Определение группы крови при помощи цоликлонов – Определение цоликлонами группы крови и резус-фактора: алгоритм действий с помощью анти-А, В и D (Д) от «Медиклон», таблица результатов, цена анализа по этому методу

Содержание

Б. Определение группы крови с помощью цоликлонов (моноклональных антител)

Используются стандартные наборы моноклональных антител высокой специфичности, содержащие реагенты (цоликлоны) анти-А, анти-В и анти-АВ. Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии реагентов (цоликлонов) анти-А и анти-В.

На маркированную пластинку капают в три точки, исследуемые эритроциты (0,02 мл). Рядом с ними, под соответствующими надписями, помещают цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной капле (0,1 мл) в соотношении 1:5… 1:6. После смешивания реагентов и крови стеклянными палочками (уголками предметных стекол), пластинку периодически покачивают, ход реакции наблюдают в течение 3 мин.

Оценка результата проводится по наличию агглютинации эритроцитов с соответствующим реагентом.

Возможны четыре варианта определения результатов:

а) Агглютинация во всех трех каплях цоликлонов – это значит, что исследуемые эритроциты содержат оба антигена (А и В) и кровь принадлежит к группе АВ (IV). В целях исключения панагглютинации, которая может наблюдаться у отдельных больных (миеломная болезнь, ожоговая болезнь), а также в пуповинной крови новорожденных, в случае установления группы крови АВ (IV) необходимо провести контрольное исследование: одну каплю (0,1 мл) изотонического раствора натрия хлорида смешать с маленькой каплей (0,01 мл) исследуемой крови. Реакция агглютинации должна

отсутствовать.

б) Агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-АВ – это означает, что исследуемые эритроциты содержат только антиген А и кровь принадлежит к группе А (II).

в) Агглютинация с цоликлонами анти-В и анти-АВ – это означает, что исследуемые эритроциты содержат только антиген В и кровь принадлежит к группе В (III).

г) Агглютинация отсутствует во всех трех каплях цоликлонов — это значит, что исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В, и кровь принадлежит к группе 0(I).

Оценка результатов определения групп крови при помощи цоликлонов приведена в таблице:

Группа крови	цоликлон «анти-A»	цоликлон «анти-B»	цоликлон «анти-АВ»
0(I)	—	—	—
A(II)	+	—	+
B(III)	—	+	+
AB(IV)	+	+	+

Знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) ее отсутствие.

При наличии агглютинации со всеми тремя реагентами (цоликлонами) необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого, ещё одну каплю эритроцитов смешивают с каплей физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.

Подробные сведения по вопросу «Определение группы крови системы аво цоликлонами»

Цоликлоны изготавливают из водяночной (асцитной) жидкости лабораторных мышей – носителей «анти – А» и «анти – В» гибридом.

Цоликлон «анти – А»(красного цвета) представляет собой раствор антител «анти – А».

Цоликлон «анти – В»(синего цвета) представляет собой раствор «анти – В».

Цоликлон «анти – АВ»(неокрашенный)представляет собой смесь растворов антител «анти – А» и «анти – В» и предназначен для дополнительного контроля группы крови О(I).

Срок хранения— 2 года при температуре +2^°…+6^°

Вскрытый флакон можно хранитьв закрытом виде при температуре +2⁰…+6⁰

в течение 21 дня (дату вскрытия флакона обязательно пишут на его этикетке).

Цоликлоны предназначены дляопределения групп крови человека системы АВ0 в реакциях гемагглютинации, они применяются взамен стандартных иммунных сывороток и параллельно с ними.

Цоликлоны предназначены для выявления в эритроцитах человека антигенов системы АВ0. Анализ может проводиться с кровью, как взятой в консервант, так и без консерванта, а также и с капиллярной кровью, взятой из пальца. Технология изготовления цоликлона исключает возможность его заражения патогенными для человека вирусами.

Определение группы крови проводится в помещении с хорошим освещением при температуре +15⁰…+25⁰на пластинке светлого однотонного цвета с чистой сухой обезжиренной поверхностью (возможно использование планшетов для определения групп крови). Также необходимы:

— одноразовые пастеровские пипетки для нанесения на пластинку капель исследуемой крови;

— палочки стеклянные (предметные стёкла) для смешивания цоликлонов с исследуемой кровью;

-пробирки с исследуемой кровью (в штативе).

Проведение исследования. Оценка результата:

Нанесите на планшет (пластинку) индивидуальными пипетками цоликлоны «анти–А», «анти–В» и «анти–АВ» по одной большой капле (0,1мл) под соответствующими надписями (при использовании неградуированных пипеток, 0,1мл – это одна полная капля).

Рядом с каждой каплей раствора антител нанесите маленькую (0,02мл) каплю исследуемой крови. Соотношение «цоликлон: кровь» соответствует соотношению «5:1». Смешайте каждую каплю цоликлона с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой. Наблюдайте за ходом реакции с цоликлонами, при лёгком покачивании пластинки (планшета). в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов цоликлонами обычно наступает в первые 3–5 секунд, но наблюдение следует вести 3 минут, ввиду более позднего появления агглютинации эритроцитов, содержащих слабые разновидности антигенов

АилиВ.

Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным.

Положительный результат выражается в склеивании (агглютинации) эритроцитов. Агглютинаты видны невооружённым глазом в виде мелких красных зёрнышек, песчинок, быстро сливающихся в крупные хлопья, а капля быстро просветляется.

При отрицательной реакции, гемагглютинация не развивается, капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты (зёрнышки, песчинки, хлопья) в ней не обнаруживаются.

Объяснение результатов реакции исследуемой крови с цоликлонами представлено в таблице.

Результаты реакций с цоликлонами						Исследуемая кровь принадлежит к группе
контроль	цоликлон		цоликлон	цоликлон
физраствор (соответствует сыворотке IV группы)		«анти – А» (соответствует сыворотке III группы)	«анти — В» (соответствует сыворотке II группы)		«анти — АВ» (соответствует сыворотке I группы)
		—	—		—	ОI
		+	—		+	А(II)
		—	+		+	В(III)
—		+	+		+	АВ (IV)

Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации.

Знаком минус (-) обозначено отсутствие агглютинации.

При положительной реакции агглютинации со всеми тремя цоликлонами, необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов.

Для этого необходимо отдельно смешать одну большую (0,1мл) каплю физиологического раствора с маленькой (0,05–0,01мл) каплей исследуемой крови.

Кровь можно отнести к группе АВ(IV) только при отсутствии агглютинации исследуемых эритроцитов в физиологическом растворе.

При наличии агглютинации, при этом контрольном исследовании, заключение о групповой принадлежности крови не делают, образец крови направляют в специализированную лабораторию.

Окончательно, групповую принадлежность крови (в системе АВ0) устанавливают в лаборатории перекрёстным способом – по результатам перекрёстного определения: антигеновАиВна эритроцитах,антител «анти–А»и«анти–В»в сыворотке.

Цоликлон — Википедия

Материал из Википедии — свободной энциклопедии

Текущая версия страницы пока не проверялась опытными участниками и может значительно отличаться от версии, проверенной 22 ноября 2014; проверки требуют 7 правок. Текущая версия страницы пока не проверялась опытными участниками и может значительно отличаться от версии, проверенной 22 ноября 2014; проверки требуют 7 правок.

Цоликло́н

— это солевой раствор моноклональных антител к антигенам, расположенным на поверхности эритроцитов человека. Моноклональные антитела для цоликлонов получают при помощи гибридов, или определенных штаммов бактерий. Бактерии для таких производств получают методами генной инженерии.

Название препаратов происходит от названия института, где изобрели и изготовили эти растворы — Центральный Ордена Ленина Институт Клинической Онкологии в Москве, сейчас — Гематологический научный центр Росздрава.

Характеристика и основные свойства цоликлонов анти-А, анти-В и анти-АВ[править | править код]

Моноклональные Анти-А и Анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом, цоликлон Анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти-А и анти-В антител. Технология изготовления реагента исключает возможность его контаминации патогенными для человека вирусами.

Техника определения групп крови человека системы АВО с помощью цоликлонов[править | править код]

Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта; в крови, взятой из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на плоскости: на пластине или планшете. Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25°С. 1. На планшет или пластину индивидуальными пипетками наносятся цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями. Рядом с каплями антител наносится по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл). 3. Кровь смешивается с реагентом. Далее производится наблюдение за ходом реакции с цоликлонами при легком покачивании пластины или планшета в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек, но наблюдение следует вести 3 мин. — ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

Цоликлоны на практике применяются для определения групп крови. В настоящее время существует большое количество цоликлонов к разным антигенам, которые предназначены для определения групп крови по различным системам. Наиболее часто используются цоликлоны анти-А (красная жидкость), анти-B (синяя жидкость) и анти-D (прозрачная жидкость). Первые два цоликлона предназначены для определения группы крови по системе AB0, последний — для определения группы крови по системе резус. Кроме того, достаточно распространены в использовании цоликлон анти-А1 (лектин), позволяющий среди носителей А-антигена выбрать популяцию носителей ослабленного А2-антигена (то есть лиц, имеющих А2(II) или А2В(IV) группу крови). Неиспользование цоликлона анти-А1 чревато неверным результатом для такой категории лиц (вероятна постановка 0(I) вместо А2(II) и В(III) вместо А2В(IV) групп крови). Цоликлон анти-D имеет 2 модификации: собственно анти-D, используемый во врачебно-диагностической практике в комплексе с 10% желатином, и анти-D-супер, позволяющим произвести экспресс-определение резус-фактора (при этом все резус-отрицательные пробы требуют обязательной проверки цоликлоном анти-D, так как возможен вариант носительства ослабленного антигена системы резус).

Цоликлоны выпускаются в жидкой форме в пластиковых флаконах объёмом 10 мл с капельницей или в стеклянных флаконах объёмом 5 мл. Цоликлон Анти-А — красного цвета, Анти-В — синего и Анти-АВ — бесцветный. В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения — 2 года при температуре 2-8°С. Вскрытый флакон можно хранить при температуре 2-8°С в течение месяца в закрытом виде.

Инструкция по применению ЦОЛИКЛОНОВ Анти — А, Анти — В и Анти — АВ диагностических жидких для определения групп крови человека системы АВО (Утверждено Приказом № 2 МЗ РФ от 05.10.2000)

что это, определение группы крови

Цоликлоны, как бы ни звучало это непонятное название, представляют собой лишь моноклональные антитела, помещенные в солевой раствор. Названием отдали должное месту работы изобретателей растворов – цоли (Центральный Ордена Ленина Институт). Ныне это Гематологический научный центр.

Препараты, названные цоликлонами применяются в качестве реагентов для определения группы крови и ее резус-фактора. Поставляются цоликлоны в пластиковых флаконах по 10 мл. или же в стеклянных (5 мл) в жидком виде. Флаконы для удобства снабжены капельницами.

Метод определения группы крови цоликлонами прост и точен. По этой причине он используется как основной.

Содержание статьи

Что такое цоликлоны

Для определения группы крови и установления резус-фактора в лабораториях используется несколько методов, и анализ с применением цоликлонов используется чаще всего. Эти антитела моноклинального типа, разработанные инженерами-генетиками, имеют повышенную активность и обеспечивают ускоренную реакцию агглютинации.

Справочно. Агглютинация – склеивание и выпадение в осадок.

Принцип действия заключается в соединении с агглютиногенами – химическими компонентами, находящимися на верхнем слое определенных эритроцитов. В зависимости от реакции становится возможным определение группы крови цоликлонами. О наличии в составе агглютиногена А говорит реагент анти-А, соответственно, агглютиноген B выявляют с помощью вещества анти-B.

Отметим, что цоликлоны являются достаточно универсальным инструментом. Они позволяют определять группу крови как в системе AB0 (с использованием реагентов анти-А (красная жидкость) и анти-B (синяя жидкость)), так и в системе резус (с использованием реагента анти-D (прозрачная жидкость)).

Справочно. Для исследования используется нативная (живая) кровь в консерванте или без него, взятая из пальца.

Определение группы крови цоликлонами

Чтобы узнать ГК, используя цоликлоны, необходимо взять изделие с плоской поверхностью (планшет), сами реагенты и две капли крови. Для анализа подходит практически любая жидкость независимо от состояния (законсервированная или без консерванта) и способа забора (из вены/пальца). Перед нанесением на поверхности планшета делаются пометки, показывающие, где будет использоваться тот или иной цоликлон.

После подготовки поверхности лаборант наносит на нее по крупной капле реагента: обычно анти-А располагают слева, а анти-B – справа. Затем к веществу добавляют по кровяной капле, ее размер должен быть десятикратно меньше объема нанесенной жидкости.

Планшет требуется осторожно раскачивать из стороны в сторону, чтобы цоликлоны и кровь перемешались, но капли с разными реагентами не слились друг с другом. Спустя несколько минут можно наблюдать полное соединение жидкостей либо реакцию агглютинации, когда эритроциты склеиваются, а и наступает свертывание.

Результаты исследования расшифровывают следующим образом:

Отсутствие агглютинации в обоих случаях определяет первую группу.
Сворачивание при воздействии цоликлона анти-А говорит о том, что кровь относится ко второй группе.
Агглютинация в капле с реагентом анти-B – признак третьей группы.
Выпадение осадка в обоих каплях говорит о принадлежности к четвертой группе.

В случае появления последней реакции данные требуется проверить с помощью повторных анализов: кровяная капля смешивается с цоликлоном анти-AB, появление агглютинации подтвердит результат первого исследования. Вторая проверка исключает склеивание эритроцитов неспецифичного типа, которое может произойти при наличии ряда тяжелых болезней.

В рамках второго исследования кровь добавляют в раствор хлорида натрия: если жидкость относится к четвертой группе, положительной реакции на физраствор быть не должно, иначе речь идет о наличии заболевания, меняющего свойства кровяных телец.

Определение резус-фактора

Цоликлоны позволяют определить и резус-фактор, анализ проводится следующим образом:

На поверхность планшета наносится приблизительно 0,1 мл реагента.
Рядом капают 0,01 исследуемой крови.
Цоликлон и изучаемую жидкость смешивают специальной стеклянной палочкой, каждые полминуты планшет необходимо покачивать.

Важно! Возникновение агглютинации отмечается спустя 15 секунд после перемешивания, ярко заметный эффект наступает через 60 секунд, однако результат, который допустимо считать достоверным, наблюдается только через 3 минуты. В течение всего времени планшет нужно покачивать.

При склеивании и выпадении осадка из эритроцитов кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации резус-фактор получает отрицательную отметку. Увидеть результат при появлении хлопьев эритроцитов можно без использования специального лабораторного оборудования.

Нюансы процедуры

Точность исследования ГК и резус-фактора с помощью цоликлонов очень высока, однако порой анализ выдает неправильные результаты: причиной является фактор человеческой ошибки, когда процедуру проводят с нарушениями.

Чтобы снизить риск такой ошибки, нужно помнить о следующих аспектах:

Цоликлоны хранятся в холодильнике, оптимальный температурный режим – +2… +8 градусов по Цельсию. Если флакон распечатан, его содержимое нужно использовать в течение 30 дней, крышка должна быть плотно завинчена. Реагенты очень чувствительны к внешним воздействиям и при несоблюдении правил хранения или по истечении срока теряют свои качества, что приводит к ошибкам.
Исследование проводится при ярком освещении, оптимальный режим в лаборатории – +15… +25 градусов по Цельсию. Если климатические условия не дают возможности соблюсти нужную температуру воздуха, поверхность планшета перед процедурой охлаждают.
Важно не спутать, какие цоликлоны где находятся на планшете, для этой цели их местоположение обозначается на поверхности маркером. Хотя реагенты анти-А и анти-B имеют цветовое различие, после добавления крови оно практически исчезает.
Следует соблюдать пропорции жидкостей: если эритроцитов будет слишком много, реакцию агглютинации будет сложнее отследить, в противоположном случае (слишком малый объем) склеивание происходит в замедлении.
Нельзя допустить, чтобы две капли соединились: даже касание краями приводит к искажению результатов анализа. Если жидкости все же слились, исследование с помощью цоликлонов проводят сначала.
При смешении при помощи лабораторной стеклянной палочки необходимо брать отдельный предмет для каждой изучаемой капли.
Минимальная продолжительность наблюдения – 3 минуты, при неоднозначных результатах исследование длится до 5 минут.

В ходе процедуры можно отметить и реакции, способные ввести в заблуждение: например, замедленное склеивание происходит при воздействии второго реагента. Когда реакция затягивается, со временем жидкость подсыхает, что сопровождается естественным выпадением эритроцитов в осадок, поэтому этот результат не считается достоверным.

Также в ряде случаев отмечается оседание кровяных телец по краям: неопытные специалисты принимают эффект за склеивание, но в действительности это случается, если планшет оставили в неподвижном состоянии, наблюдая за реакцией. Только если поверхность слегка раскачивали, результат можно считать правильным.

Также определить группу может быть сложно, если пациент страдает от одной из болезней, изменяющих свойства кровяных телец. К таким заболеваниям относят проблемы печени, селезенки, пневмонию, ожоги различной степени, сепсис. Наличие таких болезней сильно обостряет способность эритроцитов выпадать в осадок, и панагглютинация наблюдается даже при воздействии физраствора.

Справочно. Панагглютинация представляет собой искажение процесса склеивания (агглютинации). Изменение белкового состава сыворотки крови может привести к склеиванию всех со всеми.

С другой стороны, цоликлоны не вызовут агглютинацию, если пациент страдает лейкозом: при этой болезни кровяные тельца не реагируют даже на высокоактивные раздражители, такое же явление характерно для младенцев.

Важно. У близнецов и людей, перенесших операцию по пересадке костного мозга или частые переливания жидкости иной группы, может появиться кровяная химера, при которой в кровеносной системе уживаются эритроциты различных типов.

В этом случае анализ особенно труден, для максимально точного определения химического состава требуется провести дополнительные лабораторные исследования с использованием специального оборудования и других способов.

Определение группы крови с помощью цоликлонов

Рубрика: анализ крови Опубликовано 19.11.2017 · Комментарии: 0 · На чтение: 5 мин · Просмотры:

— 1 955

Определение группы крови – обязательный анализ, который проходят все люди, поступающие на стационарное лечение. Без этого параметра специалист не сможет назначить грамотное лечение, а также отправить пациента на любое хирургическое вмешательство.

Провести определение группы крови с помощью цоликлонов сможет любой лаборант, если у него есть необходимые инструменты и реагенты. При этом использование цоликлонов является достаточно точным исследованием и крайне редко показывает ошибочные результаты.

Что это такое?

Цоликлон – антитело, которое появляется в результате генной инженерии. Обычно оно получается вследствие подсаживания специальных веществ в организм мыши.

Он начинает вырабатывать эти антитела, которые и синтезируются из асцитной жидкости животного. Ее и используют для изучения группы крови человека.

По своей морфологии, цоликлоны схожи с иммуноглобулинами класса М – антителами острой фазы. Механизм их действия работает за счет комплекса антиген-антитело.

Препараты цоликлонов

На сегодняшний день во всех лабораториях применяют 3 различных типа цоликлонов. Все они стандартизированы и прошли исследования. Выделяют цоликлоны – анти-А, анти-В, анти-АВ.

Каждый их них является специфическим, вызывают различные реакции. Из-за этого они вызывают развитие иммунной реакции.

Все препараты для определения группы крови выпускаются в специальных ампулах либо же флаконах, в которых содержится 5/10 мл раствора. Препарат имеет специальную окраску, которая помогает определить реагент.

Красный цвет – во флаконе находится цоликлон анти-А.
Синий цвет – во флаконе находится цоликлон анти-В.
Не имеет окраски – комбинированный цоликлон анти-АВ. При этом в некоторых случаях его называют анти-Д.

Определение группы крови с помощью цоликлонов

Способ определения группы крови

Используя цоликдонов позволяет быстро и точно определиться группу крови чедовека. Преимуществом такого исследования можно назвать то, что самого человека не нужно готовить к исследованию – любая кровь пригодна для изучения.

Перед тем, как приступить к исследованию, специалист берет небольшую пластинку. На ней высечены лунки, в которых присутствуют цоликлоны. В каждое углубление специалист добавляет по одной капле воды. При этом качество жидкости не влияет на точность результатов.

После этого специалист делает укол в палец и забирает определенное количество капиллярной крови. При этом для определения группы крови может использоваться кровь как с консервантом, так и без его использования.

Учитывайте, что для получения точного результата необходимо четко следовать всем правилам. Важно, чтобы соблюдались параметры окружающей среды: помещение должно быть светлым, проветриваемым, с определенным уровнем влажности.

Также следите, чтобы кровь была взята правильно, а реагенты – с нормальным сроком годности и не вскрытыми.

После этого специалист в каждое углубление, куда вы заранее добавили каплю жидкости, опускается 1 капля крови пациента. Специалист берет стеклянную палочку, после чего тщательно перемешивает компоненты.

Это необходимо для того, чтобы растворить цоликлоны. После этого на специальную планшетку наносятся по 1 капле каждого антитела на расстоянии нескольких миллиметров друг от друга. При этом необходимо использовать стеклянную палочку, которая не влияет на протекание реакции.

Располагать реагенты лучше всего следующим образом – А, В, АВ. После каждой капли размещайте небольшое количество человеческой крови, после чего постепенно перемешивайте компоненты. Следите, как происходит реакция.

Первые результаты от проведенного исследования вы сможете оценить уже через 5-10 секунд после начала анализа. Обычно уже спустя это время лаборант делает вывод о наличии либо отсутствии склеившихся эритроцитов. Такой процесс называется агглютинацией.

Именно это позволяет сделать вывод об определенной группе крови человека. Если же никаких изменений не происходит, то пациент отправляется на дополнительные исследования и диагностичесаие исследования.

Интерпретация результатов

Определение группы крови с помощью цоликлонов основано на визуальном исследовании. Врач должен определить, как жидкость взаимодействует с веществом. Возможно протекание множество различных реакций.

Расшифровка выглядит следующим образом:

Кровь относится к 1 группе, если во всех образцах крови отсутствует реакция.
Кровь относится ко 2 группе, если кровяные клетки начали взаимодействовать с цоликлоном анти-А.
Кровь относится к 3 группе, если эритроциты склеились с цоликлоном анти-В.
Кровь относится к 4 группе, если кровь взаимодействует со всеми веществами.

Для обучения максимально точных и правильных результатов, а также для определения резус-фактора, во все биоматериалы добавляют цоликлоны АВ. Если же кровь сворачивается, врач делает вывод о положительном резусе, если изменений не происходит – об отрицательном.

Что нужно помнить при проведении анализа?

Чтобы определение группы крови с помощью цоликлоном было максимально точным и достоверным, необходимо придерживаться следующих условий:

Реагенты необходимо хранить при 2-8 градусов тепла. При этом они должны быть плотно закрыты в специальных флаконах.
Категорически запрещено использовать цоликлоны с истекшим сроком годности. В таком случае препарат теряет эффективность, может показать совершенно неправильный результат.
Проводить исследование необходимо в светлом и проветриваемом помещении, которое защищено от грязи, пыли и других внешних факторов.
Обязательно соблюдайте пропорции при нанесении реагентов и биоматериала на поверхность планшетки.
Не допускайте, чтобы в одной капли крови смешивались реагенты разных групп. В противном случае вам придется полностью переделывать анализ.
Не стоит использовать слишком большое количество крови, так как реагент может не прореагировать с каждой клеткой.

Длительность анализа составляет не менее 3 минут. Если же врач не может сделать однозначный вывод об конкретной группе крови, исследование может затянуться на 5 минут.

По прошествии 10 минут кровь начинает подсыхать, сами эритроциты – выпадают в осадок. Такому результату доверять не стоит.

Что может повлиять на результат?

При проведении определения группы крови с помощью цоликлонов необходимо учитывать, что эти организмы крайне зависимы от условий окружающей среды.

Именно по этой причине для получения точного результата необходимо придерживаться всех правил гигиены и температурного режима. Учитывайте, что помещение, в которой проводится исследование, должно быть сухим и чистым, все компоненты крови не должны контактировать между собой.

Даже если самая малая капля крови смешается в другим материалом, жидкость начинает менять свои характеристики – это значительно осложняет процесс проведения анализа.

Кроме того, при проведении исследования необходимо учитывать состояние организма. Возможна панагглютинация крови – состояния, когда эритроциты оседают даже при контакте с физраствором.

Обычно такое состояние возникает могут вовсе не реагировать на раздражители – чаще всего такое встречается у людей, больных лейкозом, и у младенцев.

Учитывайте, что в организме одного человека могут находится разные типы эритроцитов. Такое явление появляется у пациентов, которые в прошлом перенесли серьёзное переливание крови, пересадку костного мозга. В таком случае определение группы крови возможно только при наличии специального оборудования.

Определение группы крови с помощью цоликлонов – наиболее простой, но при этом точный метод определения группы крови. Если специалист будет соблюдать все правила и требования, человек сможет получить точный и безошибочный результат. В таком случае вероятность ошибки крайне мала.

— 1 955

Определения группы крови и резус-фактора цоликлонами

Цоликлоны – моноклинальные антитела, которые были получены из крови мышей с помощью генной инженерии и используются для определения группы крови системы АВО и резус-фактора.

Цоликлоны, в противовес стандартным сывороткам, отличаются высокой активностью и авидностью (временем наступления, а также выраженностью склеивания (реакции агглютинации).

Основные цоликлоны:

Анти-A;
Анти-B;
Анти-AB;
Анти-0 и т.д.

По цоликлонам определяют резус-фактор и группы крови.

Техника определения групп с помощью цоликлонов

Определение данным методом производится в лабораторных условиях. Температура воздуха должна находиться в пределах +15 – + 25 градусов по Цельсию. Исследование должно проводиться при достаточно хорошем освещении.

Реагенты необходимо хранить плотно закрытыми, так как при высыхании значительно снижается активность антител. Нельзя использовать содержащие хлопья и мутные реагенты. Для каждого из реагентов требуется отдельная пипетка.

Анализ проводится на белой тарелке или планшете с хорошо смачиваемой поверхностью. Благодаря высокой активности и авидности цоликлонов, есть возможно применение по серии реагентов анти-A и анти-B.

На планшете нужно сделать надписи с названиям антигенов анти-A/анти-B. Далее снизу от соответствующих надписей капают примерно 0,1 миллилитр цоликлонов. У реагента анти-A цвет желтовато-розовый, у анти-B – синий.

Определение групп крови

Возле моноклональных антител капают по одной капле крови, смешивают ее уголком предметного стекла или стеклянной палочкой с реагентами. Перед дальнейшим смешиванием пар капель необходимо тщательно промыть и насухо вытереть стекло или палочку.

Наблюдение за процессом агглютинацией ведут в течение 2,5 минут, при этом тарелку или планшет нужно слегка покачивать. По истечении времени оценивают результат. Стоит отметить, что наблюдения за агглютинацией не требуют каких-либо специальных приспособлений.

Агглютинаты достаточно хорошо видны даже невооруженным глазом, быстро сливаясь и образуя большие хлопья. В случае, если не происходит склеивания, капля реагента приобретает равномерную окраску красного цвета.