не совсем подходящей: Анализы крови собак подходят для собаки, у которой нет явных признаков болезни, болезни или травмы, но которая ведет себя ненормально
- Предоперационные анализы: Анализ крови собаки используется для определения эффективности работы печени и почек, что помогает ветеринару выбрать наиболее безопасную дозу анестезии.Тесты также могут помочь определить уровень хирургического риска у больных, пожилых или травмированных
- Перед началом приема нового лекарства: В частности, новое лекарство может метаболизироваться в печени или почках
- Во время осмотров пожилых людей: Анализы крови собак обычно рекомендуются для взрослых, пожилых и престарелых собак в рамках их периодических осмотров здоровья. Это чрезвычайно полезно, поскольку мы часто видим, как пожилые собаки возвращаются к более молодому состоянию, когда анализы крови выявляют проблему, которую можно легко вылечить
Хотя наша собственная собачья лаборатория может обрабатывать любой тип анализа крови или посева крови собак, некоторые из наиболее распространенных лабораторных работ для собак, которые мы выполняем, следующие:
- Анализ мочи: Мы оцениваем мочу вашей собаки, чтобы выявить гидратационный статус, инфекции, заболевания почек или мочевого пузыря, диабет и другие состояния здоровья
- Исследование кала: Мы оцениваем образец стула вашей собаки на цвет, консистенцию, а также на наличие крови или слизи.Затем мы исследуем его под микроскопом на предмет кишечных паразитов, грибков или простейших
- Полный анализ крови (CBC): Мы анализируем кровь вашей собаки, чтобы оценить ее характеристики, в том числе количество эритроцитов и лейкоцитов, иммунный статус и уровень гемоглобина, который фактически является веществом в красных кровяных тельцах, переносящим кислород.
- Время свертывания крови: Мы проверяем кровь вашей собаки на нарушение свертываемости крови
- Химический анализ крови: Мы определяем состояние внутренних органов вашей собаки, а также измеряем ее здоровье перед анестезией перед операцией
- Цитология: Мы собираем образцы кожного сала и клеточного мусора на коже и в ушах, чтобы определить наличие инфекции.Кроме того, мы можем выполнить пункционную или стержневую биопсию шишек или новообразований на теле вашей собаки для поиска раковых клеток.
Мы рекомендуем обсудить лабораторные тесты для собак с вашим ветеринаром, чтобы принять информированное решение о том, может ли ваш друг-собака получить пользу от анализа крови собаки.
Как наша собачья лаборатория обрабатывает кровь
В дополнение к круглосуточному дежурству ветеринаров для оказания неотложной помощи животным, больница для животных Point Vicente также имеет собственную лабораторию.Хотя это означает, что мы можем выполнять все виды лабораторных работ для собак быстро и надежно, наша собственная лаборатория для собак особенно полезна в экстренных ситуациях, когда время имеет существенное значение.
В конце концов, если мы сможем рисовать, обрабатывать и анализировать кровь собак в помещении, то мы можем сразу получить нужные нам результаты. Это увеличивает шансы на то, что мы сможем определить, в чем проблема, а затем реализовать успешное медицинское вмешательство на основе результатов. Таким образом, наша лаборатория для собак позволяет нам быть активным и своевременным партнером в вопросах здоровья и ухода за вашей собакой.
Общие сведения об анализах крови собак
Понимание анализов крови собак — вторая натура для нас. Однако мы понимаем, что этого нельзя сказать о вас. Вот почему мы всегда полностью объясняем результаты анализов крови собак лицам, осуществляющим уход за пациентом. В конце концов, арест и лечение всего, что показывает анализ крови, требует осознанных и согласованных усилий команды. Если мы заказываем анализ крови собаки, то, скорее всего, он будет в форме полного анализа крови или анализа химического состава крови (сыворотки).
Полный анализ крови, или CBC, показывает ветеринарному врачу состояние гидратации вашей собаки, анемию, инфекцию, способность к свертыванию крови и реакцию иммунной системы. Общий анализ крови необходим для собак, у которых есть такие симптомы, как лихорадка, рвота, диарея, слабость, бледность десен или потеря аппетита. Если вашей собаке требуется операция, общий анализ крови также может выявить нарушения свертываемости крови или другие невидимые аномалии. В частности, полный анализ крови предоставляет подробную информацию, в том числе:
- Гематокрит (HCT): Этот тест измеряет процент эритроцитов для выявления анемии и гидратации
- Гемоглобин и средняя концентрация корпульскулярного гемоглобина (Hb и MCHC): Это переносящие кислород пигменты красных кровяных телец
- Количество лейкоцитов (WBC): Этот тест измеряет количество иммунных клеток организма.Увеличение или уменьшение лейкоцитов указывает на определенные заболевания или инфекции
- Гранулоциты и лимфоциты / моноциты (GRANS и L / M): Это особые типы лейкоцитов
- Эозинофилы (EOS): Это особый тип лейкоцитов, который может указывать на аллергические или паразитарные состояния
- Количество тромбоцитов (PLT): В этом тесте измеряются клетки, образующие сгустки крови
- Ретикулоциты (RETICS): Это незрелые эритроциты.Высокий уровень указывает на регенеративную анемию
- Фибриноген (FIBR): Этот тест предоставляет важную информацию о свертывании крови. Высокий уровень может указывать на то, что собака беременна от 30 до 40 дней
Химический анализ крови, или анализы сыворотки крови, позволяет оценить функцию органов собаки, статус электролитов, уровни гормонов и многое другое. Эти тесты важны для оценки здоровья пожилых собак, собак с признаками рвоты, диареи или воздействия токсинов, а также собак, получающих длительные лекарства, и общего состояния здоровья перед анестезией.
- Альбумин (ALB): Это сывороточный белок, который помогает оценить гидратацию, кровотечение и заболевания кишечника, печени и почек
- Щелочная фосфатаза (ALKP): Повышение в этом тесте может указывать на повреждение печени, болезнь Кушинга или активный рост костей у молодой собаки
- Аланинаминотансфераза (ALT): Этот тест может определить активное повреждение печени, но не указывает причину
- Амилаза (AMYL): Повышение в этом тесте указывает на панкреатит или заболевание почек
- Аспартатаминотрансфераза (AST): Повышение в этом тесте может указывать на повреждение печени, сердца или скелетных мышц
- Азот мочевины крови (АМК): Этот тест определяет функцию почек.Повышенный уровень называется азотемией и может быть вызван заболеваниями почек, печени и сердца, а также обструкцией уретры, шоком или обезвоживанием
- Кальций (Ca): Изменения нормального уровня этого теста могут указывать на различные заболевания. Опухоли, гиперпаратиреоз, заболевание почек и низкий уровень альбумина — это лишь некоторые из условий, которые влияют на содержание кальция в сыворотке крови.
- Холестерин (CHOL): Этот тест используется для дополнения диагностики гипотиреоза, заболеваний печени, болезни Кушинга и сахарного диабета
- Хлорид (Cl): Хлорид — это электролит, который обычно теряется при таких симптомах, как рвота, или при таких заболеваниях, как болезнь Аддисона.Высота часто указывает на обезвоживание
- Користол (CORT): Кортизол — это гормон, который измеряется в тестах на болезнь Кушинга (тест на подавление низких доз дексаметазона) и болезнь Аддисона (тест на стимуляцию АКТГ)
- Креатинин (CREA): Этот тест выявляет функцию почек и помогает различать почечные и не почечные причины повышенного уровня азота мочевины
- Гамма-глутамилтрансфераза (GGT): Это фермент, который указывает на заболевание печени или избыток кортикостероидов
- Глобулин (GLOB): Это белок крови, который часто увеличивается при хроническом воспалении и некоторых болезненных состояниях
- Глюкоза (GLU): Глюкоза — это сахар в крови.Повышенный уровень может указывать на сахарный диабет. Низкий уровень может вызвать коллапс, судороги или кому
- Калий (K): Это электролит, который обычно теряется при таких симптомах, как рвота, диарея или обильное мочеиспускание. Повышенный уровень может указывать на почечную недостаточность, болезнь Аддисона, обезвоживание или обструкцию уретры. Высокий уровень может привести к остановке сердца
- Липаза (LIP): Липаза — это фермент, который может указывать на панкреатит
- Натрий (Na): Натрий — это электролит, который часто теряется при признаках рвоты, диареи, болезни почек и болезни Аддисона.Этот тест помогает определить состояние гидратации .
- Фосфор (PHOS): Повышение в этом тесте часто связано с заболеванием почек, гипертиреозом и нарушениями свертываемости крови
- Общий билирубин (TBIL): Повышение в этом тесте может указывать на печеночную или гемолитическую болезнь. Этот тест помогает выявить проблемы с желчными протоками и некоторые виды анемии
- Общий белок: Этот тест показывает состояние гидратации и предоставляет дополнительную информацию о печени, почках и инфекционных заболеваниях
- Тироксин (T4): Тироксин — гормон щитовидной железы.Пониженный уровень часто свидетельствует о гипотиреозе у собак
Чтобы определить, какие анализы крови собаки могут лучше всего помочь вашему собачьему другу, мы рекомендуем записаться на прием к ветеринару сегодня.
Симптомы, причины и лечение анемии у собак | Huntersville Vet
Что такое анемия у собак?
Если у вашей собаки анемия, заболевание может указывать на то, что ваш питомец страдает от основного заболевания или состояния.
Анемия возникает, когда организм вашего питомца не производит достаточного количества гемоглобина или красных кровяных телец, или когда ваша собака страдает серьезной кровопотерей в результате таких заболеваний, как язва желудка или рак.Серьезная травма или несчастный случай также могут привести к анемии.
Какие бывают типы анемии?
Анемия кровопотери
Если ваша собака страдает от тяжелой кровопотери из-за нарушения свертываемости крови, травмы или операции, это может привести к анемии кровопотери. Внутреннее кровотечение из-за паразитов, рака, язв или других заболеваний также может быть причиной.
Апластическая или нерегенеративная анемия
У собак может развиться апластическая или нерегенеративная анемия в результате недостаточного производства эритроцитов.Заболевание костного мозга, заболевание почек, воздействие токсинов, парвовируса, химиотерапевтических препаратов и других определенных лекарств также могут вызывать эту форму анемии.
Метгемоглобинемия
У собак определенные генетические нарушения могут привести к слишком большому содержанию метгемоглобина в крови и вызвать метгемоглобинемию. Это состояние также может быть связано с воздействием токсинов, в том числе некоторых лекарств, предназначенных исключительно для использования людьми, таких как бензокаин, парацетамол или ибупрофен.
Гемолитическая анемия
Распад или разрушение красных кровяных телец в организме вашей собаки может привести к гемолитической анемии.Эта форма анемии часто возникает в результате иммуноопосредованной гемолитической анемии (IMHA) или неиммуно-опосредованной формы состояния (вызванного токсинами, паразитами, низким уровнем фосфора или наследственным заболеванием).
Каковы симптомы анемии у собак?
Если ваша собака страдает анемией, вы можете заметить один или несколько симптомов, которые будут различаться в зависимости от основной причины состояния вашей собаки.
- Бледные десны, глаза или уши
- Слабость или вялость
- Черный стул
- Учащенный пульс или учащенное дыхание
- Отек челюсти или лица
- Рвота
- Потеря аппетита 326
- Что вызывает анемию у собак?
Анемия у вашей собаки может развиться в результате множества заболеваний.Некоторые из наиболее частых причин анемии у собак включают:
- Хронические заболевания, подавляющие выработку красных кровяных телец
- Болезнь Кушинга
- Инфекционные болезни (включая чуму собак)
- Кишечное кровотечение
- Лекарства, мешающие производству красных кровяных телец
- Тяжелая кровопотеря в результате травмы или несчастного случая
- Кровопотеря, вызванная паразитами
- Яды или токсины
- Рак
- Клещевые болезни, такие как болезнь Лайма
- Плохое питание
- Болезнь костного мозга
- Болезнь почек
- Гипотиреоз
Как лечится анемия у собак?
Если у вашей собаки диагностирована анемия, ваш ветеринар порекомендует лечение в зависимости от того, что вызывает заболевание.Некоторые виды лечения, которые рекомендует ваш ветеринар, могут включать:
- Внутривенные жидкости
- Противогельминтные препараты или лекарства от паразитов
- Препараты для желудочно-кишечного тракта
- Химиотерапия
- Хирургия
- Смена существующих лекарств
- Противобиологические препараты Переливание костного мозга
- Добавки с фосфатом калия
В зависимости от наличия эффективного лечения основного заболевания прогноз для собак с анемией может различаться.К сожалению, анемия может указывать на очень серьезное или смертельное заболевание, такое как аутоиммунное заболевание, отравление или рак.
Если у вашего питомца появляются признаки анемии, как можно скорее обратитесь к ветеринару, чтобы назначить обследование.
Могу ли я предотвратить развитие анемии у моей собаки?
По возможности принимайте меры для предотвращения анемии путем предотвращения условий, которые ее вызывают. Держите токсичные для собак вещества (например, пищу для людей и лекарства) подальше от любопытного щенка и обеспечьте его здоровым питанием.Эти действия могут помочь предотвратить развитие анемии у вашей собаки.
Защитите свою собаку от глистов, блох и клещей с помощью круглогодичных препаратов для профилактики паразитов, и вы устраните еще одну потенциальную причину.
Если у вас есть порода собак, склонных к развитию анемии (ши-тцу, лабрадор-ретривер, американский кокер-спаниель и миниатюрный шнауцер), регулярные осмотры здоровья — каждые шесть месяцев — у вашего основного ветеринара могут помочь обнаружить ранние признаки анемии, чтобы ваша собака могла получить диагноз и пройти лечение до того, как состояние станет более серьезным.
Примечание: советы, представленные в этом посте, предназначены для информационных целей и не являются медицинскими советами относительно домашних животных. Для точного диагноза состояния вашего питомца, пожалуйста, запишитесь на прием к ветеринару.
У вашей собаки симптомы анемии? В ветеринарной больнице LakeCross наши ветеринары в Хантерсвилле могут диагностировать и лечить широкий спектр заболеваний. Запишитесь на прием сегодня.
Капиллярный электрофорез гемоглобина здоровых и анемичных собак: количественная оценка, валидация и референсные интервалы фракций гемоглобина
Резюме
Несмотря на достижения в собачьей медицине и быстрое завоевание внимания собачьих моделей в биомедицинской области и особенно в исследованиях генов гемоглобина , исследования состава гемоглобина собак немногочисленны с неоднозначными выводами.Нашей целью было: i) исследовать электрофоретический профиль собачьего гемоглобина и возможное влияние возраста, пола и анемии с помощью анализа капиллярного электрофореза, и ii) подтвердить этот анализ и рассчитать референсные интервалы (RI) для фракций собачьего гемоглобина. Образцы крови были взяты у 53 здоровых и 42 собак с регенеративной и нерегенеративной анемией. Пирсинг Sebia Capillarys 2 использовался для анализа гемоглобина и был подтвержден с использованием образцов крови собак. Для статистического анализа использовался статистический язык R.Основная фракция гемоглобина (обозначенная HbA 0 ) и второстепенная (обозначенная HbA 2 ) были идентифицированы в 100% и 47,4% образцов соответственно. CV внутри цикла и между исследованиями составлял 0,1% для HbA 0 и 9,1% и 11,2% для HbA 2 , соответственно. Чрезвычайно узкий диапазон значений HbA 0 и HbA 2 затруднял исследование линейности с использованием образцов крови собак. RI для HbA 0 и HbA 2 составляли 98,9–100% и 0–1,1%, соответственно.Значения HbA 0 и HbA 2 не коррелировали с возрастом ( P = 0,866). Не наблюдалось различий в медиане HbA 0 и HbA 2 между двумя полами ( P = 0,823), а также у здоровых и анемичных собак ( P = 0,805). В заключение, капиллярный электрофорез выявил большую фракцию гемоглобина и непостоянно присутствующую меньшую фракцию. Не было обнаружено влияния возраста, пола или анемии. Используемый анализ был утвержден, и были созданы RI, чтобы его можно было использовать в будущих исследованиях.
Введение
Гемоглобин — это кислородная составляющая эритроцитов. Структурно это глобулярный тетрамер полипептида, который состоит из двух пар разнородных цепей глобина, образующих оболочку вокруг центральной полости. Последний содержит четыре связывающие кислород гемовые группы, каждая из которых ковалентно связана с цепью глобина.
У здоровых людей гемоглобин состоит из: i) основной фракции, HbA 0 (α 2 β 2 ), которая составляет примерно 95% от общего гемоглобина; ii) второстепенная фракция, HbA 2 (α 2 δ 2 ), которая обычно меньше 3.5% от общего гемоглобина и iii) гемоглобин плода, HbF (α 2 γ 2 ) [1]. В медицине человека на сегодняшний день описано более 700 гемоглобинопатий, большинство из которых являются клинически доброкачественными [2]. Термин гемоглобинопатия широко используется для описания как количественных (талассемия), так и качественных (истинные гемоглобинопатии) нарушений гемоглобина [3]. Однако в строгом смысле гемоглобинопатии и талассемии представляют собой две генетически различные группы заболеваний, хотя клинические проявления могут частично совпадать [1].В частности, талассемии характеризуются сниженным образованием нормальной цепи глобина и могут быть результатом делеции гена или мутаций, которые влияют на транскрипцию или стабильность мРНК [1]. С другой стороны, подавляющее большинство гемоглобинопатий, включая клинически важные, возникают в результате однонуклеотидных замен, которые транслируются в одиночные аминокислотные замены, в первую очередь в не-α цепи, вызывая изменения во вторичных и третичных структурах тетрамера гемоглобина. [1, 4].
Жидкостная хроматография высокого давления (ВЭЖХ) и капиллярный зональный электрофорез (CZE) являются наиболее широко используемыми методами анализа человеческого гемоглобина и начальной диагностики гемоглобинопатий, оба из которых имеют лучшие аналитические и диагностические характеристики по сравнению с другими доступными методами. такие как гель-электрофорез и масс-спектроскопия [5]. CZE позволяет успешно разделить нормальные фракции гемоглобина человека, но он также может обнаруживать аномальные варианты гемоглобина с измененным зарядом, возникающие либо в результате мутаций, которые непосредственно влияют на заряд молекулы, либо косвенно из-за мутаций, которые изменяют структуру более высокого порядка [4].В частности, пирсинг Sebia Capillarys 2-flex (Sebia, Norcross, США), обновленная модель Sebia Capillarys, успешно прошел валидацию для анализа человеческого гемоглобина и диагностики гемоглобинопатий [6]. Кроме того, этот же анализатор недавно был успешно проверен для измерения основной фракции гликозилированного гемоглобина (HbA 1c ) у собак [7].
В настоящее время существует мало опубликованных исследований состава гемоглобина у собак, и они были проведены почти полвека назад [8, 9], хотя собаки быстро привлекают внимание как потенциальные модели в различных биомедицинских областях, хотя и считаются идеальная модель, особенно для изучения генов гемоглобина [10].Согласно цитированным выше исследованиям, у собак не распознается HbF, но может быть обнаружена небольшая фракция гемоглобина [8, 9]. Однако никакой дополнительной информации о распространенности, количественной оценке и электрофоретических характеристиках второстепенной фракции гемоглобина не предоставляется. Только недавно второстепенная фракция гемоглобина была определена количественно с помощью электрофореза ацетатцеллюлозы [11]. Удивительно, но авторы этого исследования также сообщили о наличии HbF у взрослых собак, что поставило под сомнение наши предыдущие знания, а также о полезности различных анализов для анализа гемоглобина у собак [11].
В вышеупомянутом контексте целями данного исследования были: i) изучить электрофоретические характеристики гемоглобина собак с использованием нового автоматического анализа капиллярного электрофореза; ii) изучить влияние возраста, пола и анемии, не связанной с нарушениями гемоглобина, на электрофоретический профиль гемоглобина собак; и iii) для валидации использованного здесь анализа для анализа гемоглобина собак и расчета соответствующих референсных интервалов, чтобы быть подходящими для использования в будущих исследованиях или в клинических условиях.
Материалы и методы
Образцы крови, использованные в этом исследовании, представляли собой аликвоты образцов, собранных (с согласия владельцев) для диагностических целей, плановой проверки здоровья или до операции у здоровых собак, направленных в Клинику для животных-компаньонов Школы ветеринарии. Медицина, факультет медицинских наук, Салоникский университет Аристотеля, Греция. Референтные лица были отобраны прямым априорным методом на основании следующих критериев включения: возраст> 6 месяцев, актуальная вакцинация и дегельминтизация, отсутствие в анамнезе болезней или лекарств в предыдущем месяце, незначительное физическое обследование и общий анализ крови нормальный.Забор крови проводили при поступлении путем пункции яремной вены, и образцы собирали в пробирки, покрытые K3-этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) (Deltalab, Барселона, Испания). Анемия определялась как количество эритроцитов <5,36 × 10 9 / л, концентрация гемоглобина <122 г / л или гематокрит <0,372 л / л [12]. Анемия была классифицирована как регенеративная, когда абсолютное количество ретикулоцитов было> 60 000 / мкл [13]. Из исследования были исключены сильно гемолизированные (гемолиз in vitro) и липемические образцы.Общий анализ крови был выполнен на гематологическом анализаторе Advia 120 (Siemens Healthcare Diagnostics, Дирфилд, США) в течение 2 часов после отбора пробы.
Электрофорез гемоглобина проводили в течение 4 ч после отбора пробы. Регулярное обслуживание, анализы и процедуры внутреннего контроля качества выполнялись в соответствии с инструкциями к анализаторам. Для сравнения использовалась нормальная электрофореграмма пациента-человека. Автоматический анализатор Sebia Capillarys 2 flex-piercing и специальный набор (Sebia, Norcross, США) использовались для обнаружения и количественной оценки различных фракций гемоглобина собак в процентах от общего гемоглобина.Принцип анализа Capillarys 2 на прокалывание изгибом основан на методе CZE, в котором заряженные молекулы различаются по их электрофоретической подвижности в щелочном буфере (pH 9,4). Анализатор оснащен восемью капиллярами кремнезема, которые позволяют одновременно анализировать восемь образцов цельной крови. Вкратце, обработанный ЭДТА образец цельной крови разбавляют гемолизирующим раствором, а затем полученный раствор гидродинамически вводят в анодный конец капилляра. Постоянное высокое напряжение применяется в течение 8 минут, что позволяет мигрировать и разделять варианты гемоглобина.Затем они непосредственно обнаруживаются спектрофотометрией (415 нм), и электрофореграммы генерируются автоматически. Общее время вывода составляет примерно 20 минут для первого запуска и 12 минут для каждого второго запуска.
Изначально проверка анализатора была разработана с учетом линейности, повторяемости и воспроизводимости. Воспроизводимость или точность внутри серии оценивалась с использованием образцов крови от трех собак. Каждый образец был измерен восемь раз подряд и рассчитан коэффициент вариации (CV).Образцы крови от тех же трех собак были использованы для оценки воспроизводимости или точности между запусками. Из каждого образца были сделаны шесть аликвот, которые измеряли в течение 3 дней; затем рассчитывалась CV.
Распределение данных оценивалось с помощью теста Шапиро – Уилка. 95% эталонные интервалы (RI) были рассчитаны с использованием непараметрического метода, в то время как 90% доверительные интервалы (CI) для нижнего и верхнего эталонных пределов были рассчитаны методом начальной загрузки.Для обнаружения выбросов использовался метод Кука. Для определения референсных интервалов использовался пакет R. Точные критерии суммы рангов Вилкоксона и Краскела-Уоллиса использовались для сравнения медианы между двумя или тремя разными группами, соответственно. Коэффициенты ранговой корреляции Спирмена использовались для корреляционного анализа. Все статистические анализы проводились с использованием статистического языка R (R Foundation for Statistical Computing, Вена, Австрия).Уровень значимости был установлен на уровне 0,05 (P <0,05).
Результаты
Всего было отобрано 95 собак. Контрольная популяция включала 53 собаки (27 самцов и 26 самок) со средним (± SD) возрастом 6,0 ± 3,8 года и концентрацией гемоглобина 155 ± 16 г / л. Популяция анемии включала 42 собаки (19 кобелей и 23 суки) со средним (± SD) возрастом 6,6 ± 4,1 года и концентрацией гемоглобина 75 ± 27 г / л. Анемия была классифицирована как нерегенеративная у 16/42 (38,1%) собак и регенеративная у 26/42 (61.9%) собаки.
На электрофореграммах выявлена одна большая и одна второстепенная фракции гемоглобина. Основная фракция собачьего гемоглобина мигрировала к аноду медленнее, чем соответствующий человеческий HbA 0 (рис. 1), и она постоянно присутствовала во всех исследованных образцах (95/95, 100%). Незначительная фракция перемещалась к аноду несколько медленнее по сравнению с HbA 2 человека, и это было очевидно у 26 из 53 (49,1%) контрольных индивидуумов и у 19 из 42 (45,2%) собак с анемией.В целях данного исследования мы называем основную фракцию гемоглобина собак HbA 0 , а второстепенную — HbA 2 .
Рис. 1. Две репрезентативные электрофореграммы гемоглобина здорового человека (A) и здоровой собаки (B).Основная (HbA0) и второстепенная (HbA2) фракции взрослого гемоглобина изображены на обеих электрофореграммах. Основная фракция собачьего гемоглобина движется к аноду медленнее, чем соответствующая человеческая фракция. Незначительная фракция мигрирует к аноду несколько медленнее по сравнению с человеческим HbA2 и непостоянно присутствует у собак.
Общий КВ внутри и между запусками для HbA 0 составлял 0,1%, а для HbA 2 составлял 9,1% и 11,2%, соответственно. Специфичность (исследование линейности разведения) с использованием образцов крови собак не может быть выполнено из-за чрезвычайно узкого диапазона HbA 0 и HbA 2 процентов в нашей популяции собак. Никаких выбросов не было обнаружено в контрольной совокупности с использованием метода Кука. 95% RI для HbA 0 составлял 98,9-100% с CI для нижнего и верхнего контрольных пределов 98.8-99,0% и 100% соответственно. 95% RI для HbA 2 составлял 0-1,1% с CI для нижнего и верхнего контрольных пределов, равных 0 и 1,0-1,2%, соответственно. Значения
HbA 0 и HbA 2 значимо не коррелировали с возрастом ( P = 0,866). Статистически значимой разницы ( P = 0,823) не наблюдалось в медиане HbA 0 и HbA 2 между самцами и самками собак. Медиана (диапазон) HbA 0 и HbA 2 составила 100% (98.9-100%) и 0% (0-1,1%) соответственно у обоих полов. Статистически значимой разницы ( P = 0,805) не было обнаружено в медиане (диапазоне) HbA 0 и HbA 2 между контрольной популяцией [100% (98,9-100%) и 0% (0-1,1%). соответственно] и собак с нерегенеративной [100% (98,9-100%) и 0% (0-1,1%) соответственно] или регенеративной анемией [100% (99,0-100%) и 0% (0-1,0%) ) соответственно] (рис. 2).
Рис. 2. Графики значений фракции основного (A) и второстепенного (B) гемоглобина в контрольных популяциях и собаках с нерегенеративной или регенеративной анемией изображены.Цветные прямоугольники представляют основную часть данных; они разделены линией пополам, обозначающей среднее значение. Не было обнаружено статистически значимой разницы ( P = 0,805) в средних значениях обеих фракций собачьего гемоглобина между тремя группами.
Обсуждение
В этом исследовании электрофоретический профиль собачьего гемоглобина был исследован с использованием нового автоматического анализа капиллярного электрофореза. Этот анализ был подтвержден для анализа гемоглобина у собак, и соответствующие референсные интервалы были рассчитаны для взрослых собак.Также оценивалось влияние возраста и пола на электрофоретический профиль гемоглобина собак. Наконец, мы исследовали, могут ли анемии, не связанные с нарушением гемоглобина, влиять на электрофоретический характер гемоглобина.
Анализ электрофореграммы выявил две фракции гемоглобина: одна основная фракция, которая постоянно присутствовала у всех зарегистрированных собак, и одна второстепенная фракция, которая была обнаружена примерно у половины собак. Было обнаружено, что основная фракция собачьего гемоглобина двигалась медленнее к аноду по сравнению с человеческим HbA 0 , тогда как второстепенная фракция собачьего гемоглобина мигрировала немного медленнее, чем человеческий HbA 2 .Третья фракция гемоглобина, соответствующая HbF, не была обнаружена ни у одной из собак, включенных в это исследование. Наши результаты согласуются с предыдущими исследованиями с использованием гель-электрофореза, в которых сообщалось об отсутствии HbF и наличии одной или двух фракций гемоглобина у собак [8, 9]. Однако в вышеупомянутых исследованиях не было предоставлено никакой дополнительной информации об электрофоретических характеристиках, распространенности и количественной оценке различных фракций гемоглобина. Характеристика HbA 2 только недавно была проведена в образцах собак [11].В этом исследовании распространенность HbA 2 у здоровых собак была выше, но аналогична нашей (64,1% против 49,1% соответственно). Однако диапазон значений HbA 2 был шире и примерно в три раза больше, чем указано в нашем исследовании. Однако Atyabi et al. неожиданно сообщили о присутствии HbF в 50,0% их образцов [11], в отличие от текущих и ранее опубликованных исследований [8, 9], в которых сообщалось об отсутствии HbF у собак. Источник наблюдаемого расхождения между исследованием Атяби и соавт.[11] и остальные опубликованные исследования, включая настоящее, не поддаются легкому объяснению. Как бы то ни было, как преаналитические (обработка и хранение образцов крови), так и аналитические факторы (неотъемлемые ограничения используемого метода) могли способствовать наблюдаемым различиям. Это еще раз подчеркивает необходимость использования современных методов и их правильной проверки для использования у разных видов.
ВЭЖХ и CZE — наиболее широко используемые методы анализа гемоглобина человека и начальной диагностики гемоглобинопатий [5].Эти два метода дают сопоставимые результаты и обладают некоторыми основными преимуществами, такими как точность, скорость и высокая производительность; однако каждый из них имеет свои недостатки, в первую очередь связанные с невозможностью идентификации некоторых специфичных для человека вариантов гемоглобина [5]. Однако основным преимуществом CZE перед ВЭЖХ, которое потенциально применимо к различным видам, является значительно лучшая визуализация результатов; действительно, пики посттрансляционной модификации и деградации часто присутствуют на хроматограммах ВЭЖХ, что потенциально затрудняет интерпретацию [5].Гель-электрофорез и масс-спектроскопия также могут использоваться для анализа гемоглобина и диагностики гемоглобинопатий; Несмотря на это, в них обоих признается серьезный недостаток. Гель-электрофорез характеризуется низкой точностью и чувствительностью [5], в то время как масс-спектроскопия неспособна обнаружить интактные глобиновые цепи с несколько иной массой, как сообщается, менее 6 Да [14].
Анализ капиллярного электрофореза, использованный в этом исследовании, недавно был успешно подтвержден для измерения HbA 1c у собак [7].Однако, насколько нам известно, это первый раз, когда этот анализ используется для электрофореза гемоглобина собак, и поэтому исследование аналитических характеристик этого анализа является ценным. Воспроизводимость и воспроизводимость этого анализа для измерения HbA 0 с использованием образцов крови собак были превосходными и согласуются с исследованиями в области медицины человека [6]. Тем не менее, CV в ходе и между анализами для измерения HbA 2 было значительно выше, чем для HbA 2 человека [6].Более высокая неточность измерения HbA 2 у собак может быть отнесена, по крайней мере частично, к чрезвычайно низким значениям HbA 2 у собак, которые обычно не наблюдаются у людей; тем не менее, характеристики, вероятно, приемлемы для использования, хотя это не может быть четко заявлено из-за отсутствия конкретных целей у собак. Следует отметить, что ни один из ранее использовавшихся методов электрофореза гемоглобина собак не был валидирован для использования на собаках. Кроме того, соответствующие RI были рассчитаны для взрослых собак, при этом диапазон для обеих фракций гемоглобина был уже по сравнению с человеческим.Наконец, возраст и пол, по-видимому, не влияют на электрофоретический характер гемоглобина собак, согласно исследованиям на людях, в которых сообщается лишь о минимальном влиянии возраста и пола, а также исследованию Atyabi et al. который не обнаружил различий между самцами и суками [11, 15].
Учитывая, что анемия (различной степени тяжести) является обычным клиническим проявлением гемоглобинопатий у людей [3], мы также решили исследовать, могут ли анемии (регенеративные или нерегенеративные), не связанные с нарушениями гемоглобина, влиять на электрофоретическая картина гемоглобина собак.Никаких количественных или качественных отклонений гемоглобина в электрофоретической картине анемичных собак по сравнению с нашей контрольной популяцией обнаружено не было. Несмотря на небольшой размер выборки собак с анемией, это открытие указывает на то, что анемия, не связанная с нарушением гемоглобина, не мешает анализу капиллярного электрофореза, используемому в нашем исследовании.
Выводы
Гемоглобин собак состоит из основной и второстепенной фракций, которые непостоянно присутствуют в очень низких пропорциях.Новый автоматический анализ капиллярного электрофореза был проверен для разделения фракций собачьего гемоглобина, и были созданы соответствующие RI. Наше исследование указывает на отсутствие влияния возраста или пола на электрофоретический характер гемоглобина у взрослых собак, в то время как у собак с анемией без признаков нарушения гемоглобина не было обнаружено количественных или качественных отклонений гемоглобина. Анализ капиллярного электрофореза, использованный в этом исследовании, является единственным утвержденным методом анализа, который может быть использован в будущих исследованиях гемоглобина собак или в клинических случаях с подозрением на нарушение гемоглобина.
Благодарности
Авторы не заявляют никаких подтверждений.
% PDF-1.7 % 497 0 объект > эндобдж xref 497 116 0000000015 00000 н. 0000002662 00000 н. 0000002913 00000 н. 0000002958 00000 н. 0000003047 00000 н. 0000003136 00000 п. 0000003225 00000 н. 0000003315 00000 н. 0000003404 00000 н. 0000003493 00000 н. 0000003582 00000 н. 0000003672 00000 н. 0000003761 00000 н. 0000003851 00000 н. 0000003940 00000 н. 0000004029 00000 н. 0000004118 00000 п. 0000004207 00000 н. 0000004256 00000 н. 0000004345 00000 п. 0000004431 00000 н. 0000004518 00000 н. 0000004605 00000 н. 0000004693 00000 н. 0000004780 00000 н. 0000004868 00000 н. 0000004955 00000 н. 0000005043 00000 н. 0000005131 00000 п. 0000005220 00000 н. 0000005309 00000 н. 0000005399 00000 н. 0000005880 00000 н. 0000006449 00000 н. 0000006603 00000 п. 0000006752 00000 н. 0000006906 00000 н. 0000007057 00000 н. 0000007211 00000 н. 0000007365 00000 н. 0000007519 00000 н. 0000007669 00000 н. 0000007821 00000 н. 0000007973 00000 н. 0000008125 00000 н. 0000008269 00000 н. 0000008419 00000 н. 0000008572 00000 н. 0000008726 00000 н. 0000008879 00000 н. 0000009033 00000 н. 0000009181 00000 п. 0000009328 00000 н. 0000009478 00000 н. 0000009625 00000 н. 0000011438 00000 п. 0000013052 00000 п. 0000014684 00000 п. 0000016337 00000 п. 0000018070 00000 п. 0000019907 00000 п. 0000021508 00000 п. 0000022603 00000 п. 0000022728 00000 п. 0000022811 00000 п. 0000022894 00000 п. 0000022986 00000 п. 0000023069 00000 п. 0000023105 00000 п. 0000023224 00000 н. 0000023260 00000 п. 0000023309 00000 п. 0000023547 00000 п. 0000023919 00000 п. 0000024044 00000 п. 0000036443 00000 п. 0000078441 00000 п. 0000078673 00000 п. 0000078946 00000 п. 0000079478 00000 п. 0000081240 00000 п. 0000083453 00000 п. 0000083547 00000 п. 0000084319 00000 п. 0000084815 00000 н. 0000085465 00000 п. 0000085663 00000 п. 0000086065 00000 п. 0000086259 00000 п. 0000086833 00000 п. 0000086957 00000 п. 0000087217 00000 п. 0000087538 00000 п. 0000087911 00000 п. 0000087995 00000 н. 0000088226 00000 п. 0000088529 00000 п. 0000088858 00000 п. 0000088936 00000 п. 0000089159 00000 п. 0000089455 00000 п. 0000099210 00000 п. 0000099908 00000 н. 0000106683 00000 п. 0000107368 00000 н. 0000112137 00000 н. 0000112719 00000 н. 0000112780 00000 н. 0000113245 00000 н. 0000113386 00000 н. 0000113510 00000 н. 0000113995 00000 н. 0000114157 00000 н. 0000114320 00000 н. 0000114815 00000 н. 0000114990 00000 н. трейлер] >> startxref 0 %% EOF 498 0 объект > эндобдж 499 0 объект > эндобдж 500 0 объект > эндобдж 501 0 объект > эндобдж 502 0 объект > эндобдж 503 0 объект > эндобдж 504 0 объект > эндобдж 505 0 объект > эндобдж 506 0 объект > эндобдж 507 0 объект > эндобдж 508 0 объект > эндобдж 509 0 объект > эндобдж 510 0 объект > эндобдж 511 0 объект > эндобдж 512 0 объект > эндобдж 513 0 объект > эндобдж 514 0 объект >> эндобдж 515 0 объект > эндобдж 516 0 объект > эндобдж 517 0 объект > эндобдж 518 0 объект > эндобдж 519 0 объект > эндобдж 520 0 объект > эндобдж 521 0 объект > эндобдж 522 0 объект > эндобдж 523 0 объект > эндобдж 524 0 объект > эндобдж 525 0 объект > эндобдж 526 0 объект > эндобдж 527 0 объект > эндобдж 528 0 объект > поток xc« «qvUBP
происхождение высокого сродства к кислороду
к поверхности, подверженной воздействию растворителя, неудивительно, что вышеупомянутые исследования
подтвердили его важность.
Следовательно, несколько более сильные гидрофобные взаимодействия в этой области
в состоянии R2 GrHb по сравнению с состоянием R2
HuHb могут внести важный вклад в относительно более высокую стабильность состояния R2 GrHb на
.
Структурное сравнение GrHb и MwHb показало, что
, несмотря на отсутствие соли в кристаллизационной смеси
(Smarra et al., 1999) и несмотря на изменение только одного остатка
на!
1
«
1
димер (от! 130Ala в GrHb до Thr в MwHb)
кристаллическая структура MwHb принадлежит R-состоянию.Один
и единственный вариант! Thr130 в MwHb до Ala в GrHb может быть ответственным за это, поскольку вариант от Ala до Thr
помещает боковую цепь! Arg141 с несколькими контактами Ван-дер-Ваальса
на! Thr130 (данные не показаны). Однако, учитывая отсутствие четкой водородной связи
, происходящей из этого изменения
, существует значительная неопределенность в этой возможности.
Тем не менее, это открытие подтверждает важность С-концов
в модуляции сродства к кислороду.Наше сравнение изона
с неопубликованной кристаллической структурой типичного собачьего Hb
показало, что он также принадлежит к состоянию R, хотя структура
имеет гораздо более низкое разрешение (3,0 A
˚), чем
GrHb ( 1,9 А
˚). Учитывая 100% идентичность последовательностей между
GrHb и родовым Hb собаки и тот факт, что GrHb может расти в состоянии R2 даже в условиях высокого содержания соли,
удивительно, что родовая структура Hb собаки принадлежит к группе Р
гос.Тем не менее, это невозможно рационализировать из-за отсутствия
существенных деталей базовой экспериментальной методологии
.
Таким образом, наше исследование показывает, что GrHb кристаллизует
в состоянии R2, несмотря на условия с высоким содержанием соли, используемые для кристаллизации. Структурный анализ GrHb и его сравнение
с HuHb и BaHb выявили специфические взаимодействия, которые могут способствовать высокому сродству GrHb к кислороду
, а
также рационализирует кристаллизацию GrHb в состоянии R2
в условиях высокой концентрации соли. .Сравнение GrHb с общей структурой Hb собаки
и MwHb показывает, что, несмотря на идентичность последовательности
(100% для общего Hb собаки и & 100% для
MwHb), обе эти структуры принадлежат состоянию R, в отличие от
GrHb. которое принадлежит состоянию R2. Это поднимает интригующую возможность
дополнительного фактора, очищающего с GrHb, который
может модулировать его четвертичную структуру, что потребовало бы дальнейших экспериментальных исследований
.В целом, эти анализы
убедительно показывают, что GrHb может служить модельной системой для
дальнейшего исследования и разработки
Hbs с высоким содержанием кислорода.
Ссылки
Беттати, С., Моцарелли, А. и Перуц, М. Ф. (1998). J. Mol. Биол. 281,
581–585.
Бисвал, Б. К. и Виджаян, М. (2002). Acta Cryst. D58, 1155–1161.
Бонавентура, К., Салливан, Б. и Бонавентура, Дж. (1974). J. Biol. Chem.
249, 3768–3775.
Банн, Х. Ф. (1971). Science, 172, 1049–1050.
Чен, В. Б., Арендалл, В. Б., Хедд, Дж. Дж., Киди, Д. А., Иммормино,
Р. М., Капрал, Г. Дж., Мюррей, Л. В., Ричардсон, Дж. С. и Ричардсон,
Д. К. (201 0). Acta Cryst. D66, 12–21.
Элмер Дж., Харрис Д. Р., Сан Г. и Палмер А. Ф. (2009). Biotechnol.
Прог. 25, 1402–1410.
Эмсли, П. и Коутан, К. (2004). Acta Cryst. D60, 2126–2132.
Анг, Р.А. и Хубер Р. (1991). Acta Cryst. A47, 392–400.
Фад-эль, В., Чандури, Ф., Олив Иери, Дж. Р., Смарра, А.Л., Коломбо, М.Ф.,
Бонилья-Родригес, Г.О. и де Азеведо, ВФ (2003) . Protein Pept.
Lett. 10,551–559.
Guex, N. & Peitsch, M. C. (1997). Электрофорез, 18, 2714–2723.
Джессен, Т. Х., Вебер, Р. Э., Ферми, Г., Тейм, Дж. И Браунитцер, Г.
(1991). Proc. Natl Acad. Sci. США, 88, 6519–6522.
Крегер, К.С. и Кундрот, К. Э. (1997). Строение, 5, 227–237.
Лян, Ю., Хуа, З., Лян, X., Сюй, К. и Лу, Г. (2001). J. Mol. Биол. 313,
123–137.
Муэзер Т. К., Роджерс П. Х. и Арноне А. (2000). Биохимия, 39,
15353–15364.
Муршудов, Г. Н., Вагин, А. А., Додсон, Э. Дж. (1997). Acta Cryst.
D53, 240–255.
Наваза, Дж. (2001). Acta Cryst. D57, 1367–1372.
Пайрет Б. и Янике Э. (2010).PLoS One, 5, e12389.
Палмер А. Ф., Сан Г. и Харрис Д. Р. (2009). Biotechnol. Прог. 25,
189–199.
Перуц, М. Ф. (1979). Анну. Rev. Biochem. 48 327–386.
Перуц, М. Ф. (1983). Мол. Биол. Evol. 1,1–28.
Перуц, М. Ф., Ферми, Г., Пойярт, К., Паньье, Дж. И Кистер, Дж. (1993). J.
Мол. Биол. 233, 536–545.
Перуц, М. Ф. и Грир, Дж. (1970). Biochem. J. 119,31P.
Петтерсен, Э. Ф., Годдард, Т.Д., Хуанг, К. К., Коуч, Г. С.,
Гринблатт, Д. М., Мэн, Э. К. и Феррин, Т. Е. (2004). J. Comput.
Chem. 25,1605–1612.
Пуйус, Ю. А., Цзоу, М., Хо, Н. Т., Хо, К. и Алмо, С. К. (1998).
Биохимия, 37,9258–9265.
Шехтер А. Н. (2008). Кровь, 112, 3927–3938.
Шрайбер, Г. и Фершт, А. Р. (1995). J. Mol. Биол. 248, 478–486.
Шумахер, М.А., Железнова, Э.Е., Паундстоун, К.С., Клюгер, Р.,
Джонс, Р.Т. и Бреннан, Р. Г. (19, 97). Proc. Natl Acad.