от светового микроскопа к гематологическим анализаторам / Lab4U corporate blog / Habr
Общий клинический анализ крови – это самый распространенный диагностический тест, который назначает пациенту врач. За последние десятилетия технология этого рутинного, но очень информативного исследования проделала колоссальный рывок – она стала автоматической. В помощь врачу лабораторной диагностики, орудием труда которого был обычный световой микроскоп, пришли высокотехнологичные автоматические гематологические анализаторы.
В этом посте мы расскажем, что именно происходит внутри «умной машины», видящей нашу кровь насквозь, и почему ей следует верить. Мы будем рассматривать физику процессов на примере гематологического анализатора UniCel DxH800 мирового бренда Beckman Coulter. Именно на этом оборудовании выполняются исследования, заказанные в сервисе лабораторной диагностики LAB4U.RU. Но для того, чтобы понять технологию автоматического анализа крови, мы разберемся с тем, что видели врачи-лаборанты под микроскопом и как они интерпретировали эту информацию.
Параметры анализа крови
Итак, в крови содержится три вида клеток:
- лейкоциты, обеспечивающие иммунную защиту;
- тромбоциты, отвечающие за свертываемость крови;
- эритроциты, осуществляющие транспорт кислорода и углекислого газа.
Эти клетки находятся в крови в совершенно определенных количествах. Их обуславливают возраст человека и состояние его здоровья. В зависимости от условий, в которых находится организм, костный мозг производит столько клеток, сколько их требуется организму. Поэтому, зная количество определенного вида клеток крови и их форму, размер и другие качественные характеристики, можно уверенно судить о состоянии и текущих потребностях организма. Именно эти ключевые параметры – количество клеток каждого вида, их внешний вид и качественные характеристики – составляют общий клинический анализ крови.
При проведении общего анализа крови производят подсчет количества эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов. С лейкоцитами сложнее: их несколько видов, и каждый вид выполняет свою функцию. Выделяют 5 разных видов лейкоцитов:
- нейтрофилы, нейтрализующие в основном бактерии;
- эозинофилы, нейтрализующие иммунные комплексы антиген-антитело;
- базофилы, участвующие в аллергических реакциях;
- моноциты – главные макрофаги и утилизаторы;
- лимфоциты, обеспечивающие общий и местный иммунитет.
В свою очередь, нейтрофилы по степени зрелости разделяют на:
- палочкоядерные,
- сегментоядерные,
- миелоциты,
- метамиелоциты.
Процент каждого вида лейкоцитов в их общем объеме называют лейкоцитарной формулой, которая имеет важное диагностическое значение. Например, чем более выражен бактериальный воспалительный процесс, тем больше нейтрофилов в лейкоцитарной формуле. Наличие нейтрофилов разной степени зрелости говорит о тяжести бактериальной инфекции. Чем острее процесс, тем больше в крови палочкоядерных нейтрофилов. Появление в крови метамиелоцитов и миелоцитов говорит о крайне тяжелой бактериальной инфекции. Для вирусных заболеваний характерно увеличение лимфоцитов, при аллергических реакциях – увеличение эозинофиллов.
Важный и наиболее известный показатель – количество в крови гемоглобина – сложного белка, обеспечивающего поступление кислорода к тканям и выведение углекислого газа. Концентрация гемоглобина в крови – главный показатель при диагностике анемий.
Еще один из важных параметров – это скорость оседания эритроцитов (СОЭ). При воспалительных процессах у эритроцитов появляется свойство слипаться друг с другом, образуя небольшие сгустки. Обладая большей массой, слипшиеся эритроциты под действием силы тяжести оседают быстрее, чем одиночные клетки. Изменение скорости их оседания в мм/ч является простым индикатором воспалительных процессов в организме.
Как было: скарификатор, пробирки и микроскоп
Забор крови
Вспомним, как раньше сдавали кровь: болезненный прокол подушечки скарификатором, бесконечные стеклянные трубочки, в которые собирали драгоценные капли выжатой крови. Как лаборант одним стёклышком проводил по другому, где находилась капля крови, царапая на стекле номер простым карандашом. И бесконечные пробирки с разными жидкостями. Сейчас это уже кажется какой-то алхимией.
Кровь брали именно из безымянного пальца, на что были вполне серьезные причины: анатомия этого пальца такова, что его травмирование дает минимальную угрозу сепсиса в случае инфицирования ранки. Забор крови из вены считался куда более опасным. Поэтому анализ венозной крови не был рутинным, а назначался по необходимости, и в основном в стационарах.
Стоит отметить, что уже на этапе забора начинались значительные погрешности. Например, разная толщина кожи дает разную глубину укола, вместе с кровью в пробирку попадала тканевая жидкость – отсюда изменение концентрации крови, кроме того, при давлении на палец клетки крови могли разрушаться.
Помните ряд пробирок, куда помещали собранную из пальца кровь? Для подсчета разных клеток действительно нужны были разные пробирки. Для эритроцитов – с физраствором, для лейкоцитов – с раствором уксусной кислоты, где эритроциты растворялись, для определения гемоглобина – с раствором соляной кислоты. Отдельный капилляр был для определения СОЭ. И на последнем этапе делался мазок на стекле для последующего подсчета лейкоцитарной формулы.
Анализ крови под микроскопом
Для подсчета клеток под микроскопом в лабораторной практике использовался специальный оптический прибор, предложенный еще в ХIX веке русским врачом, именем которого этот прибор и был назван – камера Горяева. Она позволяла определить количество клеток в заданном микрообъеме жидкости и представляла собой толстое предметное стекло с прямоугольным углублением (камерой). На нее была нанесена микроскопическая сетка. Сверху камера Горяева накрывалась тонким покровным стеклом. Эта сетка состояла из 225 больших квадратов, 25 из которых были разделены на 16 малых квадратов. Эритроциты считались в маленьких исчерченных квадратах, расположенных по диагонали камеры Горяева. Причем существовало определенное правило подсчета клеток, которые лежат на границе квадрата. Расчет числа эритроцитов в литре крови осуществлялся по формуле, исходя из разведения крови и количества квадратов в сетке. После математических сокращений достаточно было посчитанное количество клеток в камере умножить на 10 в 12-й степени и внести в бланк анализа.
Лейкоциты считали здесь же, но использовали уже большие квадраты сетки, поскольку лейкоциты в тысячу раз больше, чем эритроциты. После подсчета лейкоцитов их количество умножали на 10 в 9-й степени и вносили в бланк. У опытного лаборанта подсчет клеток занимал в среднем 3-5 мин.
Методы подсчета тромбоцитов в камере Горяева были очень трудоемки из-за малой величины этого вида клеток. Оценивать их количество приходилось только на основе окрашенного мазка крови, и сам процесс был тоже весьма трудоемким. Поэтому, как правило, количество тромбоцитов рассчитывали только по специальному запросу врача.
Лейкоцитарную формулу, то есть процентный состав лейкоцитов каждого вида в общем их количестве мог определять только врач – по результатам изучения мазков крови на стеклах.
Визуально определяя находящиеся в поле зрения различные виды лейкоцитов по форме их ядра, врач считал клетки каждого вида и общее их количество. Насчитав 100 в совокупности, он получал требуемое процентное соотношение каждого вида клеток. Для упрощения подсчета использовались специальные счетчики с отдельными клавишами для каждого вида клеток.
Примечательно, что такой важный параметр, как гемоглобин, определялся лаборантом визуально (!) по цвету гемолизированной крови в пробирке с соляной кислотой. Метод был основан на превращении гемоглобина в солянокислый гематин коричневого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина. Полученный раствор солянокислого гематина разводили водой до цвета стандарта, соответствующего известной концентрации гемоглобина. В общем, прошлый век
Как стало: вакуумные контейнеры и гематологические анализаторы
Начнем с того, что сейчас полностью поменялась технология забора крови. На смену скарификаторам и стеклянным капиллярам с пробирками пришли вакуумные контейнеры. Использующиеся теперь системы забора крови малотравматичны, процесс полностью унифицирован, что значительно сократило процент погрешностей на этом этапе. Вакуумные пробирки, содержащие консерванты и антикоагулянты, позволяют сохранять и транспортировать кровь от точки забора до лаборатории. Именно благодаря появлению новой технологии стало возможным сдавать анализы максимально удобно – в любое время, в любом месте.
На первый взгляд, автоматизировать такой сложный процесс, как идентификация клеток крови и их подсчет, кажется невозможно. Но, как обычно, все гениальное просто. В основе автоматического анализа крови лежат фундаментальные физические законы. Технология автоматического подсчета клеток была запатентована в далеком 1953 году американцами Джозефом и Уолессом Культерами. Именно их имя стоит в название мирового бренда гематологического оборудования Bеckman&Coulter.
Подсчет клеток
За прошедшие более 60 лет технология автоматического гематологического анализа прошла большой путь. Вначале это были простые счетчики клеток, определяющие 8-10 параметров: количество эритроцитов (RBC), количество лейкоцитов (WBC), гемоглобин (Hb) и несколько расчетных. Такими были анализаторы первого класса.
Второй класс анализаторов определял уже до 20 различных параметров крови. Они существенно выше по уровню в дифференциации лейкоцитов и способны выделять популяции гранулоцитов (эозинофилы + нейтрофилы + базофилы), лимфоцитов и интегральной популяции средних клеток, куда относились моноциты, эозинофилы, базофилы и плазматические клетки. Такая дифференциация лейкоцитов успешно использовалась при обследовании практически здоровых людей.
Самыми технологичными и инновационными анализаторами на сегодняшний день являются машины
Современные аппараты BeckmanCoulter используют метод многопараметрической проточной цитометрии на основе запатентованной технологии VCS (Volume-Conductivity-Scatter). VCS-технология подразумевает оценку объема клетки, ее электропроводимость и светорассеяние.
Первый параметр – объем клетки – измеряется с использованием принципа Культера на основе оценки сопротивления при прохождении клеткой апертуры при постоянном токе. Величину и плотность клеточного ядра, а также ее внутренний состав определяют с помощью измерения ее электропроводности в переменном токе высокой частоты. Рассеяние лазерного света под разными углами позволяет получить информацию о структуре клеточной поверхности, гранулярности цитоплазмы и морфологии ядра клетки.
Полученные по трем каналам данные комбинируются и анализируются. В результате клетки распределяются по кластерам, включая разделение по степени зрелости эритроцитов и лейкоцитов (нейтрофилов). На основе полученных измерений этих трех размерностей определяется множество гематологических параметров – до 30 в диагностических целях, более 20 в исследовательских целях и более ста специфичных расчетных параметров для узкоспециализированных цитологических исследований. Данные визуализируются в 2D- и 3D-форматах. Врач-лаборант, работающий с гематологическим анализатором BackmanCoulter, видит результаты анализа на мониторе примерно в таком виде:
А далее принимает решение – надо ли их верифицировать или нет.
Стоит ли говорить, что информативность и точность современного автоматического анализа во много раз выше мануального? Производительность машин подобного класса – порядка сотни образцов в час при анализе тысяч клеток в образце. Вспомним, что при микроскопии мазка врачом анализировалось только 100 клеток!
Однако несмотря на эти впечатляющие результаты, именно микроскопия до сих пор пока остается «золотым стандартом» диагностики. В частности, при выявлении аппаратом патологической морфологии клеток образец анализируется под микроскопом вручную. При обследовании больных с гематологическими заболеваниями микроскопия окрашенного мазка крови проводится только вручную опытным врачом-гематологом. Именно так, вручную, дополнительно к автоматическому подсчету клеток, выполняется оценка лейкоцитарной формулы во всех детских анализах крови по заказам, сделанным с помощью лабораторного онлайн-сервиса LAB4U.RU.
Вместо резюме
Технологии автоматизированного гематологического анализа продолжают активно развиваться. По существу они уже заменили микроскопию при выполнении рутинных профилактических анализов, оставив ее для особо значимых ситуаций. Мы имеем в виду детские анализы, анализы людей, имеющих подтвержденные заболевания, особенно гематологические. Однако в обозримом будущем и на этом участке лабораторной диагностики врачи получат аппараты, способные самостоятельно выполнять морфологический анализ клеток с использованием нейронных сетей. Снизив нагрузку на врачей, они в то же время повысят требования к их квалификации, поскольку в зоне принятия решений человеком останутся только нетипичные и патологические состояния клеток.
Количество информативных параметров анализа крови, увеличившиеся многократно, поднимает требования к профессиональной квалификации и врача-клинициста, которому необходимо анализировать сочетания значений массы параметров в диагностических целях. На помощь врачам этого фронта идут экспертные системы, которые, используя данные анализатора, предоставляют рекомендации по дальнейшему обследованию пациента и выдают возможный диагноз. Такие системы уже представлены на лабораторном рынке. Но это уже тема отдельной статьи.
| Главная » Статьи и полезные материалы » Микроскопы » Статьи о микроскопах, микропрепаратах и исследованиях микромира » Как выглядят лейкоциты под микроскопом Лейкоциты – защитные клетки крови человека и животных. Они оберегают организм от патогенных микробов и предотвращают развитие патологических процессов. Лейкоциты в зависимости внешнего вида и выполняемым функциям подразделяются на подвиды. Одни уничтожают врагов, другие вырабатывают специальные антитела, третьи очищают кровь от «мусора» – погибших лейкоцитов и останков микробов. Если изучить лейкоциты под микроскопом, их состав и активность помогут диагностировать или исключить конкретное заболевание. Лейкоциты под микроскопом: фотоЧтобы понять, на что похожи лейкоциты под микроскопом, посмотрите на фото ниже. Красные овальные клетки с темной точкой в центре – это эритроциты. Они переносят кислород и обеспечивают органы живого организма необходимой энергией. Рядом с ними можно заметить черные и фиолетовые пятна разной формы. Это и есть лейкоциты. В зависимости от возраста и выполняемых функций они выглядят немного по-разному. В норме в крови человека присутствует пять видов лейкоцитов: базофилы, эозинофилы, нейтрофилы, лимфоциты и моноциты.
Изучение крови – одно из самых захватывающих направлений в микробиологии. Но не обязательно быть сотрудником клинической лаборатории, чтобы узнать, как выглядят лейкоциты под микроскопом. Резать себе палец тоже не нужно. Мазок крови – популярный готовый микропрепарат. Его включают практически во все наборы для любительских микроскопов. Для наблюдения эритроцитов хватит небольшого увеличения в 150х, а вот лейкоциты лучше рассматривать на кратности свыше 300х. Более мощный микроскоп покажет все многообразие иммунной системы живого организма и позволит детально рассмотреть строение эритроцита. Однако иммунные клетки можно увидеть не только в мазке крови. Изучая лейкоциты в моче под микроскопом, врач может диагностировать ряд воспалительных заболеваний почек и мочевого пузыря. Именно поэтому при недомогании мы сдаем несколько анализов: защитные клетки преодолевают длинный путь и рассказывают врачу сложную историю заболеваний нашего организма. Любопытно, что даже в здоровом организме количество лейкоцитов постоянно меняется. Исследования показали, что к вечеру и после приема пищи их становится больше. Небольшое повышение численности лейкоцитов заметно и после физического или нервного напряжения, при сильном изменении температуры окружающей среды, после приема некоторых лекарств. Хотя значительное изменение состава крови, чаще всего, связано все-таки с воспалительными процессами. 4glaza.ru Использование материала полностью для общедоступной публикации на носителях информации и любых форматов запрещено. Разрешено упоминание статьи с активной ссылкой на сайт www.4glaza.ru. Производитель оставляет за собой право вносить любые изменения в стоимость, модельный ряд и технические характеристики или прекращать производство изделия без предварительного уведомления.
Другие обзоры и статьи о микроскопах, микропрепаратах и микромире:
|
Лейкоциты под микроскопом — фото на увеличении 1600 крат — структура и разновидности групп
Вернуться к списку Задать свой вопрос
Соединительная ткань, формируемая на этапе внутриутробного развития плода, подразделяется на твердую и жидкую подвижную, называемую кровью. Ее микроскопирование подразумевает исследование плазмы, кровяных телец, тромбоцитов и лейкоцитов под микроскопом. Для этих целей рекомендуется бинокулярная модель с максимальным увеличением до 1600 крат, оснащённая двухлинзовым конденсором с вертикальным перемещением и револьвером на 4 позиции с ахроматическими или планахроматическими объективами, один из которых допускает использование в масляной иммерсии.
Лейкоциты являются неоднородными белыми клетками крови, выполняющими защитную функцию от негативных внешних воздействий, поддерживая гомеостаз внутренней среды. Это фундаментальные элементы иммунной системы, их количество не постоянное и динамично изменяется. Рождаются в костном мозге при гемопоэзе (кроветворении), затем благодаря гидростатическому давлению разносятся кровотоком. Способны проникать сквозь эластичные стенки капилляров и артерий во внеклеточный матрикс (интерстиций), если человеческий организм подвергается действию инфекции. Они устремляются к месту инфицирования и активно поглощают микроорганизмы, но в итоге это заканчивается ростом размеров и разрушением. Этот процесс поглощения и переваривания называется фагоцитозом, а видимым его результатом становится образование гноя.
По признакам подразделяются на следующие совокупности:
- Циркулирующие и пристеночные зернистые гранулоциты. Срок их жизни – не более двух суток. В их цитоплазме имеются гранулы: 1) Лизосомы, окружённые мембраной, внутри которых находятся растворимые молекулы белков; 2) Пероксисомы с ферментами, окисляющими жиры;
- Агранулоциты. Представлены лимфоцитами, вырабатывающими антитела (плазменные белковые соединения), а также крупными овальными моноцитами с несегментированным ядром.
Повышению числа лейкоцитов способствуют следующие факторы:
- Время, предшествующее ночи;
- Любые вещества, употребляемые в пищу;
- Состояние стресса и эмоционального перенапряжения;
- Физические нагрузки.
Процентное соотношение определяется благодаря лейкоцитарной формуле. Для подсчетов надо приготовить микропрепарат. Последовательность его подготовки включает:
- Промывание и обезжиривание предметного стекла;
- Затем на него необходимо осуществить перевод капельки крови из проколотого пальца на расстоянии один сантиметр от шлифованного края;
- Другое стеклышко ставится под углом 30-40 градусов. Резко передвинув его вперед, слегка касаясь капли, делается мазок;
- Подсушить и произвести фиксацию в метиловом спирте;
- Окрашивать в течение 30 минут азуром (кислый краситель для щелочных частей) и эозином.
Просмотр лейкоцитов под микроскопом осуществляется в оптической визуализации (наблюдатель смотрит в окуляр) или цифровой (изображение выводится на монитор компьютера при подключении окулярной камеры). Наблюдения стоит начать с маленькой кратности, постепенно увеличив ее до значений свыше 1000х. Размещенные выше фотографии сделаны на приближении 1600х в проходящем свете (светлое поле).
Фотографии под микроскопом (29 фото)
Этот удивительный мир скрывает от нас много интересного и необычного.
Мы не можем рассмотреть глазом всяких паразитов и микроорганизмы.
Но благодаря микроскопу, мы можем увидеть мир с другой стороны.
Клетки рака легких
Клетка рака груди
Клетка рака кожи
Вольфия
Лепесток лютика
Лист клубники
Бактерии на человеческом языке
Сибиреязвенная бацилла
Личинка нематоды
Мушиная лапка
Глаза тарантула
Платяная вошь
Снег
Кишечные ворсинки
Сперматозоид и яйцеклетка
Зуб
Лимфоцит
Красные кровяные тельца
Кровь человека
Песчаник
Сухая губка
Порошок ксерокса
Лимфоцит
Икра омара
Присоски кальмара
Микроскопия мазка крови
Микроскопия мазка крови
Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.
Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.
Синонимы русские
Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.
Синонимы английские
Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную или капиллярную кровь.
Общая информация об исследовании
Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови, а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.
Мазок периферической крови – это «моментальный снимок» клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45′ и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.
Для чего используется исследование?
Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.
Когда назначается исследование?
Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. Обнаружение в мазке патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.
Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.
Что означают результаты?
Референсные значения
Нейтрофилы — палочк.: 0 — 5 %.
Нейтрофилы — сегмент.
|
Возраст |
Референсные значения |
|
До 1 года |
16 — 45 % |
|
1-2 года |
28 — 48 % |
|
2-5 лет |
32 — 55 % |
|
5-7 лет |
38 — 58 % |
|
7-8 лет |
41 — 60 % |
|
8-12 лет |
43 — 60 % |
|
12-16 лет |
45 — 60 % |
|
Больше 16 лет |
47 — 72 % |
Лимфоциты, %
|
Возраст |
Референсные значения |
|
До 1 года |
45 — 75 % |
|
1-2 года |
37 — 60 % |
|
2-4 года |
33 — 55 % |
|
4-6 лет |
33 — 50 % |
|
6-8 лет |
30 — 50 % |
|
8-10 лет |
30 — 46 % |
|
10-16 лет |
40 — 45 % |
|
Больше 16 лет |
19 — 37 % |
Моноциты, %
|
Возраст |
Референсные значения |
|
До 1 года |
4 — 10 % |
|
1-2 года |
3 — 10 % |
|
Больше 2 лет |
3 — 12 % |
Эозинофилы, %
|
Возраст |
Референсные значения |
|
До 1 года |
1 — 6 % |
|
1-2 года |
1 — 7 % |
|
2-4 года |
1 — 6 % |
|
Больше 4 лет |
1 — 5 % |
Базофилы, %: 0 — 1 %.
Причины изменения показателей
Изменения в мазке крови не всегда позволяют поставить диагноз. Как правило, они указывает на наличие некоего заболевания, что предполагает дальнейшее обследование в целях постановки точного диагноза.
Также рекомендуется
Кто назначает исследование?
Врач общего профиля, терапевт, хирург, инфекционист, гематолог.
Кровь лягушки под микроскопом
Кровь — соединительная ткань, выполняющая несколько жизненно-важных функций, одна из которых – перенос питательных веществ, продуктов обмена и газов. Мазок крови лягушки – препарат, который может изучаться при увеличении ок.15, иммерсионным методом.
Кровь состоит из плазмы и взвешенных в ней клеток – эритроцитов, содержащих гемоглобин и имеющих ядро, и лейкоцитов.
На микропрепарате мазка крови видна плазма и кровяные тельца: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.
1. Эритроциты лягушки в отличие от эритроцитов человека, ядерные, кроме того, они имеют овальную форму. Данная особенность связана с количеством гемоглобина, переносимого эритроцитами человека – двояковогнутая поверхность и отсутствие ядра увеличивают площадь, которую могут занять молекулы кислорода.
Эритроциты лягушки довольно крупны — до 22,8 мкм в диаметре, окрашены на препарате в розовый цвет. При исследовании можно обнаружить, что общее количество этих кровяных телец невелико – в 1мм3 их содержится не более 0,33 – 0,38 млн. Сравнивая с содержанием эритроцитов в 1мм3 крови человека (около 5млн) видно, что земноводные нуждаются в кислороде в гораздо меньшей степени, чем млекопитающие. Причины этого – дополнительная возможность усвоения кислорода поверхностью кожи у земноводных и низкая потребностью в нем за счет пойкилотермии.
Поперечная ось эритроцитов лягушки равна 15,8 μ, продольная составляет 22,8 μ.
2. Лейкоциты в крови лягушки.
Лейкоциты делятся на гранулоциты, содержащие гранулы – зерно и агранулоциты. К гранулоцитам относят эозинофилы, нейтрофилы, базофилы, к агранулоцитам — моноциты и лимфоциты.
Общее количество лейкоцитов в 1мм3 крови составляет 6 — 25 тыс. Они имеют внешнее сходство с аналогичными клетками крови человека, курицы и лошади. Нейтрофилы имеют сегментированное ядро и бледно-розовую цитоплазму, в которой лежат мелкие розовые зерна. Нейтрофилы на препарате имеют заметное сегментированное ядро и цитоплазму светло-розового цвета. Их содержание от общего числа лейкоцитов – не более 17% .
Эозинофилы заметны крупными зернами яркого кирпичного цвета и небольшим ядром, разделенным на 2-3 сегмента. Общее количество эозинофилов — не более 7% от всех лейкоцитов.
Базофилы в препарате крови лягушки встречаются редко (не больше 2% от общего количества), отличаются крупными ярко-фиолетовыми зернами и большим ядром.Большее число из всех лейкоцитов принадлежит лимфоцитам (до 75,2%). На препарате их выделяют за счет крупного ядра и узкого слоя цитоплазмы, окрашенной в светло-голубой цвет. Характерной особенностью этих клеток крови являются ложноножки – выросты цитоплазмы, с помощью которых они передвигаются.Моноциты лягушки имеют базофильную цитоплазму, окрашенную в неяркие серый или сиреневый цвета. Ядро может иметь выросты или, наоборот, вдавленные участки.
Тромбоциты — клетки с ядром, очень похожие на тромбоциты курицы.
Рассматривая микропрепарат крови земноводного, можно видеть, что ее состав определяется образом жизни и другими физиологическими особенностями организма. Рассмотреть кровь лягушки вам помогут следующие микроскопы:
Микроскопы Levenhuk Фиксики
Микроскопы Levenhuk Фиксики — это одни из самых простейших микроскопов начального уровня. Идеально подойдут для совсем меленьких детишек. Яркие цвета помогут пробудить детский интерес к исследованиям!
ЛЕЙКОЦИТЫ — НЕВИДИМЫЕ ЗАЩИТНИКИ НАШЕГО ЗДОРОВЬЯ
Лейкоциты (голубым цветом) атакуют бактерии Стафилококка золотистого, который является причиной возникновения широкого спектра болезней от угревой сыпи до пневмонии (Источник фото: NIAID/RML)
Лейкоциты — первоклассные «разведчики» и «спецназ» нашей иммунной системы. Любой враг, оказавшийся во внутренней среде нашего организма, быстро обнаруживается и безжалостно атакуется этими «отважными» клетками.
Лейкоциты по внешнему виду, функциям и происхождению делятся на пять видов: нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, лимфоциты и моноциты. Самыми многочисленными видами «клеток-защитников» организма человеческого являются нейтрофилы и лимфоциты. На их долю приходится от 87% до 94% всех лейкоцитов. Нейтрофилы играют очень важную роль в защите нашего организма от бактериальных и грибковых инфекций. Нейтрофилы циркулируют преимущественно в кровеносных сосудах и посредством фагоцитоза «пожирают» чужаков, оказавшихся в нашем организме. После этого нейтрофилы погибают.
Нейтрофил, поглощающий бактерию сибирской язвы (Источник фото: wikipedia.org).
Очень наглядно демонстрирует «погоню» нейтрофила за Стафилококком золотистым, с последующим фагоцитозом это видео.
Лимфоциты находятся преимущественно в тканях организма. Они контактно взаимодействуют с чужеродными клетками, помимо этого лимфоциты вырабатывают антитела.
Фотография одного из лимфоцитов, сделанная с помощью электронного микроскопа (Источник фото: wikipedia.org).
Неблагоприятная экологическая обстановка наносит серьёзный удар по «обороне» нашего организма, что сопровождается, в первую очередь, снижением количества лейкоцитов и угнетением процесса фагоцитоза. При проведении вакцинации в экологически неблагоприятных зонах необходимо это учитывать.