12. Пробы на совместимость при переливании компонентов крови

1.Оценка пригодности гемотрансфузионной среды для переливания

убедиться в пригодности для переливания трансфузионной среды: удостовериться в правильности обозначения группы крови и резус-принадлежности, идентичности группы крови донора и реципиента. Провести визуальный контроль контейнера с компонентом крови. Проверить герметичность, правильность паспортизации, наличия номера, даты заготовки, обозначения группы крови, резус- принадлежности, наименование консерванта, Ф.И.О. донора, наименование учреждения-заготовителя, наличие подписи врача. Компоненты крови не должны содержать сгустки, признаки гемолиза и бактериального загрязнения. Критерий годности: прозрачность плазмы, отсутствие в ней мути, хлопьев, нитей фибрина, гемолиза, наличие чёткой границы между глобулярной массой и плазмой.

2.показания к переливанию: острая анемия (при кровопотере, геморрагическом шоке), хроническая анемия (при гипо/аплазии кроветворения), тромбоцитопения, лейкопения, плазмопотеря.

3.противопоказания: абсолютные (отек легких), относительные (остротекущий туберкулез, амилоидоз, печеночно/почечная недостаточность, нарушение коронарного кровообращения (инфаркт миокарда), гломерулонефрит, тяжелые аллергические состояния.

После переливания наблюдают за пациентом в течение 48 часов. Первые 2 часа – постельный режим. Проверяют мочу (количество введенной/выделенной жидкости, цвет, прозрачность), температуру, АД. Через сутки делают общ анализ крови, общ анализ мочи.

Перед переливанием проводят 3 пробы на совместимость:

1. совместимость по системе ABO. На планшетку нанести 2-3 капли плазмы донора, 1 каплю эритроцитов реципиента. Перемешать. Ждать 5 мин. Если агглютинации нет, то переливаем. Если есть – помещаем планшетку в суховоздушный шкаф на 5 мин (температура 37 градусов). Агглютинация есть – не переливаем, нет – переливаем.

2. Совместимость по резусу. В центрифужную пробирку капают 2 капли плазмы донора, 1 калю эритроцитов реципиента, 1 каплю 33% полиглюкина. Встряхнуть, прокручивать 5 мин. Добавить 2-3 мл NaCl, 2-3 раза перемешать. Оценить результаты.

3. Биологическая проба. Влить струйно пациенту 10-15 мл крови, наблюдать за реакцией. Если появились осложнения (учащение дыхания, сердцебиение, одышка, гиперемия лица, боль в пояснице) переливать кровь нельзя. Если этого ничего нет, проводим пробу еще 2 раза, наблюдаем за состоянием. Если без осложнений – переливает кровь.

Проба Бакстера: проводится больным в коме, псих.больным, глухонемым, находящимся под наркозом. Ввести 30-45 мл эритромассы, взять из вены 5-10 мл крови. Поместить в центрифугу, если сыворотка розовая, это гемолиз, переливать нельзя. Если сыворотка соломенная, переливаем.

13. Способы определения групповой принадлежности. Перекрестный метод определения групп крови по системе «аво», его предназначение.

Способы определения групповой принадлежности крови индивидуума основываются на трех принципах антигенной совместимости (Ландштейнер):

1. У одного человека не может быть одноименных АГ и АТ.

2. Если в эритроцитах имеется антиген одной изопары, то в плазме присутствует антитело другой изопары.

3. При встрече одноименных антигенов и антител происходит реакция агглютинации эритроцитов.

Основное значение для обеспечения совместимости при переливании компонентов крови имеет выбор крови по системе «АВО». Выделяют два способа определения группы крови системы «АВО»:

1. Прямой метод (прямая реакция): устанавливают наличие или отсутствие групповых АГ системы «АВО» при помощи известных АТ. Происходит определение группы крови при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток или моноклональных антител.

2. Перекрестный метод (перекрестная реакция): устанавливают наличие и АГ, и АТ при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток или моноклональных антител, а так же при помощи стандартных эритроцитов.

Перекрестный метод — заключается в одновременном определении АГ при помощи стандартных сывороток, и АТ при помощи стандартных эритроцитов. У исследуемого берут кровь из вены. Ее либо центрифугируют, либо оставляют постоять 20-30 минут для отделения сыворотки. Пипеткой извлекают сыворотку, капают ее по 0,1 мл на стандартные эритроциты. После пипеткой набирают со дна пробирки эритроциты и помещают по маленькой капле рядом со стандартными сыворотками. Тщательно перемешивают, оставляют на 1-2 минуты в покое, затем поколачивают. На 3 минуте добавляют теплый NaCl(для исключения ложной холодовой агглютинации, когдаэритроциты могут принимать вид «монетных столбиков»). Если после этого агглютинация исчезла, то она была ложной, если осталась – то образовался комплекс антиген-антитело.

Положит. Результат: появляются агглютинаты (комочки из эритроцитов).

Отрицательный результат: в течение 5 минут жидкость остается равномерно красной.

какие пробы проводят и зачем

Гемотрансфузия широко применяется в современной медицине. Как известно, при опустении кровяного русла наступает смерть. Донорская кровь необходима не только при больших кровопотерях, но и при некоторых заболеваниях. Благодаря гемотрансфузии удается спасти жизнь и улучшить здоровье тысячам людей. Теория совместимости крови появилась относительно недавно – в середине прошлого века. Таким образом, появилась возможность избегать тяжелых последствий переливания, обусловленных несовместимостью.

Гемотрансфузия – это серьезная процедура, при проведении которой необходимо строго соблюдать определенные правила. Несовместимость реципиента и донора может привести к тяжелым последствиям, то есть к смерти пациента. При переливании неподходящей крови происходит склеивание эритроцитов (реакция агглютинации) и их разрушение. Совместимость групп крови тщательно проверяется перед тем, как будет проведена процедура.

Система ABO и RH

Основная классификация крови – это система AB0, которая была открыта в начале 20 века. Определяются они наличием на поверхности эритроцитов специфических антигенов (агглютиногенов) A и B. Одна из их задач – подавать сигнал о присутствии чужеродных элементов, вызывая тем самым иммунную реакцию организма. Иммунная система никак не реагирует на свои антигены, но при появлении таких, которых в организме нет, она принимает их за врагов и начинает уничтожать. В организме вырабатываются антитела (иммуноглобулины) к чужим антигенам, в результате их реакции происходит склеивание эритроцитов.

Набор антигенов, находящихся на эритроцитах, определяет принадлежность к той или иной группе. На самом деле медикам известно около 400 антигенов, в связи с чем существует довольно много классификаций. Однако свойства большинства антигенов выражены слабо и не учитываются при переливании. Наибольшее внимание при гемотрансфузиях уделяют системам AB0 и Rh.

Согласно системе AB0, кровь делится на четыре группы. У первой нет ни того ни другого антигена, у второй – только A, у третьей – B, у четвертой есть оба антигена – A и B. В плазме присутствуют естественные антитела (агглютинины) – анти-A и анти-B (α и β). В крови могут находиться только разноименные антигены и антитела. Первая содержит анти-A и анти-B, вторая – анти-B (β), третья – анти-A (α), в плазме четвертой нет антител.

Наглядно это демонстрирует таблица.

Группа	Агглютиноген в красных клетках	Агглютинин в плазме
I	отсутствует	анти-А и анти-В
II	A	анти-В
III	B	анти-А
IV	AB	отсутствует

По системе Rh, кровь может быть Rh-положительной или Rh-отрицательной. Это зависит от присутствия на поверхности красных клеток специфического антигена резус-фактора. Если кровь донора и пациента принадлежит к одной группе, но одна резус-положительная, другая резус-отрицательная, имеет место несовместимость.

Совместимость

Считается, что разные группы могут быть совместимы, если при переливании не будет реакции агглютинации, при которой антитела атакуют чужеродные эритроциты и происходит их склеивание.

1. Первая считается универсальной, то есть подходящей для всех, поскольку в ней нет антигенов. В то же время людям с этой группой нельзя переливать никакую другую, только первую.
2. Вторая содержит антиген A, поэтому ее можно переливать людям со II и IV, а человеку с такой группой – I и II.
3. В крови третьей есть антиген B. Ее можно переливать людям с III и IV, а людям с этой группой – I и III.
4. Четвертая содержит оба антигена, поэтому переливать ее можно только в IV, а человеку с этой группой подойдет любая.

Что касается Rh, то считается, что резус-положительному человеку можно перелить отрицательную кровь, но делать это в обратном порядке нельзя.

Все это верно только теоретически, поскольку сегодня запрещено использовать при переливании другую кровь. В экстренных случаях могут использовать первую в качестве универсальной, но только в том случае, если она Rh-отрицательная.

Правила переливания

Гемотрансфузия требует соблюдения следующих правил:

1. 1Кровь донора и реципиента должна совпадать по группе.
2. 2Обязательное совпадение по резус-фактору.
3. 3Необходимо провести пробы на совместимость в индивидуальном порядке.
4. 4Необходимо провести пробу биологическую.

При несоблюдении этих правил процедура может закончиться шоком пациента или даже летальным исходом.

Перед переливанием проводят проверку крови донора и индивидуальные пробы на совместимость

Проведение пробы

Перед переливанием обязательно проводят контрольную проверку на совместимость. У предполагаемого донора берут около 5 миллилитров крови, помещают в аппарат и добавляют специальную сыворотку (одну каплю). Затем капают туда несколько капель крови реципиента и каплю раствора натрия хлорида. После этого ведется наблюдение. Если склеивание эритроцитов не началось, значит, у донора и реципиента совместимость, и можно приступать к переливанию.

Еще один из способов проверки на совместимость заключается во введении пациенту нескольких миллилитров донорской крови. После этого за ним наблюдают три минуты. Если за это время ничего не произошло, вводят еще небольшое количество. Только убедившись в совместимости, медики приступают к процедуре переливания. Чтобы свести к минимуму возможность осложнений, реципиенту переливают лишь необходимые клетки, но не цельную кровь.

Заключение

Для успешной гемотрансфузии важно правильно выбрать донора, тщательно провести проверки и пробы. Его кровь должна быть полностью совместима с кровью реципиента и по резусу, и по группе.

Методика проб на совместимость крови при переливании

До проведения гемотрансфузии следует установить группу крови (ГК) реципиента, донора и провести ряд проб на индивидуальную совместимость. Рассмотрим каждую из этих проб подробнее.

Определение ГК донора и реципиента

Вначале медицинский работник проводит определение ГК пациента по антигенам группы AB0. Самыми распространенными являются два метода – определение ГК при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток и с использованием цоликлонов.

Методика проведения проб с использованием стандартных сывороток и планшеток

При использовании изогемагглютинирующих сывороток применяются стандартные сыворотки и специальные белые гладкие эмалированные тарелки со смачиваемой структурой, размеченные по 4 группам соответственно.

Порядок действий врача следующий:

1. Врач указывает на тарелке ФИО пациента.
2. Капает по 1 капле сывороток 0, А и В, причем используется 2 серии сывороток (получается 6 капель).
3. Берет кровь у реципиента (капиллярную или венозную).
4. Полученную каплю крови помещает в центр тарелки и смешивает отдельно с каждым образцом сыворотки (причем объем сыворотки нужно брать в 10 раз больше, чем объем капли крови).
5. Перемешивает каждую пару сыворотка-кровь отдельной палочкой. Агглютинация начинается через 10-30 сек.
6. В капли, где наблюдается агглютинация, добавляет по 1 капле физраствора и оценивает результаты.

Четвертая сыворотка (АВ) используется только если агглютинировали три предыдущие сыворотки для проверки результата. Отсутствие агглютинации со стандартной сывороткой означает отсутствие соответствующего агглютинина на эритроците. То есть, например, кровь группы 0(I) не будет агглютинировать ни с одной из используемых сывороток.

Цоликлоны, использующиеся при определении групп крови

Также возможны постановки проб с цоликлонами (анти-А и анти-Б). Процедура определения ГК будет похожа на описанную выше.

Отсутствие агглютинации с цоликлоном будет также означать отсутствие однобуквенного агглютинина на эритроците. Так, кровь III группы будет давать агглютинацию только с анти-В цоликлоном.

При проверке резус-фактора в медицине применяется так называемый ускоренный метод со стандартным универсальным реагентом .

Для этого в цетрифужную пробирку объемом не более 10 мл капают 1 каплю реагента (универсальной антирезусной сыворотки четвертой группы, с 33% декстраном — полимерным углеводом) и капают туда 1 каплю крови пациента. Затем круговым движением смешивают и разносят смесь по стенкам пробирки, затем ждут 3 минуты. На следующем этапе добавляют в емкость 2-3 мл физраствора и переворачивают емкость 2-3 раза, избегая взбалтывания. При наличии видимых лепестков агглютинации делают вывод о том, что резус-фактор положительный.

Кровь донора обязательно маркируется

Группа крови донора обычно определяется заранее, и на пакете с кровью должна быть нанесена соответствующая маркировка. Так, II группа обозначается синим, III – красным, а IV имеет желтую полоску.

Перед переливанием нужно визуально оценить ее качество: кровь, подходящая для переливания сверху желтоватая (слой плазмы), а внизу — темно – красная, собственно осадок из эритроцитов.

Однако, если в пакете видны сгустки, хлопья или пленки, а так же если плазма розовая (признак гемолиза), то такую кровь нельзя использовать.

Контрольное установление группы крови донора проводят после полного размораживания пакета. Каплю для анализа берут не из основного, а из маленького дополнительного отсека пакета. Методика определения аналогична таковым при определении у реципиента.

Результаты контрольного определения должны совпасть с информацией на флаконе. После успешного контрольного определения, приступают к выполнению проб на совместимость.

Пробы на индивидуальную совместимость

Пробы на индивидуальную совместимость проводятся по двум системам: по системе АВ0, а также по резус-фактору донора и рецепиента.

По системе АВ0

 

Центрифуга, которая используется для определения групп крови

При проведении пробы на индивидуальную совместимость по системе AB0 (также известной как холодовая проба) :

• Берут 3-5 мл свежей крови реципиента, центрифугируют ее
•  забирают каплю получившейся сыворотки.
• Затем капля наносится на белую тарелку рядом с небольшой каплей крови донора, капли смешиваются
• Спустя 5-10 секунд оценивается, изменился раствор или нет.
• Если «слипания» красных клеток крови не произошло, то можно переходить к проведению пробы на установление индивидуальной совместимости по резус-фактору.

По резус-фактору

Известно два общепринятых способа определить совместимость по резус-фактору.

Первый подразумевает использование центрифуги. Для этого в пробирку для центрифугирования помещают 2 капли сыворотки пациента, 1 каплю крови из флакона, 1 каплю 33% декстрана и центрифугируют 5 минут. После этого к смеси добавляют 3-4 мл физраствора и оценивают результаты. При отсутствии агглютинации можно перейти к пробе на биологическую совместимость.

Второй метод (так называемая тепловая проба) заключается в следующем. В колбочку помещается 1 капля крови донора, 2 капли теплого 10% раствора желатина и пара капель сыворотки реципиента. Смесь инкубируют в течение 10 минут на водяной бане, где поддерживается температура +46-+48 градусов, а затем также вносят 5 мл физиологического изотонического раствора. Оценка результатов проводится аналогично пробе с центрифугой.

Проба на биологическую совместимость

Перед процедурой переливания крови необходимо провести биологическую пробу

Проба на биологическую совместимость, по сути — это первый этап непосредственно гемотрансфузии и проводится исключительно врачом. Врач, проводящий пробу, выполняет следующие действия:

• подсоединяет капельную систему и вводит первые 15-20 мл донорской крови струйно;
• останавливает трансфузию;
• ждет 3-5 минут, наблюдая за пациентом. Насторожить должны появление тахикардии, затруднения дыхания, болей в пояснице, озноба или жара.
• если все протекает благополучно, пробу считают положительной и выполняют дальнейшую трансфузию

Таким образом, если все пробы на совместимость прошли благополучно, можно проводить переливание крови. Правильная скорость переливания составляет 50-70 капель в минуту.

Конечно, существуют не только группы, описанные в системах AB0 и резус-фактора, так как всего на сегодняшний день описано 250 групп крови. Однако, проведение описанных выше проб на совместимость позволяет выявить несовместимость и по большинству других агглютининов и агглютиногенов, что в итоге делает гемотрансфузиологические мероприятия относительно безопасной процедурой при правильной подготовке.

Из видео вы узнаете как происходит процедура определения совместимости групп крови по резус-фактору:

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Совместимость крови при переливании: универсальность, схема, таблица

Переливание крови представляет собой серьезную процедуру, которую необходимо выполнять по определенным правилам. В первую очередь речь идет о совместимости. Чаще всего донорство необходимо для помощи тяжелобольным. Это могут быть самые разные заболевания крови, сложно проведенные операции или другие осложнения, которые требуют переливания.

Донорство появилось уже довольно давно, поэтому на данный момент эта процедура не новая и распространена среди всех подразделений в медицине. Само понятие совместимость по группам появилась уже больше ста лет назад. Это объяснялось тем, что в плазме были найдены специфические белки и в мембране эритроцитов. Таким образом, выявили три группы крови, которые сегодня называется системой АВ0.

Почему отсутствует совместимость?

Довольно часто реципиенту не подходит кровь той или иной группы. К сожалению или к счастью, универсальная группа отсутствует, поэтому приходится все время подбирать донора по определенным критериям. При несовпадении может возникнуть реакция агглютинации, что характеризуется склеиванием эритроцитов донора и плазмы реципиента.

Для правильного подбора используется специальная схема, по которой можно определить, совместимость или ее отсутствие. Так же можно отметить, что донор с первой группой крови является универсальным, так как и реципиент с четвертой тоже всем подходит. Кроме этого есть еще несовместимость по резус-фактору. В медицинской практике известен положительный и отрицательный резус-фактор.

Если взять донорскую кровь второй группы для реципиента с положительным резусом от донора со второй только с отрицательным – то это будет уже несовместимость, так как в таком случае необходимо ориентироваться не только на саму группу. Игнорировать такие сведения очень опасно, ведь уже после шока у реципиента может наступить смерть. Плазма и все ее составляющие каждого человека индивидуальны по количеству антигенов, которые могут определяться тоже по разным системам.

Почему важно учитывать группу и резус: https://krasnayakrov.ru/analizy-krovi/vazhnost-tipirovaniya-krovi-dlya-cheloveka.html

Правила переливания

Для того, чтоб переливание прошло успешно, необходимо соблюдать некоторые практические правила, что касается подбора групп и соответственно донора:

• учитывают совместимость групп крови реципиента и донора по системе АВ0;
• определяют положительный или отрицательный резус-фактор;
• проводят специальную пробу на индивидуальную совместимость;
• проводят биологическую пробу.

Такие предварительные проверки групп донора и реципиента необходимо проводить в обязательном порядке, так как можно спровоцировать у реципиента шок или даже смерть.

Как правильно определить группу крови для переливания?

Для определения такого показателя используют специальную сыворотку. Если в сыворотке присутствуют некоторые антитела, которые соответствуют антигенам из эритроцитов. В данном случае эритроциты образую небольшие скопления. В зависимости от группы, эритроциты агглютинируют с определенным видом сыворотки. Например:

• тест сыворотки для групп В(III) и АВ(IV) содержит антитела анти-В;
• сыворотка для групп А(II) и АВ(IV) содержит антитела анти-А;
• что касается таких групп как 0(I), то они не агглютинируются ни с одной тестовой сывороткой.

Несовместимость групп матери и ребенка

Если женщина с отрицательным резус-фактором беременная положительным, то может возникнуть несовместимость. В данном случае универсальная группа крови не помогает, ведь важнее становится подбор именно резус-фактора. Такой контакт возникает лишь при рождении ребенка, а при второй беременности может возникнуть выкидыш или преждевременные роды мертвого малыша. Если новорожденный выживает, то у него фиксируют гемолитическую болезнь.

К счастью, на сегодняшний день существует специальное вещество, которое вводится матери и соответственно блокирует образование антител. Поэтому, такая гемолитическая болезнь уже находится почти на грани полного исчезновения. Донорство в данном случае уже может вообще не понадобится.

Как заранее узнать о несовместимости: https://krasnayakrov.ru/gruppy-krovi/nesovmestimost.html

Проба групп на совместимость для переливания

Существует довольно распространенный способ определения подходящего донора. Для этого берут до 5 мл крови из вены помещают в специальный аппарат с центрифугой и капают каплю специальной сыворотки. После этого туда же добавляют еще несколько капель крови реципиента и в течение пяти минут наблюдают происходящие действия. Так же туда еще необходимо добавить одну каплю изотонического раствора хлорида натрия.

Если за все время реакции не произошло агглютинации, то наблюдается совместимость групп выбранной крови. Таким образом, донор может сдавать кровь в нужном количестве. Еще известен контрольный способ проверки на совместимость переливания. Для этого реципиенту вводят несколько миллилитров крови на три минуты, если все идет хорошо и никаких побочных действий не наблюдается, то можно добавить еще немного. Как правило, такая процедура проводится уже в качестве контроля, когда реципиенту предоставляется донор в качестве постоянного переливания или одноразового. Есть определенная таблица такой схемы, по которой делают контрольную проверку и только после этого делают переливание.

Донору важно знать свод некоторых правил: https://krasnayakrov.ru/donorstvo/pravila-perelivaniya-krovi.html

Регистрация переливания крови

После того, как завершилось переливание, в карточке реципиента и донора фиксируется запись о выявленной группе, резус-факторе и других возможных показаниях. Если донор подошел, то при его соглашении берут данные для дальнейшего переливания, так как первая совместимость уже была успешно выявлена. В дальнейшем за обоими пациентами должно быть установлено периодическое наблюдение, особенно, если донор заключил контракт с данным центром. Такое сегодня довольно широко практикуется, потому как очень сложно порой найти подходящего донора с редкой группой.

Регистрироваться таким образом для помощи нет ничего опасного, ведь таким образом, вы помогаете больным и немного омолаживаете свой организм. Уже давно доказан тот факт, что периодическая сдача крови помогает обновиться нашему организму, тем самым стимулируя кроветворные клетки для активной работы.

Как я стал врачом? Довольно-таки трудный вопрос… Если задуматься — выбора и не было. Я родился в семье врача реаниматолога, и каждый день за ужином я слышал рассказ отца о том, как же прошел его день. В детстве это всё казалось фантастичным, за гранью реальности. Оцените статью: Поделитесь с друзьями!

Алгоритм переливания крови и плазмы. Пробы на совместимость. Бланки и протоколы.

Согласие пациента на операцию переливания донорской крои и ее компонентов

Приложение
к Инструкции по применению компонентов крови
от 25.11.2002 № 363

СОГЛАСИЕ   ПАЦИЕНТА   НА   ОПЕРАЦИЮ   ПЕРЕЛИВАНИЯ   КОМПОНЕНТОВ   КРОВИ

Я ________________________________________________________

получил разъяснения по поводу операции переливания крови. Мне объяснены лечащим врачом цель переливания, его необходимость, характер и особенности процедуры, ее возможные последствия, в случае развития которых я согласен на проведение всех нужных лечебных мероприятий. Я извещен о вероятном течении заболевания при отказе от операции переливания компонентов крови.

Пациент имел возможность задать любые интересующие его вопросы касательно состояния его здоровья, заболевания и лечения и получил на них удовлетворительные ответы.

Я получил информацию об альтернативных методах лечения, а также об их примерной стоимости.

 

Беседу провел врач
	(подпись врача)

 

Пациент согласился с предложенным планом лечения, в чем расписался собственноручно

	,
(подпись пациента)

или расписался (согласно пункту 1.7 “Инструкции по применению компонентов крови”, утвержденной приказом Минздрава России от 25.11.2002 № 363)                      ,

(подпись, Ф.И.О.)

или что удостоверяют присутствовавшие при беседе                                                 ,

(подпись врача)

	.
(подпись свидетеля)

Пациент не согласился (отказался) от предложенного лечения, в чем расписался собственноручно                                                   ,

(подпись пациента)

или расписался (согласно пункту 1.7 “Инструкции по применению компонентов крови”, утвержденной приказом Минздрава России от 25.11.2002 № 363)                      ,

(подпись, Ф.И.О.)

или что удостоверяют присутствовавшие при беседе                                                 ,

(подпись врача)

	.
(подпись свидетеля)

48. Проба на совместимость по резус-фактору

Оснащение: кровь донора, сыворотка реципиента, 33% раствор полиглюкина, центрифужная пробирка, физиологический раствор натрия хлорида, пипетки.

Последовательность действий:

а) Из вены реципиента взять 3-5 мл крови, центрифугировать.

б) На дно центрифужной пробирки разными пипетками нанести 2 капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина.

в) Содержимое перемешать, наклонив пробирку почти до горизонтального положения и медленно вращать вокруг оси, распределив содержимое по стенкам ровным слоем.

г) Процедуру продолжать в течение 5 минут.

д) Через 5 минут добавить 3-4 мл физиологического раствора хлорида натрия.

е) Содержимое перемешивать, 2-3 раза наклоняя пробирку до горизонтальной плоскости (не взбалтывать!).

Трактовка результатов:

Отсутствие агглютинации, равномерное окрашивание содержимого пробирки свидетельствуют о резус-совместимости крови донора и реципиента; наличие агглютинации — о несовместимости крови донора и реципиента по резус-фактору

После проведения первой пробы необходимо провести пробу на совместимость по Rh-фактору. Для этого существует 2 доступных метода — реакция в сывороточной среде и в желатине.

Первый метод: на чашку Петри наносят 1—2 капли сыворотки больного и маленькую каплю донорской крови, после чего ее на 10 минут ставят в водяную баню (+46~+48 °С). Наличие агглютинации свидетельствует о несовместимости.

Второй метод: на дно пробирки помещают маленькую каплю донорской крови, добавляют 2 капли подогретого 10 % раствора желатина и 2 капли сыворотки крови больного. Через 10 минут инкубирования в водяной бане при. температуре +46—+48 °С в пробирку добавляют 5 мл подогретого изотонического раствора хлорида натрия. ‘Наличие агглютинации свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента.

Следует отметить, что изоиммунные антитела и антитела других систем выявляются теми же методами, что и антитела анти-Rh, а некоторые — как антитела системы АВО. Поэтому несовместимость крови донора по этим антителам может быть выявлена при выполнении указанных проб на совместимость.

49. Значение резус-фактора при переливании крови

В норме в крови как резус-положительных, так и резус-отрицательных людей антирезусных антител нет. Причины их появления в сыворотке резус-отрицательных людей следующие:

• резус-конфликт при беременности;

• переливание резус-положительной крови;

• искусственная иммунизация добровольных доноров.

Резус-конфликт

Система резус-фактора играет большую роль в акушерстве и гинекологии. Во время беременности резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом может происходить иммунизация беременной и образование у неё антител анти-D, которые из её крови проникают через плацентарный барьер, попадают в кровоток плода и повреждают его резус-положительные эритроциты и органы кроветворения. Возникает резус-конфликт. Указанные изменения ведут

к развитию гемолитической болезни, имеющей симптомы различной степени выраженности: от анемии, выраженной желтухи и отёка плода до нарушения беременности и мертворождения.

Первая беременность, как правило, заканчивается рождением здорового ребёнка, происходит только сенсибилизация матери к антигену D. В последующем, если снова развивается резус-положитель- ный плод, тяжесть проявления и последствий резус-конфликта нарастает. Иногда серьёзные последствия могут наступить и при первой беременности, в то время как в других случаях выраженность резусконфликта при второй, третьей беременностях может быть весьма умеренной. Степень выраженности осложнений зависит в первую очередь от титра антирезусных антител в сыворотке беременной. В связи с этим все резус-отрицательные беременные состоят на диспансерном учёте, у них регулярно контролируют содержание антител анти-D и в зависимости от полученных данных предпринимают соответствующее лечение, а иногда и искусственно прерывают беременность.

Переливание резус-несовместимой крови

Аналогичен механизм патологических изменений при переливании резус-несовместимой крови. Первое переливание резус-положи- тельной крови резус-отрицательному несенсибилизированному больному может не сопровождаться явлениями несовместимости, но обязательно приведёт к образованию антирезусных антител (сенсибилизации). При последующих трансфузиях этому больному резусположительной крови возникает несовместимость по Rh-фактору. Развитие резус-несовместимости опасно и при переливании резусположительной крови резус-отрицательной женщине, сенсибилизированной к резус-фактору во время беременности.

Искусственная иммунизация добровольных доноров

Процедуру проводят для получения антирезусной сыворотки и приготовления различных реагентов.

Пробы на совместимость при проведении гемотрансфузии

При переливании эритроцитсодержащих компонентов крови, помимо определения группы крови и резус-фактора, проводятся две пробы, позволяющие выявить у реципиента наличие полных и неполных антител к эритроцитам донора. Кроме того, в обязательном порядке проводится трехкратная биологическая проба.

При переливании плазмы и ее препаратов выполняется только трехкратная биологическая проба.

При переливании больному компонентов крови из нескольких флаконов или контейнеров, пробы на совместимость должны быть сделаны с содержимым каждого флакона или контейнера, даже если на них указано, что кровь получена от одного и того же донора.

Проба на выявление полных антител

Ранее именовалась «Проба на индивидуальную совместимость», «Холодовая проба». Позволяет выявить агглютинины к антигенам систем АВО, MNSs,Lewisи др.

Проба выполняется с сывороткой крови реципиента, которую получают путем центрифугирования или отстаивания крови. Сыворотка годна к употреблению при условии ее хранения в холодильнике при температуре +4ºС не более 2-х дней.

На белую пластинку наносят 2-3 капли сыворотки крови больного, к которой добавляют в 5 раз меньшую каплю крови или эритроцитарной массы донора (из контейнера) — соотношение крови и сыворотки получается приблизительно 1:10. Стеклянной палочкой с оплавленным концом перемешивают кровь с сывороткой, затем пластинку покачивают в течение 5 мин., наблюдая за ходом реакции. По истечении указанного времени в реагирующую смесь рекомендуется добавить 1-2 капли физиологического раствора для ликвидации «ложной агглютинации».

Отсутствие агглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента, а появление агглютинации указывает на их несовместимость и недопустимость переливания этой крови.

Проба на выявление неполных антител

Ранее именовалась «Проба на совместимость по Rh-фактору», «Тепловая проба».

Может осуществляться несколькими способами. Наиболее чувствительной является непрямая проба Кумбса. Однако ее выполнение достаточно сложно, требует специального реактива (антирезусная сыворотка) и значительного времени (около 2 часов). Вследствие этого проба Кумбса выполняется только в условиях лаборатории по специальным показаниям, для индивидуального подбора крови «сложным» реципиентам. Несколько уступает ей в точности, но технически легче осуществима проба с 10% раствором желатина на водяной бане. Проба с 33% раствором полиглюкина технически наиболее простая и быстрая, но и наименее точная. Для нужд практического здравоохранения наиболее подходящей является проба с 10% раствором желатина на водяной бане.

Проба на совместимость по Rh-фактору с использованием 10% раствора желатины.

Суть реакции состоит в создании коллоидной среды и повышенной температуры, при которых неполные антитела адсорбируются на молекулах желатина и взаимодействуя с поверхностными антигенами эритроцитов, агглютинируют их .

Проба производится в пробирках при температуре + 46-48ºС в течение 10 — 15 мин. На дно пробирки, соответственно обозначенной, помещают 1 каплю эритроцитов донора, затем в нее добавляют 2 капли сыворотки больного и 2 капли подогретого до разжижения 10% раствора желатина. Раствор желатина перед употреблением необходимо тщательно просмотреть. При помутнении или появлении хлопьев желатина непригодна. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания и помещают на водяную баню при температуре + 46-48ºС на 10 — 15 минут или в термостат при той же температуре на 30 мин. Затем в пробирку добавляют в нее 5-8 мл изотонического раствора хлорида натрия, перемешивают содержимое путем 1 — 2 кратного перевертывания пробирки и просматривают на свет невооруженным глазом или через лупу.

Наличие агглютинации в виде взвеси мелких, реже — крупных комочков на фоне просветленной или полностью обесцвеченной жидкости означает, что кровь донора несовместима с кровью больного и не может быть ему перелита.

Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным, слегка опалесцирует в ней не наблюдается агглютинации эритроцитов, то кровь донора совместима с кровью больного в отношении резус-фактора Rh (D).

NB! В Инструкции 2002 г. по сравнению с предшествовавшими инструктивными документами в технику постановки пробы с 10% желатином на водяной бане внесены изменения.Ранее время пребывания на водяной бане было 10 мин., в новой Инструкции – 15 мин. Введено использование термостата вместо водяной бани.

Проба на совместимость по Rh-фактору с использованием 33% раствора полиглюкина.

Суть пробы та же, что и предыдущей, но исключен температурный фактор.

Проба проводится в пробирке без подогрева в течение 5 мин. На дно пробирки, предварительно обозначенной, вносят 2 капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина, специально выпускаемого для этой цели во флаконах по 5 мл. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания, затем пробирку наклоняют до почти горизонтального уровня и медленно поворачивают таким образом, чтобы содержимое пробирки растеклось по стенкам. Эту процедуру продолжают в течение 5 мин. Затем в пробирку доливают 3-4 мл изотонического раствора хлорида натрия, перемешивают путем 2-3 кратного плавного перевертывания пробирки, закрыв ее пробкой и просматривают на свет невооруженным глазом.

При наличии в растворе агглютинатов на фоне просветленной или полностью обесцвеченной жидкости дается заключение о том, что кровь донора несовместима с кровью больного и не может быть ему перелита. Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным, без признаков агглютинации, то дается заключение о совместимости крови больного и донора по Rh_о(D) фактору.