Эритротест группокарт: Эритротест группокарт — Здоровье феникса – Эритротест — Здоровье феникса

Содержание

Эритротест группокарт — Здоровье феникса

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность. Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции. Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур. Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Содержание статьи:

Состав крови различных групп крови
Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».
Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.
Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.
Выделяются следующие группы крови по составу:
I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β;

III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά;
IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.
Определение групп крови
Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.
Методы определения
Стандартный метод
Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.
Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.
Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система — посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.
Разведение производится так:
В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.

Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.
Непосредственно исследование проводится таким образом:
На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.
Правила расшифровки результатов
Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

Видео: Определение группы крови и резус-фактора
Здесь возможны варианты:
Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы;
Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй;
При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III;
Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.
Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.
В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции
Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.
Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.
На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.
Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции.

В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.
Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:
Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами Группы крови
0(I) A(II) B(III) AB(IV) 0(I) A(II) B(III)
– – – — – + + 0(I)
+ – + — – – + A(II)
+ +
– — – + – B(III)
+ + + – – – – AB(IV)
+ агглютинация;
– агглютинация отсутствует;
— реакцию не проводят.
Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.
Определение группы крови цоликлонами
Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.
Цоликлоны
Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.
Вид цоликлонов Группа крови
Результат агглютинации Анти-А Анти-В
— — 0(I)
+ — A(II)
— + B(III)
+ + AB(IV)
IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.
Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»
Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:
Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
Чистая пипетка для набора растворов.
Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.
Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.
В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов

Source: moyakrov.info

Читайте также
Эритротест — Здоровье феникса

Определение группы крови является обязательным параметром для допуска и подготовки к различного рода оперативным вмешательствам. Анализ крови на определение группы важен для возможной ситуации, когда появляется необходимость в переливании реципиенту донорской крови, что особенно важно для военных и служащих схожих сфер.
Содержание статьи:
Методы определения групповой принадлежности
Среди методов определения группы крови выделяют стандартный, метод перекрёстной реакции, при помощи цоликлонов и эритротеста-группокарты.
Групповая принадлежность крови по методике определения группы АВ0 устанавливается на основании реакции агглютинации.
Стандартный
Наиболее популярный способ определения группы крови и Rh, в котором использованы стандартные сыворотки. В его процессе выявляются антигены системы АВ0. Сыворотки, используемые при этом способе, состоят из антител к частицам на эритроцитах. Если антиген присутствует, начинается агглютинация эритроцитов, что и приводит к результатам анализа.
Процесс анализа происходит путём проведения следующих манипуляций: в пробирку с раствором обычной соли примешивают плазму. Далее набирают в пипетку получившийся раствор и смешивают в другой пробирке с физиологическим раствором. Далее используется планшет, на котором заранее размещают сыворотки. Возле каждой сывороточной капли капают образец, впоследствии смешиваемый с диагностикумом.
В последнее время часто используется более современный способ с применением гелевой методики, в которой происходит коллаборация агглютинации и использования гелевой среды. Для этого применяются специальные диагностические карточки с микропробирками, в которых и содержится нужный гель. Он может иметь нейтральную среду или содержать антитела и реагенты. Далее микропробирки подвергаются центрифугированию, в процессе которого агглютинированные эритроциты оседают на поверхности колонки с гелем.
Остальные эритроциты выпадают на дно.
По прошествии времени выдержки (около 5-ти минут) анализируют результаты, которые могут быть следующими:
Если агглютинация не наступила со всеми стандартными сыворотками – кровь I группы;
Если агглютинация наступила только с сыворотками O(I) и B(III) — кровь II группы;
Если агглютинация наступила только с сыворотками O(I) и A(II) – кровь III группы;
Если агглютинация наступила со всеми тремя сыворотками — кровь предположительно IV группы, но велика вероятность панагглютинации. Поэтому анализ дополняют четвёртой сывороткой AВ0, если после этого агглютинация не происходит, кровь причисляют к IV группе.
Метод перекрёстной реакции
В данном способе определения группы крови используются как стандартные сыворотки, так и цоликлоны в смеси с эталонными эритроцитами. Её исполнение фактически идентично предыдущей технике, но с некоторыми поправками.
Задайте свой вопрос врачу клинической лабораторной диагностики
Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).Задать вопрос>>
На планшетную поверхность для определения группы крови наносятся сыворотки, а после этого прибавляются эталонные эритроциты.
Далее на планшет наносится плазма пациента, к эталонным эритроцитам, а эритроциты, осевшие на дно – к сывороткам.
Выжидается время и анализируются результаты:
При наступлении агглютинации в двух каплях – группа I;
Если агглютинация не наступила ни в одной из капель – группа IV;
Если реакция наступила в каком-либо эталонном эритроците, далее группа определяется по свёртываемости в капле (её наличию или отсутствию).
Способ с применением цоликлонов
Данный алгоритм определения группы крови проводится зачастую в том случае, когда стандартные сыворотки неприемлемы или при исследовании крови другими способами возникли ошибки.
Метод усложняется требованиями к его проведению.
Температура в лаборатории не должна превышать 25 градусов, освещение должно быть обильным и правильно расположенным. Реагенты должны содержаться в закрытом состоянии, их высыхание уменьшает активность антител. Не используются мутные реагенты или реагенты с примесями. Для каждого реагента используется строго своя пипетка. Также для анализа применяется тарелка со смачиваемой белой поверхностью.
На планшетную поверхность наносят массивные капли цоликлонов с пометками об их виде, далее к ним прибавляют по капле крови и анализируют полученные результаты спустя 3-5 минут.
Расшифровка результата следующая:
При отсутствии реакции агглютинации во всех полученных каплях, когда в наличии нет антигенов А и В — значение выставляется для I группы;
При наличии реакции только в одной капле (анти-А), когда в наличии антиген А, значение выставляется для II группы;
При появлении реакции только в одной капле (анти-В), когда присутствует антиген В, значение выставляется для III группы;
При наличии реакции в обеих каплях, когда в наличии оба антигена, значение выставляется для IV группы, итоги перепроверяются.
Препараты, которые используются для данного анализа на определение группы:
Обычный анти-D-цоликлон, используется для непрямой реакции;
Супер-анти-D-цоликлон, используется для прямой реакции;
Анти-D-микс, совмещающий предыдущие два препарата, используется как для выявления группы, так и резус-фактора.
Посмотрите видео на эту тему
Эритротест-группокарт
Ещё одним способом определения группы крови является применение эритротестов.
Они менее распространены, но в последнее время стали широко внедряться в практику домашнего использования.
Такой комплект можно приобрести в специализированной аптеке и использовать в домашних условиях.
Обычно в комплект набора входит планшет со специальными углублениями для образцов, скарификатор (игла для прокола пальца), стерильная пипетка, в которую происходит забор материала, и набор палочек из стекла для перемешивания содержимого лунок.
С помощью подобного теста можно определить не только принадлежность к группе крови, но и узнать свой резус-фактор.
Алгоритм определения группы крови данным способом построен на использовании вышеуказанных цоликлонов, заранее нанесённых на дно каждой лунки и высушенных для удобства использования. Подготовка набора для определения группы крови состоит в записывании данных исследуемого пациента, нанесении капель воды в каждую из лунок, чтобы привести реагенты в «рабочее» состояние. Далее у пациента забирается кровь и наносится в лунки, перемешивается входящими в комплект палочками. Предварительно кровь наносится на пустое место, не затрагивающее лунки, и уже оттуда разносится разными палочками в каждую лунку отдельно, чтобы избежать загрязнения реагентами и не допустить ошибок. Результаты сравниваются с содержащейся в тесте карточкой с возможными результатами спустя 3-5 минут. Далее можно записать результаты в карточку и сохранить её.
Помимо эритротеста для домашнего использования существуют и иные аппараты, помогающие в определении группы крови и резус-фактора, например, комплект для определения группы крови КГК 01, который также применим и для выявления совместимости крови донора с кровью реципиента.
В набор обычно входит планшет, шпатель и штатив для сывороток.
Плюсы и минусы методов
Если говорить о каждом конкретном методе проверки группы крови, то можно выявить следующее:
Плюс перекрёстного метода в его контрольной направленности, то есть он имеет особенность предотвращать главные ошибки при диагностировании группы крови другими стандартными способами;
Плюс способа с применением цоликлонов заключается в его возможности применения в случаях, когда стандартные сыворотки не могут быть применены. Минус же заключается в сложности проведения, соблюдении всех условий для оптимального проведения процедуры;
Эритротесты хороши тем, что доступны и для домашнего использования, но отрицательной их стороной считается неидеальная результативность, то есть итог может быть некорректным.
Перечисленные методики в общей характеристике в равной степени обладают теми или иными положительными и отрицательными сторонами.
Среди них можно выделить минусы:
Возможность ошибки – даже при проведении сложной и оправданной методики могут появляться ошибочные результаты.
Обязательное соблюдение правил – многие методики должны проводиться в специальных условиях, требующих тщательной подготовки и соблюдения определённых параметров помещения, его температуры и влажности. Реагенты должны корректно храниться, что тоже накладывает свои трудности на практику проведения исследования.
Среди плюсов выделяют:
Многие из данных методик точны, позволяют получить правильный результат с точностью до 100% (особенно это касается способа с применением цоликлонов).
Быстрота выполнения – для проведения анализа и ожидания времени воздействия реагентов на кровь не уходит много времени, обычно продолжительность реакции составляет не более 5-ти минут.
Возможность определения родства при анализе крови на принадлежность к группе.
Достоверность методик
В некоторых случаях при определении группы крови могут возникать ошибки, имеющие различный характер.
Технические ошибки:
Неправильное расположение реагентов — может нарушить корректность проведения анализа, так как спутаются все результаты. Перед применением важно изучить планшет с реагентами на наличие ошибок или некачественности самих реагентов.
Несоблюдение температурного режима – исследование проводится при температуре не выше 25 градусов и не ниже 15 градусов, так как в крови могут содержаться агглютинаты, склеивающие эритроциты при недостатке тепла, а при его избытке антитела А, В и АВ могут терять свою активность.
Нарушение количественного соотношения исследуемого материала и реагентов — приводит к ошибкам в результатах. Если количество эритроцитов значительно выше числа реагентов, агглютинация может пройти практически незаметно; если количества эритроцитов недостаточно, реакция проявляется слишком медленно и приводит к некорректной расшифровке результата.
Несоблюдение времени наблюдения — приводит к некорректной расшифровке. Реакция может появиться спустя 10-15 секунд, что может быть рассмотрено в качестве результата, но для точной результативности важно выждать не менее 5-ти минут, так как слабый антиген А характеризуется замедленной реакцией.
Несоблюдение подвижности смеси – при этом эритроциты могут осесть и дать неправильный результат при оценивании. Планшетную поверхность нужно постоянно покачивать.
Функциональные и другие ошибки:
При определении трудноопределимой группы крови могут появиться ошибки. Так как эритроциты А2 низкоагглютинативны, их определение может вызвать ряд сложностей и появление последующих ошибочных результатов.
Неспецифическая агглютинация эритроцитов – данное отклонение может наблюдаться у пациентов, страдающих анемией или иными аутоиммунными заболеваниями, у младенцев с гемолитическими патологиями.
Неспецифическую агглютинацию можно спутать со специфической, поэтому для проверки проводится проба с сывороткой АВ. Делается это для корректного подбора донора.
Наличие кровяных химер – эритроцитов, которые отличаются по показаниям, но находятся в одном кровяном русле. Возникает при частом переливании крови, у близнецов и после пересадки костного мозга.
При наличии определённых патологий (цирроз печени, сепсис, ожоги) может наблюдаться повышенная агглютинация, что спутывает результаты анализов. При лейкозе обратная ситуация – снижение агглютинабельности.
Роль агглютинации важна в медицине.
С помощью неё выявляется группа крови, патологии. Подобные анализы крови помогают сохранить многим людям жизнь, так как правильный подбор всех параметров крови — резус-фактора и группы — очень важен при переливаниях и проведении оперативных вмешательств.

Source: 1pokrovi.ru

Читайте также
Определение группы крови
Определение группы крови является обязательным параметром для допуска и подготовки к различного рода оперативным вмешательствам. Анализ крови на определение группы важен для возможной ситуации, когда появляется необходимость в переливании реципиенту донорской крови, что особенно важно для военных и служащих схожих сфер.
Методы определения групповой принадлежности
Среди методов определения группы крови выделяют стандартный, метод перекрёстной реакции, при помощи цоликлонов и эритротеста-группокарты.
Групповая принадлежность крови по методике определения группы АВ0 устанавливается на основании реакции агглютинации.
Стандартный
Наиболее популярный способ определения группы крови и Rh, в котором использованы стандартные сыворотки. В его процессе выявляются антигены системы АВ0. Сыворотки, используемые при этом способе, состоят из антител к частицам на эритроцитах. Если антиген присутствует, начинается агглютинация эритроцитов, что и приводит к результатам анализа.
Процесс анализа происходит путём проведения следующих манипуляций: в пробирку с раствором обычной соли примешивают плазму. Далее набирают в пипетку получившийся раствор и смешивают в другой пробирке с физиологическим раствором. Далее используется планшет, на котором заранее размещают сыворотки. Возле каждой сывороточной капли капают образец, впоследствии смешиваемый с диагностикумом.
В последнее время часто используется более современный способ с применением гелевой методики, в которой происходит коллаборация агглютинации и использования гелевой среды. Для этого применяются специальные диагностические карточки с микропробирками, в которых и содержится нужный гель. Он может иметь нейтральную среду или содержать антитела и реагенты. Далее микропробирки подвергаются центрифугированию, в процессе которого агглютинированные эритроциты оседают на поверхности колонки с гелем.
Остальные эритроциты выпадают на дно.
По прошествии времени выдержки (около 5-ти минут) анализируют результаты, которые могут быть следующими:
Если агглютинация не наступила со всеми стандартными сыворотками – кровь I группы;
Если агглютинация наступила только с сыворотками O(I) и B(III) — кровь II группы;
Если агглютинация наступила только с сыворотками O(I) и A(II) – кровь III группы;
Если агглютинация наступила со всеми тремя сыворотками — кровь предположительно IV группы, но велика вероятность панагглютинации. Поэтому анализ дополняют четвёртой сывороткой AВ0, если после этого агглютинация не происходит, кровь причисляют к IV группе.
Метод перекрёстной реакции
В данном способе определения группы крови используются как стандартные сыворотки, так и цоликлоны в смеси с эталонными эритроцитами. Её исполнение фактически идентично предыдущей технике, но с некоторыми поправками.
Задайте свой вопрос врачу клинической лабораторной диагностики
Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).Задать вопрос>>
На планшетную поверхность для определения группы крови наносятся сыворотки, а после этого прибавляются эталонные эритроциты.
Далее на планшет наносится плазма пациента, к эталонным эритроцитам, а эритроциты, осевшие на дно – к сывороткам.
Выжидается время и анализируются результаты:
При наступлении агглютинации в двух каплях – группа I;
Если агглютинация не наступила ни в одной из капель – группа IV;
Если реакция наступила в каком-либо эталонном эритроците, далее группа определяется по свёртываемости в капле (её наличию или отсутствию).
Способ с применением цоликлонов
Данный алгоритм определения группы крови проводится зачастую в том случае, когда стандартные сыворотки неприемлемы или при исследовании крови другими способами возникли ошибки.
Метод усложняется требованиями к его проведению.
Температура в лаборатории не должна превышать 25 градусов, освещение должно быть обильным и правильно расположенным. Реагенты должны содержаться в закрытом состоянии, их высыхание уменьшает активность антител. Не используются мутные реагенты или реагенты с примесями. Для каждого реагента используется строго своя пипетка. Также для анализа применяется тарелка со смачиваемой белой поверхностью.
На планшетную поверхность наносят массивные капли цоликлонов с пометками об их виде, далее к ним прибавляют по капле крови и анализируют полученные результаты спустя 3-5 минут.
Расшифровка результата следующая:
При отсутствии реакции агглютинации во всех полученных каплях, когда в наличии нет антигенов А и В — значение выставляется для I группы;
При наличии реакции только в одной капле (анти-А), когда в наличии антиген А, значение выставляется для II группы;
При появлении реакции только в одной капле (анти-В), когда присутствует антиген В, значение выставляется для III группы;
При наличии реакции в обеих каплях, когда в наличии оба антигена, значение выставляется для IV группы, итоги перепроверяются.
Препараты, которые используются для данного анализа на определение группы:
Обычный анти-D-цоликлон, используется для непрямой реакции;
Супер-анти-D-цоликлон, используется для прямой реакции;
Анти-D-микс, совмещающий предыдущие два препарата, используется как для выявления группы, так и резус-фактора.
Посмотрите видео на эту тему
Эритротест-группокарт
Ещё одним способом определения группы крови является применение эритротестов.
Они менее распространены, но в последнее время стали широко внедряться в практику домашнего использования.
Такой комплект можно приобрести в специализированной аптеке и использовать в домашних условиях.
Обычно в комплект набора входит планшет со специальными углублениями для образцов, скарификатор (игла для прокола пальца), стерильная пипетка, в которую происходит забор материала, и набор палочек из стекла для перемешивания содержимого лунок.
С помощью подобного теста можно определить не только принадлежность к группе крови, но и узнать свой резус-фактор.
Алгоритм определения группы крови данным способом построен на использовании вышеуказанных цоликлонов, заранее нанесённых на дно каждой лунки и высушенных для удобства использования. Подготовка набора для определения группы крови состоит в записывании данных исследуемого пациента, нанесении капель воды в каждую из лунок, чтобы привести реагенты в «рабочее» состояние. Далее у пациента забирается кровь и наносится в лунки, перемешивается входящими в комплект палочками. Предварительно кровь наносится на пустое место, не затрагивающее лунки, и уже оттуда разносится разными палочками в каждую лунку отдельно, чтобы избежать загрязнения реагентами и не допустить ошибок. Результаты сравниваются с содержащейся в тесте карточкой с возможными результатами спустя 3-5 минут. Далее можно записать результаты в карточку и сохранить её.
Помимо эритротеста для домашнего использования существуют и иные аппараты, помогающие в определении группы крови и резус-фактора, например, комплект для определения группы крови КГК 01, который также применим и для выявления совместимости крови донора с кровью реципиента.
В набор обычно входит планшет, шпатель и штатив для сывороток.
Плюсы и минусы методов
Если говорить о каждом конкретном методе проверки группы крови, то можно выявить следующее:
Плюс перекрёстного метода в его контрольной направленности, то есть он имеет особенность предотвращать главные ошибки при диагностировании группы крови другими стандартными способами;
Плюс способа с применением цоликлонов заключается в его возможности применения в случаях, когда стандартные сыворотки не могут быть применены. Минус же заключается в сложности проведения, соблюдении всех условий для оптимального проведения процедуры;
Эритротесты хороши тем, что доступны и для домашнего использования, но отрицательной их стороной считается неидеальная результативность, то есть итог может быть некорректным.
Перечисленные методики в общей характеристике в равной степени обладают теми или иными положительными и отрицательными сторонами.
Среди них можно выделить минусы:
Возможность ошибки – даже при проведении сложной и оправданной методики могут появляться ошибочные результаты.
Обязательное соблюдение правил – многие методики должны проводиться в специальных условиях, требующих тщательной подготовки и соблюдения определённых параметров помещения, его температуры и влажности. Реагенты должны корректно храниться, что тоже накладывает свои трудности на практику проведения исследования.
Среди плюсов выделяют:
Многие из данных методик точны, позволяют получить правильный результат с точностью до 100% (особенно это касается способа с применением цоликлонов).
Быстрота выполнения – для проведения анализа и ожидания времени воздействия реагентов на кровь не уходит много времени, обычно продолжительность реакции составляет не более 5-ти минут.
Возможность определения родства при анализе крови на принадлежность к группе.
Достоверность методик
В некоторых случаях при определении группы крови могут возникать ошибки, имеющие различный характер.
Технические ошибки:
Неправильное расположение реагентов — может нарушить корректность проведения анализа, так как спутаются все результаты. Перед применением важно изучить планшет с реагентами на наличие ошибок или некачественности самих реагентов.
Несоблюдение температурного режима – исследование проводится при температуре не выше 25 градусов и не ниже 15 градусов, так как в крови могут содержаться агглютинаты, склеивающие эритроциты при недостатке тепла, а при его избытке антитела А, В и АВ могут терять свою активность.
Нарушение количественного соотношения исследуемого материала и реагентов — приводит к ошибкам в результатах. Если количество эритроцитов значительно выше числа реагентов, агглютинация может пройти практически незаметно; если количества эритроцитов недостаточно, реакция проявляется слишком медленно и приводит к некорректной расшифровке результата.
Несоблюдение времени наблюдения — приводит к некорректной расшифровке. Реакция может появиться спустя 10-15 секунд, что может быть рассмотрено в качестве результата, но для точной результативности важно выждать не менее 5-ти минут, так как слабый антиген А характеризуется замедленной реакцией.
Несоблюдение подвижности смеси – при этом эритроциты могут осесть и дать неправильный результат при оценивании. Планшетную поверхность нужно постоянно покачивать.
Функциональные и другие ошибки:
При определении трудноопределимой группы крови могут появиться ошибки. Так как эритроциты А2 низкоагглютинативны, их определение может вызвать ряд сложностей и появление последующих ошибочных результатов.
Неспецифическая агглютинация эритроцитов – данное отклонение может наблюдаться у пациентов, страдающих анемией или иными аутоиммунными заболеваниями, у младенцев с гемолитическими патологиями.
Неспецифическую агглютинацию можно спутать со специфической, поэтому для проверки проводится проба с сывороткой АВ. Делается это для корректного подбора донора.
Наличие кровяных химер – эритроцитов, которые отличаются по показаниям, но находятся в одном кровяном русле. Возникает при частом переливании крови, у близнецов и после пересадки костного мозга.
При наличии определённых патологий (цирроз печени, сепсис, ожоги) может наблюдаться повышенная агглютинация, что спутывает результаты анализов. При лейкозе обратная ситуация – снижение агглютинабельности.
Роль агглютинации важна в медицине.
С помощью неё выявляется группа крови, патологии. Подобные анализы крови помогают сохранить многим людям жизнь, так как правильный подбор всех параметров крови — резус-фактора и группы — очень важен при переливаниях и проведении оперативных вмешательств.
Эритротест-Цоликлоны для определения антигенов системы резус
ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОН Анти-D CУПЕР содержит моноклональные анти-D антитела человека класса IgM, направленные к эпитопу D 6.4. Быстро и надежно определяет D антиген в реакции прямой гемагглютинации на плоскости, в пробирочном тесте, в автоматизированных системах и т.д. Срок годности – 1 год при 2-8оС. Форма выпуска – жидкие готовые к употреблению во флаконах-капельницах по 5 и10 мл и в стеклянных флаконах по 2 и 5 мл.
ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОН Анти-D является смесью четырех моноклональных антител человека класса IgG и направленных к эпитопам D 6.2, 6.3, 6.7 Реагент может быть использован в непрямом антиглобулиновом тесте (непрямая проба Кумбса), в тестах с белково-коллоидными неспецифическими усилителями (желатином, альбумином, декстраном и др.) или с эритроцитами, обработанными протеолитическими ферментами. ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОН Анти-D IgG создан специально для определения всех форм D антигена, включая DVI. Резус-типирование неполными антителами в непрямой пробе Кумбса более трудоемко, однако ряд слабых форм D-антигена (Du) могут быть определены только антителами IgG-класса в этом тесте. Как известно, лица с группой крови Du рассматриваются как резус-положительные, если они являются донорами, и как резус-отрицательные, если они являются реципиентами. Поэтому Du антиген необходимо определять только у доноров, причем только у тех, которые были определены как резус-отрицательные в прямой агглютинации с ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОНОМ Анти-D СУПЕР (см. Схему применения анти-D Эритротесттм-Цоликлонов). Так как типирование доноров осуществляется на станциях переливания крови или в отделениях переливания крови, обладающих всеми возможностями для проведения реакции с неполными антителами, ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОН Анти-D IgG рекомендуется для использования, главным образом, в этих специализированных подразделениях. Срок годности – 2 года при 2-8оС. Форма выпуска – жидкие готовые к употреблению во флаконах-капельницах по 5 и10 мл и в стеклянных флаконах по 5 мл.
ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОНЫ Анти-С СУПЕР, Анти-СW СУПЕР и Анти-Е СУПЕР содержат моноклональные антитела человека класса IgM и выявляют соответствующий антиген системы резус в реакции прямой агглютинации на плоскости, в пробирках или в микроплате. Моноклональные антитела, входящие в состав ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОНОВ Анти-С СУПЕР, Анти-СW СУПЕР и Анти-Е СУПЕР, обладают высокой авидностью, высоким титром и не дают перекрестных реакций. Специальные добавки обеспечивают стерильность препаратов, их стабильность и повышенную активность в реакции гемагглютинации на плоскости. Реагенты не содержит антител других специфичностей и не требуют проведения контроля растворителя. Срок годности – 1 год при 2-8оС. Форма выпуска – жидкие готовые к употреблению во флаконах-капельницах по 5 и10 мл и в стеклянных флаконах по 2 и 5 мл
ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОН Анти-СЕ СУПЕР содержит два типа моноклональных антител человека класса IgM (анти-С и анти-Е) и предназначен для выявления С и Е антигенов системы резус в реакции прямой агглютинации на плоскости, в пробирках или в микроплате. Реагент можно использовать при тестировании D-отрицательной крови доноров для выявления dCe и dcE фенотипов вместо двух Цоликлонов: анти-С Супер и Анти-Е Супер. Использование ЦОЛИКЛОНА Анти-СЕ дает возможность более экономичного определения резус-принадлежности донора, когда не требуется подробного исследования резус-фенотипа крови. Срок годности – 1 год при 2-8оС. Форма выпуска – жидкие готовые к употреблению во флаконах-капельницах по 5 и10 мл и в стеклянных флаконах по 2 и 5 мл.
ЭРИТРОТЕСТ™-ЦОЛИКЛОНЫ Анти-с СУПЕР и Анти-е СУПЕР содержат моноклональные антитела человека класса IgM и выявляют соответствующий антиген системы резус в реакции прямой агглютинации на плоскости, в пробирках или в микроплате. Моноклональные антитела, входящие в состав препаратов, обладают высокой авидностью и не дают перекрестных реакций. В случае превышения рекомендуемого времени наблюдения возможно образование пылевидной агглютинации при подсыхании капли. При затруднении в трактовке результата рекомендуется провести контрольную реакцию с растворителем (поставляется дополнительно). Срок годности – 1 год при 2-8оС. Форма выпуска – жидкие готовые к употреблению во флаконах-капельницах по 5 и10 мл и в стеклянных флаконах по 2 и 5 мл.
Агглютинация крови — это… Группы крови и реакции агглютинации
Агглютинация крови — это склеивание и оседание в виде осадка эритроцитов, бактерий и других клеток, которые несут антигены.
Процесс происходит под воздействием агглютининов, которые являются специфическими веществами. В роли этих веществ выступают лектины или антитела.
Возможные виды агглютинации при определении группы крови
Агглютинация бывает специфической и неспецифической. В первом случае реакция происходит с участием трех компонентов:
антигенов;
антител;
электролитов (применяется изотонический раствор).
Используются все возможные виды агглютинации при определении группы крови, однако это не единственный случай.
С какой целью используется?
Реакция агглютинации крови применяется для того, чтобы выявить возбудителя инфекционного заболевания. При этом он оседает, и его легко обнаружить в осадке. Данный процесс используется, как уже упоминалось выше, и при определении группы крови. Именно об этом и пойдет речь дальше.
Каковы особенности?
Эритроциты содержат антигены типа А и В. Они связываются с антителами ά и β соответственно. Группы крови и реакции агглютинации:
1, 0 (ά, β) – отсутствуют антигены на поверхности эритроцитов;
2, А (β) – присутствует антиген А и антитело β;
3, В (ά) – содержится антиген В и антитело ά;
4, АВ (00) – присутствуют два антигена, антитела отсутствуют.
Стоит отметить, что антигены уже наблюдаются у эмбриона. Что касается антител, они появляются после рождения, на первом месяце жизни.
От группы крови зависит совместимость людей. В этом и состоит причина отторжения плода организмом матери. Другими словами, у нее присутствуют антитела к антигенам крови будущего ребенка. В этом случае возникает несовместимость. Кроме того, группа крови обязательно учитывается при переливании.
Подготовка
Группы крови и реакции агглютинации — совместимые понятия, которые зачастую используются в медицине.
Перед тестом важно придерживаться определенных инструкций. Следует на время исключить употребление некоторых продуктов и лекарственных препаратов. Это поможет сделать результаты более точными. Рекомендации, которых нужно придерживаться, назначает врач. Дело в том, что у разных лабораторий могут не совпадать диапазоны полученных значений, то есть они немного отличаются.
Условия для проведения теста
Чтобы группа крови была определена точно, важно подобрать правильное оснащение. К таковому относятся:
физиологический раствор и пипетка;
стеклянные палочки;
стандартные изогемагглютинирующие сыворотки;
сухие фаянсовые тарелки, которые разделены на 4 сектора.
Существуют требования и к условиям проведения теста:
дневное освещение;
температура в помещении выше +16 ˚С;
использование объемов крови и сыворотки в соотношении 1:10;
достоверные результаты получаются в течение 5 минут.
Выше представлены основные условия и инструменты. Агглютинация крови может проводиться несколькими способами, и каждый из них выдвигает индивидуальные требования.
Методы
Возможные методы определения группы крови с помощью агглютинации:
стандартный метод;
перекрестная реакция;
использование цоликлонов;
экспресс-методика с применением набора «Эритротест-группокарт».
Стандартный метод
Агглютинация крови проявляется с использованием эритроцитов пациента. Также применяются стандартные сыворотки, которые содержат известные антигены.
На плоскую тарелку размещается по 1 капле четырех сывороток. Затем с помощью стеклянных палочек на нее вносится кровь пациента, подлежащая исследованию. В данном случае удобно использовать глазные пипетки. Следует придерживаться соотношения 1:10. Сыворотка и кровь осторожно перемешивается. В течение пяти минут можно проводить оценку.
Расшифровка результатов теста простым методом
По истечении указанного времени в каплях сыворотки наблюдается просветление. В некоторых можно увидеть, что агглютинация эритроцитов произошла (мелкие хлопья), в других она отсутствует.
Существуют следующие варианты:
реакции нет во всех пробах сывороток − 1 группа;
свертывание произошло везде, кроме 2 пробы – 2 группа;
отсутствие реакции только в 3 пробе – 3 группа;
агглютинация произошла везде – 4 группа.
Таким образом, главное — правильно распределить сыворотки. Тогда расшифровать результат не составит труда. Если агглютинация крови проявляется слабо, рекомендуется провести анализ повторно. В случае с мелкими хлопьями их рассматривают под микроскопом.
Перекрестная реакция
Иногда простым способом невозможно точное определение группы крови. Агглютинация в таком случае проводится с помощью метода перекрестной реакции. В отличие от первого варианта теста, важное значение здесь имеют стандартные эритроциты. Кровь пациента набирается в пробирку, центрифугируется, а затем пипеткой откачивается сыворотка для дальнейших исследований.
Она в количестве 2 капель помещается на тарелку, потом в нее добавляются стандартные эритроциты групп А и В. Содержимое размешивается путем покачивания емкости.
Результаты метода перекрестной реакции
Через пять минут пробы готовы к рассмотрению. Варианты такие:
склеивание произошло в обеих каплях – 1 группа;
хлопья не наблюдаются ни в одной из проб – 4 группа;
процесс виден в одном образце – 2 или 3 группа (в зависимости от того, где именно свернулась кровь).
Метод с использованием цоликлонов
Для определения группы крови агглютинация таким способом проводится с применением синтетических заменителей сывороток. Они называются цоликлонами. В них содержатся искусственные заменители ά и β-агглютинов, известных как эритротесты (розового и синего цвета соответственно). Реакция происходит между ними и эритроцитами крови пациента.
Такой метод является самым точным и надежным. В основном он не требует повторного проведения исследования. Оценка результатов осуществляется аналогичным образом, как в случае стандартного метода. Особенность состоит в том, что четвертая группа крови должна обязательно быть подтверждена реакцией со специфическим синтетическим заменителем (анти-АВ). Кроме того, в ней не наблюдается склеивание при добавлении раствора хлорида натрия.
Экспресс-методика с набором «Эритротест-группокарт»
Рассматривая возможные методы анализа при определении группы крови, стоит отметить, что данный способ имеет свои особенности. Они заключаются в том, что результат можно оценить не только в лаборатории, но и в полевых условиях. Для проведения исследования используется специальный набор. Он включает в себя карточку с лунками, на дне которых уже присутствуют высушенные реагенты. Помимо анти-АВ, анти-А и анти-В, применяется анти-D, позволяющий определить резус-фактор.
Этот метод не требует особой подготовки, разрешено использовать кровь, которая взята из пальца, допускается наличие в ней консервантов. Сначала необходимо внести в каждую лунку по капле воды, чтобы растворить ингредиенты. После этого добавляется кровь, слегка размешивается. Через три минуты будет получен результат.
Ложная агглютинация
Иногда данные, полученные после проведения теста, не соответствуют действительности. Такое явление зависит от определенных факторов.
Выделяют три вида ложной реакции:
Псевдоагглютинация. Истинное склеивание не происходит, эритроциты просто складываются в виде монетных столбиков. Если добавить пару капель физиологического раствора, они распадаются. Подобное явление распознается под микроскопом.
Холодная агглютинация крови. Такая реакция наблюдается в том случае, если условия для проведения исследования были неблагоприятными. Когда температура ниже +16 ˚С, может проявляться склеивание.
Панагглютинация. При наличии инфекции в крови результаты тестов могут быть ложными. Такое явление также возможно в случае с онкологическими заболеваниями, при сепсисе.
Агглютинация очень важна в медицине. Она позволяет не только определять группу крови, но и выявлять возбудителя заболеваний, а также наличие инфекций. Главное, придерживаться рекомендаций врача при подготовке к данной процедуре. Что касается медицинского персонала, его задача состоит в создании благоприятных условий и соблюдении всех правил. Только таким образом можно добиться точных результатов при выполнении агглютинации крови.
Тест-системы для определения группы крови и резус-принадлежности ABO Trol forte
Назначение
Экспресс-диагностические карты для определения группы крови по системам AB0 и Резус у «постели пациента».
Настоящие диагностические карты представляют собой пластиковые одноразовые тест-системы для экспресс-диагностики (в том числе у постели больного) групповой AB0 и Резус-принадлежности.
Можно использовать для исследований осадок эритроцитов, цельную кровь, эритроцитарную массу.
Карты имеют запаянные пленкой, промаркированные (анти-А, анти-B, анти-D) лунки, содержащие соответствующие жидкие моноклональные реагенты.
Пленка, покрывающая лунки, самозатягивающаяся, что способствует повышению биологической безопасности исследований.
В правой части карты поле для нанесения данных о групповой принадлежности, дате исследования, Ф.И.О. пациентов, а также серия и срок годности карт. Поле с записями можно отклеить и поместить в Карту пациента, при этом записи остаются на диагностической карте (копирка).
Техника применения
Выбрать для исследований необходимый вариант карты, промаркировать ее правое поле.

С помощью шприцов или шприц-пробирок взять цельную или на консерванте кровь у реципиента и донора.

Добавить по 1 капле исследуемой крови из одного шприца (например, реципиент), в верхний ряд лунок, затем из другого шприца — в нижний ряд лунок аналогичным образом.

Аккуратно горизонтально встряхнуть карту, до полного перемешивания крови с реагентом.

Считать наличие или отсутствие агглютинации в лунках в течении 1 минуты, реакция в анти-А и анти-В лунках начнется с первых 10 секунд.

Интерпретация результатов реакций
наличие агглютинации свидетельствует о присутствии данного антигена у пациента.

Отсутствие агглютинации — отсутствие данного антигена у пациента.

Заключение о наличии определенной групповой и резус — принадлежности каждого пациента делается на основании совокупности результатов всех лунок одного ряда.

Упаковка
АВО Trol forte II Карты имеют запаянные пленкой, промаркированные (анти-А, анти-В,) лунки, содержащие соответствующие жидкие моноклональные мышиные и человеческие реагенты – 50 шт
АВО Trol forte plus Карты имеют запаянные пленкой, промаркированные (анти-А, анти-В, анти-D) лунки, содержащие соответствующие жидкие моноклональные мышиные и человеческие реагенты– 30 шт
Срок годности 1 год.